申请/专利权人:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日:2021-08-26
公开(公告)日:2022-09-20
公开(公告)号:CN113957093B
主分类号:C12N15/85
分类号:C12N15/85;C12N15/113;C12N15/12;C12N15/57;C12N5/10;C12N15/877;A01K67/027
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.09.20#授权;2022.02.15#实质审查的生效;2022.01.21#公开
摘要:本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种用于pAPN基因定点修饰的系统及其应用。本发明提供用于pAPN基因定点修饰的系统,该系统中含有的第一载体和第二载体可以表达基因编辑蛋白和sgRNA,对pAPN基因的两个靶位点进行有效酶切,利用供体DNA的定点修饰片段替换位于两个靶位点之间的待定点修饰片段,实现pAPN基因第738位氨基酸的精准突变,T738替换为V738。在精确修饰pAPN基因第738位氨基酸的同时,能够避免破坏或改变pAPN基因的其余氨基酸的正常表达,因此在抵抗TGEV感染的基础上,最大程度上保留pAPN蛋白生理活性功能,并且具有适用范围广、基因编辑效率高等优点。
主权项:1.一种用于pAPN基因定点修饰的产品,其特征在于,含有第一载体、第二载体和供体DNA;所述第一载体包括基因编辑蛋白表达盒和第一sgRNA表达盒;所述第二载体包括基因编辑蛋白表达盒和第二sgRNA表达盒;第一sgRNA和第二sgRNA分别靶向pAPN基因的两个靶位点;所述供体DNA含有pAPN基因第738位氨基酸的定点修饰片段,所述定点修饰片段用于替换pAPN基因待定点修饰片段;所述pAPN基因待定点修饰片段位于所述两个靶位点之间;所述pAPN基因定点修饰为pAPN基因T738替换为V738。
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权利要求:
百度查询: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 用于pAPN基因定点修饰的系统及其应用
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