【发明公布】在中枢神经系统炎症性疾病患者中用于检测MOG-IGG的基于细胞的检测方法_国立癌症中心_202180013657.X 

申请/专利权人:国立癌症中心

申请日:2021-02-03

公开(公告)日:2022-09-23

公开(公告)号:CN115104031A

主分类号:G01N33/68

分类号:G01N33/68;G01N33/53;C07K16/28;C12N5/071

优先权:["20200210 KR 10-2020-0015655"]

专利状态码:在审-公开

法律状态:2022.09.23#公开

摘要:本发明涉及一种用于检测MOG‑IgG的方法,其中,包括:a将编码MOG的核酸克隆到荧光蛋白表达载体的步骤;b将克隆MOG的所述表达载体转染到细胞的步骤;c通过在含有选择试剂的培养基中培养所述经转染的细胞来选择稳定转染细胞株的步骤;d将所述选择的细胞株与预期含有MOG‑IgG的样品一起孵育的步骤;e在完成孵育的样品中添加荧光偶联的第二抗体以形成MOG‑IgG和第二抗体偶联物的步骤;以及f从所述MOG‑IgG和第二抗体偶联物检测或分析荧光的步骤、以及提供用于预测或诊断MOG‑IgG相关的中枢神经系统炎症性疾病的信息的方法、用于诊断MOG‑IgG相关的中枢神经系统炎症性疾病的组合物、以及MOG‑IgG相关的中枢神经系统炎症性疾病的诊断方法。在本发明中,当使用荧光偶联的IgGH+L作为特异性结合MOG‑IgG的第二抗体时,CBA‑IF和CBA‑FACS结果之间存在很强的正相关性,并确认到与传统的IgG1OxfordCBA‑IF相比,也显示出高约98%的一致率,特别是,本发明的方法,通过制备表达MOG的稳定细胞株,存在不需要重复转染,并且,与第二抗体IgM不发生交叉反应,特异性高,能获得更清晰的荧光信号的优点。

主权项:1.一种用于从样品中检测MOG-IgG的方法,其中,包括:a将编码MOG的核酸克隆到荧光蛋白表达载体的步骤;b将克隆MOG的所述表达载体转染到细胞的步骤;c通过在含有选择试剂的培养基中培养所述经转染的细胞来选择表达MOG的稳定转染细胞株的步骤;d将所述选择的细胞株与预期含有MOG-IgG的样品一起孵育的步骤;e在完成孵育的样品中添加荧光偶联的第二抗体以形成MOG-IgG和第二抗体偶联物的步骤;以及f从所述MOG-IgG和第二抗体偶联物检测或分析荧光的步骤。

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权利要求:

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