申请/专利权人：安徽惠邦生物工程有限公司

申请日：2022-06-15

公开（公告）日：2022-09-23

公开（公告）号：CN115097122A

主分类号：G01N33/535

分类号：G01N33/535;G01N33/74;G01N33/577;G01N33/543;G01N21/76

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2022.10.14#实质审查的生效;2022.09.23#公开

摘要：本发明公开了一种抗缪勒氏管激素抗体‑酶标记物的制备方法，包括以下步骤：碱性磷酸酶的马来酰胺化、AMH抗体的巯基化、交联、封闭、纯化，该制备方法优化改良了常规的采用异型双功能交联剂制备酶标抗体步骤，所述方法中采用超滤的方式纯化马来酰胺化的碱性磷酸酶、巯基化的AMH抗体及标记后的AMH抗体‑碱性磷酸酶标记物，取代常规的透析方式的纯化，不仅省去了透析的繁杂过程，缩短了酶标抗体的制备时间，还可以减少原料损耗；还公开了利用该制备方法制得的抗缪勒氏管激素抗体‑酶标记物及利用所述抗缪勒氏管激素抗体‑酶标记物制备AMH酶标抗体检测试剂的应用，其制得的AMH酶标抗体检测试剂检测AMH灵敏度高，稳定性好。

主权项：1.一种抗缪勒氏管激素抗体-酶标记物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1碱性磷酸酶的马来酰胺化配制GMBS工作液，将ALP溶液与GMBS工作液混合，室温避光反应30min～60min后，采用超滤离心管离心纯化2～3次；2AMH抗体的巯基化配制DTT工作液，将AMH抗体溶液与DTT工作液混合，室温避光反应30min～60min后，采用超滤离心管离心纯化3～5次；3交联、封闭将马来酰胺化的碱性磷酸酶与巯基化的AMH抗体混合，室温避光反应1～2h；反应结束后，按一定浓度先后加入N-乙基马来酰亚胺和L-半胱氨酸，放置于室温，避光反应30min～60min，进行封闭；4纯化将步骤3制备的交联产物采用超滤离心管离心纯化3～5次，将纯化后的产物用pH为7.0～7.5的10mMPBS稀释到合适的储存体积，再加入等体积甘油，-20℃冷冻保存。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 安徽惠邦生物工程有限公司 抗缪勒氏管激素抗体-酶标记物及其制备方法和应用

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