申请/专利权人：上海交通大学

申请日：2022-06-28

公开（公告）日：2022-09-23

公开（公告）号：CN115094079A

主分类号：C12N15/70

分类号：C12N15/70;C12N15/66;C12N1/21;C12N15/90;C12N15/62;C12R1/19

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.11.07#授权;2022.10.14#实质审查的生效;2022.09.23#公开

摘要：本发明公开了一种T6SS大肠杆菌工程菌及其构建方法与应用，具体为蛋白VI型分泌系统在异源大肠杆菌中的构建以及该大肠杆菌工程菌的生理功能特性鉴定，属于生物技术领域。本发明所述的T6SS基因簇是通过AeromonasdhakensisSSU全基因组数据而获得的，其基因簇全长约38kb，编码25个基因。本发明首次实现了T6SS在E.coliBL21DE3中的异源表达和组装，并对T6SS工程菌进行了一系列的表征和应用。该大肠杆菌工程菌具有较强的细菌杀伤能力以及蛋白分泌能力，将在细菌竞争以及免疫调节中具有广阔应用前景。

主权项：1.一种T6SS表达质粒，其特征在于，所述T6SS表达质粒通过以下方法构建所得：步骤A1、质粒载体的获取：设计含有来源于A.dhakensisSSU的基因组的T6SS基因簇同源臂的两组特异性引物，反向引物为两种，正向引物一种；以相同质粒为模板，分别使用上述两组引物进行载体扩增，得到载体；步骤A2、RecET直接克隆T6SS基因簇：携带质粒的菌株表达RecET重组酶，电转线性T6SS基因簇和上述的质粒载体，进行克隆，构建出T6SS表达质粒。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海交通大学 T6SS大肠杆菌工程菌及其构建方法与应用

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