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【发明公布】一种酸性条件下识别大肠杆菌的链状脱氧核酶探针与应用_大连理工大学_202210779158.8 

申请/专利权人:大连理工大学

申请日:2022-06-30

公开(公告)日:2022-09-23

公开(公告)号:CN115094061A

主分类号:C12N15/113

分类号:C12N15/113;C12N15/10;G01N33/569;G01N33/58

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2022.10.14#实质审查的生效;2022.09.23#公开

摘要:本发明公开了一种酸性条件下识别大肠杆菌的链状脱氧核酶探针与应用,属于脱氧核酶探针技术领域。将磷酸化的文库酶链、底物链和连接链在T4DNA连接酶的作用下连接,构建链状DNA文库,进行反向筛选,分离纯化未切割底物RNA位点的DNA条带,所得的DNA条带作为链状DNA文库,进行正向筛选,分离纯化切割底物RNA位点的DNA条带,进行PCR扩增,回收正义链,进行多轮重复筛选,得到链状脱氧核酶探针,该探针能够高特异性、快速地检测大肠杆菌,具有在生物传感应用方面发挥优势的潜力。

主权项:1.一种脱氧核酶探针,其特征在于,所述脱氧核酶探针的核苷酸序列为如下序列1~7中的任一:1CTATGAACTGACQRFGACCTCACTACCAAGCAGGTCCATCGAGTGGTAGGATGAGGGGTTACTAGCTAGAGCGTAAGCCTTCGGCGGTCAGTCGCACTGCTCCTGAACGTAC;2CTATGAACTGACQRFGACCTCACTACCAAGCAGGTCCATCGAGTGGTAGGAGCGGATCCGGGACTAGTAAGCGGAGTTCAGGAATAATGACTCGCACTGCTCCTGAACGTAC;3CTATGAACTGACQRFGACCTCACTACCAAGCAGGTCCATCGAGTGGTAGGAGGCCCAGTATATGTAGGGATCGTATGGAAAGGCAGAGCACTCGCACTGCTCCTGAACGTAC;4CTATGAACTGACQRFGACCTCACTACCAAGCAGGTCCATCGAGTGGTAGGAGGGCTCACCGGTATAGGCGGGAGAGTACGGAGGAATTGGCTCGCACTGCTCCTGAACGTAC;5在SEQIDNO.13所示的核苷酸序列的5’端连接荧光基团;6SEQIDNO.14所示的核苷酸序列;7在SEQIDNO.15所示的核苷酸序列的5’端连接荧光基团;其中,R代表单个插入的RNA碱基A,F代表含有荧光基团的T碱基,Q代表含有淬灭基团的T碱基。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 大连理工大学 一种酸性条件下识别大肠杆菌的链状脱氧核酶探针与应用

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