申请/专利权人:河南中烟工业有限责任公司
申请日:2021-06-21
公开(公告)日:2022-09-23
公开(公告)号:CN113475745B
主分类号:C12N1/20
分类号:C12N1/20;A24B15/20
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.09.23#授权;2021.10.26#实质审查的生效;2021.10.08#公开
摘要:本发明公开了一种烟叶处理复合生物制剂及鲜烟叶的处理方法,烟叶处理复合生物制剂包括保藏编号为CGMCCNO.21313的微球菌ZY02和保藏编号为CGMCCNO.21544的葡糖酸醋杆菌ZT‑01。本公开的烟叶处理复合生物制剂可使得鲜烟叶在高温烘烤条件下产生香味成分,有效提高了鲜烟叶的品质。
主权项:1.一种鲜烟叶的处理方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:将保藏编号为CGMCCNO.21313的微球菌MicrococcaceaePribramZY02的菌落接种至液体培养基中,于25-40℃,100-200rmin的摇床中培养6-36h,得到微球菌种子液,将微球菌种子液在4000rmin,4℃条件下低温离心,去除上清液,加入无菌水复溶,调节OD600为2.0,得到微球菌种子;步骤2:配制含有葡萄糖、蛋白胨、酵母粉和一水合柠檬酸的水溶液,调节pH并灭菌后,接种保藏编号为CGMCCNO.21544的葡糖酸醋杆菌Gluconacetobactersp.ZT-01,恒温震荡培养一段时间,制得葡糖酸醋杆菌种子液;步骤3:将烟末与去离子水按照质量比1:2-20混合,在30℃-100℃下提取0.5h-5h,过滤后取滤液加入可溶性淀粉和可溶性蛋白,混匀并灭菌,得到烟草发酵诱导培养基;步骤4:将微球菌种子和烟草发酵诱导培养基按照体积比1:50-1000混合,在温度25-40℃、50-300rmin搅拌发酵1-5d,发酵后的烟草发酵诱导培养基离心后在冰水浴中超声破碎,然后低温离心,取上清液,得到ZY02生物制剂;步骤5:将葡糖酸醋杆菌种子液和烟草发酵诱导培养基按照体积比1:10-1000混合,在温度25-40℃、50-300rmin下先搅拌发酵12-48h再静置12-72h,发酵后的烟草发酵诱导培养基离心后在冰水浴中超声破碎,然后低温离心,取上清液,得到ZT-01生物制剂;步骤6:将ZY02生物制剂和ZT-01生物制剂根据体积比1-10:1-10混合,得到复合生物制剂;步骤7:在鲜烟叶烘烤前,根据复合生物制剂与鲜烟叶的体积质量比为1:50-10000将复合生物制剂以喷雾的方式添加至鲜烟叶中。
全文数据:
权利要求:
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