申请/专利权人：江苏奕农生物股份有限公司

申请日：2021-11-05

公开（公告）日：2022-09-27

公开（公告）号：CN113980921B

主分类号：C12N9/02

分类号：C12N9/02;C12N11/04;C12N11/02;C12N11/14

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.09.27#授权;2022.02.18#实质审查的生效;2022.01.28#公开

摘要：本发明公开了一种离子液体修饰的复合材料固定化漆酶的方法，所述离子液体修饰的复合材料用于漆酶的固定化，其制备包括复合材料的制备、复合材料的酸化及离子液体的修饰三个主要步骤；制备过程中，首先以累托石为原料，通过煅烧制备得到累托石复合材料；随后通过酸化、偶联剂改性在累托石复合材料表面形成丰富的羟基、氨基，最后利用上述羟基、氨基与离子液体进行结合，实现离子液体对载体的进一步修饰。所得固定化酶的固定量接近120mgg；对常见的酚类物质2,4‑二氯苯酚、邻苯二酚、间苯二酚都具有良好的降解吸附效果，其中间苯二酚、2,4‑二氯苯酚的降解吸附率超过90%，邻苯二酚的降解吸附率接近80%，应用前景广阔。

主权项：1.一种离子液体修饰的复合材料固定化漆酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）漆酶固定化载体的制备；（2）漆酶的固定化；其中，漆酶固定化载体的制备包括如下步骤：S1、复合材料的制备：将除杂干燥后的累托石与去离子水混合，接着加入硫酸铁溶液并调节pH至中性；随后进行搅拌反应，反应完成后进行抽滤、洗涤、干燥处理，经研磨后于750~850℃下煅烧，即得复合材料；S2、复合材料的酸化：将步骤S1得到的复合材料与稀盐酸溶液混合后，进行搅拌反应，反应完成后加入偶联剂溶液进行浸泡，浸泡完成后经洗涤、干燥处理，即得酸化复合材料；S3、离子液体的修饰：将步骤S2得到的酸化复合材料分散到溶剂中，随后加入离子液体，接着加热回流反应一段时间，反应完成后经过滤、洗涤、干燥处理，即得漆酶固定化载体；其中，步骤S2中偶联剂溶液通过以下方法制备得到：按照1~3%wt的浓度，将KH-550溶于体积比为1:4的水、丙酮混合溶液中即得；其中，步骤S3中溶剂为氯仿、丙酮、乙醇中的一种或多种，离子液体为1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体，离子液体与酸化复合材料的质量比为10~20：1；其中，步骤S3中回流反应温度为75~95℃，回流反应时间为18~36h；其中，步骤S1中硫酸铁与累托石的质量比为1:1.5~2.5，硫酸铁的浓度为0.05~0.2gg；其中，步骤S2中稀盐酸的质量分数为8~12%，稀盐酸溶液与复合材料的质量比为3~6:1；其中，步骤S2中搅拌反应温度为60~100℃，搅拌反应时间为1~3h；其中，步骤（2）中漆酶的固定化包括如下步骤：室温下，取1.5mLpH为5.5的含漆酶的醋酸-醋酸钠缓冲液，随后加入0.5g漆酶固定化载体，室温下震荡2h，抽滤、洗涤后即得固定化漆酶；其中，漆酶的浓度为0.5gL。

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