申请/专利权人：中国药科大学

申请日：2019-05-07

公开（公告）日：2022-11-08

公开（公告）号：CN110078725B

主分类号：C07D417/14

分类号：C07D417/14;A61K31/4545;A61P25/00;A61P35/00;A61P29/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.11.08#授权;2019.08.27#实质审查的生效;2019.08.02#公开

摘要：本发明公开了一种如通式Ⅰ所示的化合物，本发明所涉及的化合物能够有效的靶向降解体内的GSK‑3β，该技术可以有效的减少药物分子的给药剂量和给药时间，达到延长PD的效果。

主权项：1.靶向泛素化降解GSK-3β蛋白的化合物，其特征在于，选自如下化合物：2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶）-N-（3-（2-（2-（2,6-二氧代哌啶）氧基氨基）乙酰氨基）丙基）-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶-4-基）-N-（4-（（2-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）氧基）乙酰氨基）甲基）己基）-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（2-（（3-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基）丙-2-炔-1-基）氧基）乙氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（2-（（3-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基）丙-2-炔-1-基）氧基）乙氧基）噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（（5-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基）戊-4炔-1-基）氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（2-（（3-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1-二氧代异吲哚啉-4-基）丙-2-炔-1-基）氧基）乙氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；（2-（2-（环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（2-（（3-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1-二氧代异吲哚啉-4-基）丙-2-炔-1-基）氧基）乙氧基）噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺基）吡啶-4-基）-4-（（5-（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1-氧代异吲哚-4-基）戊基）氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶）-4-（6-（（2-（2,6-二氧代哌啶）己基）氧基）噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶）-4-（（6-（2-（2,6-二氧代哌啶）氧基）-4-乙基己基）氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶）-4-（4-（2-（（2-（2,6-二氧代哌啶）氧基）乙基）-5-甲基庚基）氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶）-4-（（4-（2-（（2-（2,6-二氧代哌啶）氧基）乙基）-2-乙基-5-甲基庚基）氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；（2-（2-环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（2-（2-（2-（（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3-二氧代异吲哚啉-2-基）哌啶-4-基）氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺）吡啶-4-基）-4-（2-（2-（2-（2-（（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3（二氧代异吲哚啉-4-基）氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰胺基）吡啶-4-基）-4-（（8-（4-（（（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3-二氧代异吲哚-4-基）基）氧基）甲基）-1H-1,2,3-三唑-1-基）辛基）氧）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶-4-基）-4-（2-（2-（2-（4-（（（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基）氧基）甲基）-1H-1,2,3-三唑-1-基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-（2-（环丙烷甲酰氨基）吡啶-4-基）-4-（2-（2-（2-（2-（4-（（（2-（2,6-二氧代哌啶-3-基）-1-，3-二氧代异吲哚啉-4-基）氧基）甲基）-1H-1,2,3-三唑-1-基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）-N-甲基噻唑-5-甲酰胺。

全文数据：靶向泛素化降解GSK-3β蛋白的化合物及其应用技术领域本发明涉及一种靶向泛素化降解GSK-3β蛋白的化合物及其应用，属于纳米医学领域。背景技术现有技术中GSK-3β抑制剂主要是通过使抑制剂与GSK-3β非共价结合，从而抑制其激酶活性，但如果GSK-3β抑制剂被机体代谢，GSK-3β蛋白将恢复原有活性。因此需要提供一种能靶向降解GSK-3β的化合物，从而能够实现对GSK-3β蛋白有关的病症进行调控，如神经退行性疾病、癌症和炎症等。发明内容发明目的：针对现有恶性现有技术中降解GSK-3β蛋白化合物的不足，本发明要解决的问题是提供一种靶向泛素化降解GSK-3β蛋白的化合物。技术方案：1.靶向泛素化降解GSK-3β蛋白的化合物，其结构如通式Ⅰ所示：或者其药学上可接受的盐、溶剂化物或者前药或者对映异构体或者代谢物，其中，L选自C3～C15饱和烷基、C3～C15不饱和烷基、C4～C20烷氧基、三氮唑基团；R1选自-OR3、-NHR4、含有沙利度胺片段的基团；R2选自氢、甲氧基等烷基、取代芳香基、环烷基、含有沙利度胺片段的基团；R3选自含有沙利度胺片段的基团、环丙甲酰基、烷烃。所述含有沙利度胺片段的基团如通式Ⅱ所示：其中，X选自C＝O、CH2；Y选自O、CH2。优选的，R2选自烷氧基、C3-C6环烷基。蛋白水解靶向嵌合体proteolysistargetingchimericmolecules,PROTACs是近年来兴起的一种全新的药物设计理念，是利用泛素-蛋白酶体系统降解靶标蛋白以实现治疗预期。PROTACs靶向降解GSK-3β蛋白的作用机制：PROTACs是一种杂合的双功能小分子化合物，结构中含有两种配体单元：靶标蛋白泛素连接酶E3的识别配体，以及靶标蛋白自身的识别配体，两个配体单元之间通过适当的连接链相连，从而维持PROTACs的活性构象，调节其理化性质。由于PROTACs双单元的存在，靶标蛋白GSK-3β将与泛素连接酶E3相互靠近，从而形成GSK-3β-PROTACs-E3三元复合体，这一过程将大大加速泛素连接酶E3对GSK-3β蛋白的泛素化标记，进而启动蛋白酶体主导的靶标蛋白GSK-3β降解过程。PROTACs通过机体内UPS靶向降解GSK-3β过程如图11所示。靶向降解GSK-3β蛋白的PROTACs分子的基本组成如图12所示。选自下组的一种化合物或者其药学上可接受的盐、或者其溶剂化物：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-N-3-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基氨基乙酰氨基丙基-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺PG12-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-N-1-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基氨基乙酰氨基戊烷-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺PG22-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-N-4-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基氧基乙酰氨基甲基己基-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺PG32-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG42-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基丁-3炔-1-基氧基噻唑-5-甲酰胺PG52-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基噻唑-5-甲酰胺PG62-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基戊-4炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG74-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丁-3-炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG8的合成2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基戊-4-炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG92-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG102-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基噻唑-5-甲酰胺PG112-2-环丙烷甲酰胺基吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-氧代异吲哚-4-基戊基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG122-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶己基氧基噻唑-5-甲酰胺PG132-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶-1,3-二酮氧己基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG142-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶氧基-4-乙基己基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG152-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-4-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基乙基-5-甲基庚基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG162-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-4-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基乙基-2-乙基-5-甲基庚基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG172-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-2-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-2-基哌啶-4-基氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG182-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-2-2-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3二氧代异吲哚啉-4-基氧基乙氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG192-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-14-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基-3,6,9,12-四氧杂十四烷基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG202-2-环丙烷甲酰胺基吡啶-4-基-4-8-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚-4-基基氧基甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基辛基氧-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG212-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-4-2-2-2-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基氧基甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG222-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-4-2-2-2-2-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-，3-二氧代异吲哚啉-4-基氧基甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基乙氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG23有益效果：本发明所涉及的化学小分子能够有效的靶向降解体内的GSK-3β。由于机体重新转录翻译新的GSK-3β蛋白需要很长的时间，因此，该技术可以有效的减少药物分子的给药剂量和给药时间，达到延长PD的效果。附图说明：图1靶蛋白GSK-3β的配体衍生物G4，G5n，G6n的合成路线。图2E3泛素连接酶CRBN的配体衍生物P2，P5，P9和P10的合成路线。图3目标化合物PG1～PG3的合成路线。图4目标化合物PG4～PG7的合成路线。图5目标化合物PG8～PG11的合成路线。图6目标化合物PG12的合成路线。图7目标化合物PG13～PG17的合成路线。图8目标化合物PG18～PG20的合成路线。图9目标化合物PG21～PG23的合成路线。图10Westernblotting分析GSK-3β蛋白含量，不同PROTACs分子作用PC12细胞12小时。图11PROTACs通过机体内UPS靶向降解GSK-3β过程。图12靶向降解GSK-3β的PROTACs结构组成。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本发明。而本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体试验结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所描述的本发明。实施例1：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-甲氧基噻唑-5-羧酸G6的合成。2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-甲氧基噻唑-5-羧酸G6的合成过程如图1所示。1N-4-氰基吡啶环丙烷甲酰胺G2的制备：将2-氨基-4-腈基吡啶G12.48g,20mmol溶于干燥的DCM中240mL，向其中加入少量的三乙胺助溶，再加入碳酸钾14g,5eq，室温搅拌10分钟，冰浴搅拌10分钟。将环丙基甲酰氯5.6mL,3eq溶于15mLDCM中，用分液漏斗逐滴加入反应液中，最后加入DMAP200mg,0.1eq，冰浴10分钟后室温反应16小时。TLC监测反应完成，用滤纸加上硅藻土抽滤出去碳酸钾，DCM洗涤滤饼，将滤液直接旋干用于下步反应。纯品G2为白色粉末，产率为92％。24-碳硫基吡啶氨基甲酰氯G3的制备：将化合物G23.7g,20mmol溶于无水乙醇90mL，为白色混浊液体，向其中滴加硫化铵35mL,5eq，溶液立即澄清，90℃回流反应3小时。TLC监测反应完成，将反应液旋干，加入适量的热乙醇，超声之后抽滤，用冷乙醇洗涤滤饼，得到黄色固体，剩下的滤液再次旋干重复上述操作。产物G3为黄色固体，产率为74％。32-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-羟基噻唑-5-羧酸乙酯G4的制备：将G34.4g,20mmol溶于无水乙醇中120mL，向其中加入溴代丙二酸二乙酯3.73mL,1.1eq和吡啶6.4mL,4eq,80℃搅拌，反应20小时。TLC监测反应完成，用旋蒸装置蒸出五分之一的乙醇，冷却至室温后冰浴，析出大量黄色针状固体，抽滤，滤饼用冰乙醇洗涤；将滤液再次浓缩至三分之一，重复上述操作。产物G4为黄色针状固体，产率为70％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:11.03s,1H,NH-,8.60s,1H,-OH-,8.70d,J＝1.0Hz,1H,Ar-H,8.70d,J＝3.2Hz,1H,Ar-H,7.56dd,J＝3.2Hz,1.0Hz,1H,Ar-H,4.27q,J＝3.1Hz,2H,-CH2,2.08m,1H,-CH-,1.31t,3H,-CH3,0.88m,4H,-CH2*2；ESIMSmz:334.3[M+H]+.4制备4-O-烷基取代的衍生物的步骤G5a～G5f在二颈瓶中加入G43.33g,10mmol，用干燥THF溶解120mL，加入不同取代的醇1.5eq和三苯基膦5.3g,2eq，氩气保护冰浴条件下用分液漏斗缓慢滴加由10mL四氢呋喃稀释过的DIAD3.6mL,1.8eq，持续滴加10分钟，撤去冰浴后室温反应18小时。TLC检测反应完成，向反应液中加入150mL水,用75mL乙酸乙酯萃取，水层再用35mL乙酸乙酯萃取三次，无水硫酸钠干燥，浓缩有固体析出，抽滤滤饼为G5a。滤液浓缩后柱层析DCMMeOH＝501～201,vv得到淡黄色体。2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-甲氧基噻唑-5-羧酸乙酯G5a：淡黄色体，产率69％。1HNMR300MHz,CDCl3,δppm:8.77s,1H,-NH-,8.60s,1H,Ar-H,8.38d,J＝6.2Hz,1H,Ar-H,7.60d,J＝6.2Hz,1H,Ar-H,4.34q,J＝6.2Hz,2H,-OCH2-,4.25s,3H,-OCH3,1.71m,1H,-CH-,1.37t,J＝6.2Hz,3H,-CH2CH3,1.17d,J＝6.1Hz,2H,-CH2-,0.95d,J＝6.1Hz,2H,-CH2-；ESIMSmz:348.3[M+H]+.52-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-甲氧基噻唑-5-羧酸G6的制备：将G5a1.7g,4.9mmol溶于60mLTHFMeOH混合液中THFMeOH＝31，vv，在冰浴下缓慢滴加LiOH溶液11mL,1mmolmL，10分钟后撤去冰浴，室温反应9小时。TLC检测反应完成，低温旋蒸去除反应液里的THF，将反应液中加入5倍量的水，反应液混浊，抽滤除去不溶于水的固体，将滤液PH调至2，用乙酸乙酯萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到淡黄色粉末G6，产率为80％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:13.08brs,1H,-COOH,11.06s,1H,-NH-,8.64s,1H,Ar-H,8.43d,J＝6.1Hz,1H,Ar-H,7.54d,J＝6.1Hz,1H,Ar-H,4.09s,3H,-OCH3,2.03m,1H,-CH-,0.83m,4H,-CH2*2；ESIMSmz:320.3[M+H]+.实施例2：2-2-2,6-二氧代哌啶-1,3-二氧代异吲哚啉氧基乙酸叔丁酯P9的合成。2-2-2,6-二氧代哌啶-1,3-二氧代异吲哚啉氧基乙酸叔丁酯P9的合成的合成过程示意图如图2所示。15-溴-2-2,6-二氧代哌啶-3-基异吲哚-1,3-二酮P2的制备：将5-溴-苯并呋喃-1,3-二酮P12.93g,8.7mmol和3-氨基哌啶-2,6-二酮2.57g,11.3mmol溶解于CH3CN30mL,TEA2.8mL,7.57mmol，80℃回流12h。TLC检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，有机层旋干，得到白色固体P2，产率为81％。23-溴-2-溴甲基苯甲酸甲酯P4的制备：3-溴-2-甲基苯甲酸甲酯P32.29g,10mmol溶于苯10mL,加入NBS1.78g,10mmol和BPO242mg,1mmol,回流4h。将苯挥干，柱层析，产物P4为黄色固体，产率为93％。产物直接投入下一步反应。33-4-溴-1-氧代异吲哚啉-2-基哌啶-2,6-二酮P5的制备：将P42.68g,8.7mmol和3-氨基哌啶-2,6-二酮2.57g,11.3mmol溶解于CH3CN30mL,TEA2.8mL,7.57mmol，80℃回流12h。TLC检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，有机层旋干，得到白色固体P5，产率为73％。42-2,6-二氧代哌啶-4-羟基-1,3-二酮P7的的制备：将P66.5g,40mmol溶于干燥的DCM中50mL，冰浴下加入3-氨基哌啶-2,6-二酮5.12g,40mmol，加TEA3mL和催化量的DMAP，70℃反应24小时。再向反应液中加入DCC8.24g,40mmol和催化量的DMAP，70℃反应72小时。TLC检测反应完成，向反应液中加水析出大量白色固体，过滤，滤饼加水复溶，再抽滤后冻干。产物P7为淡黄色粉末，产率为73％。52-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基氧基乙酸叔丁酯P8的制备：将化合物P72.74g,10mmol溶于DMF中，依次加入KHCO31.1g,11mmol和KI50mg，2-溴乙酸叔丁酯1.95g,10mmol，氩气保护下60℃反应10小时。向反应液中加入水，抽滤水洗干燥，得到干燥的固体P8。62-2-2,6-二氧代哌啶-1,3-二氧代异吲哚啉氧基乙酸叔丁酯P9的制备：向化合物P8中加入TFADCM＝1:1,室温反应3小时。TLC检测反应完成，反应液旋干后加乙酸乙酯，析出大量固体后过滤，滤液旋干柱层析，得到产物DCMMeOH＝20:1。产物P9为黄色固体，产率为58％。1HNMRCDCl3,δppm:13.35brs,1H,11.13s,1H,7.78t,J＝6.3Hz,1H,7.46d,J＝6.3Hz,1H,7.37d,J＝6.3Hz,1H,5.11dd,J＝15.1Hz,J＝6.1Hz,1H,4.96s,2H,2.84-2.90m,1H,2.55m,1H,2.03t,J＝6.1Hz,1H；ESIMSmz:333.1[M+H]+.72-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基氧基丙炔P10的制备：将化合物P72.74g,10mmol溶于DMF中，依次加入K2CO31.38g,10mmol，3-溴丙炔1.19g,10mmol，氩气保护下45℃反应5小时。向反应液中加入水，抽滤水洗干燥，得到干燥的淡黄色固体P10。实施例3：N-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-甲基噻唑-5-甲酰胺G7a的合成。N-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-甲基噻唑-5-甲酰胺G7a的合成过程示意图如图3所示。将2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-4-甲氧基噻唑-5-甲酸乙酯G5a600mg,20mmol冰浴下加入甲醇8mL和1NLiOH10mL，常温反应3小时。TLC检测反应完成，像反应液中加入2eq的水，有大量固体析出，抽滤后滤液调酸，离心冻干。将干燥的固体溶于二甲基甲酰胺中，依次加入DIPEA3.0mL,6mmol和HATU740mg,2mmol，氨基丙基氨基甲酸叔丁酯417mg,2.4mmol，氩气保护下反应6小时。TLC检测反应完成，反应液旋干后加乙酸乙酯，析出大量固体后过滤，滤液旋干柱层析，得到中间体G6aDCMMeOH＝30:1，旋干为黄色固体。将G6a溶于DCM中，冰浴下滴加三氟乙酸，室温反应3小时。TLC检测反应完成，反应液旋干，产物G7a为黄色固体，产率为52％。实施例4：12-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-N-3-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基氨基乙酰氨基丙基-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺PG1的合成。将G7a溶于DMF6mL中，依次加入P9332mg,1mmol，依次加入DIPEA,HATU，氩气保护下常温反应24小时。TLC检测反应完成，向反应液中加入乙酸乙酯，析出大量固体，过滤，滤液旋干后柱层析，得到产物DCMMeOH＝20:1。产物为黄色粉末，产率为36％。1HNMRCDCl3,δppm:11.08s,1H,11.01s,1H,8.73d,J＝3.5Hz,4H,,8.63s,1H,8.50d,J＝9.2Hz,4H,8.43d,J＝3.2Hz,1H,7.78d,J＝9.5Hz,1H,7.55d,J＝6.2Hz,1H,7.50d,J＝3.3Hz,1H,7.47d,J＝3.1Hz,4H,5.10m,1H,4.79s,1H,4.14s,2H,2.86t,J＝6.3Hz,1H,2.55t,J＝18.5Hz,2H,2.03t,J＝6.5Hz,1H,1.66t,J＝6.5Hz,1H,1.35m,1H,1.03d,J＝6.5Hz,1H,0.84t,J＝6.3Hz,4H；ESIMSmz:690.2[M+H]+；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.5,173.2,172.3,167.5,167.2,161.1,160.0,155.5,153.6,151.4,149.7,140.0,137.4,135.1,133.5,129.2,121.1,116.5,115.5,115.4,110.4,109.1,71.5,58.7,54.1,49.3,42.3,40.4,40.1,40.0,39.8,39.6,18.5,17,21,12.9,8.3；HRMSmz:calcdforC32H32N7O9S[M+H]+,690.2011；found,690.1983.2N-2-氨基甲基丁基-2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺G7b的合成将G5a溶于二甲基甲酰胺中，依次加入DIPEA3.0mL,6mmol和HATU740mg,2mmol，2-氨基甲基丁基氨基甲酸叔丁酯606mg,3mmol，氩气保护下室温反应6小时。TLC检测反应完成，反应液旋干后加乙酸乙酯，析出大量固体后过滤，滤液旋干柱层析，得到中间体G6bDCMMeOH＝30:1，旋干为黄色固体。将G6b溶于DCM中，冰浴下滴加三氟乙酸，室温反应3小时。TLC检测反应完成，反应液旋干，产物G7b为黄色固体，产率为50％。实施例5：12-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-N-1-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基氨基乙酰氨基戊烷-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺PG2的合成。化合物PG2的的合成过程和PG1一样，产物为黄色粉末，产率为33％。1HNMRCDCl3,δppm:11.10s,1H,11.02s,1H,8.76d,J＝3.5Hz,1H,,8.65s,1H,8.53d,J＝6.2Hz,1H,8.45d,J＝6.2Hz,1H,7.99t,J＝6.5Hz,1H,7.81t,J＝9.2Hz,1H,7.64t,J＝6.3Hz,1H,7.56t,J＝6.1Hz,4H,7.49t,J＝6.1Hz1H,7.40t,J＝6.1Hz,1H,5.12m,1H,4.78s,1H,4.16s,3H,3.62t,J＝6.1Hz,1H,3.15m,4H,2.93m,1H,2.56t,J＝12.1Hz,2H,2.04t,J＝6.3Hz,2H,1.49t,J＝6.5Hz,4H,0.85t,J＝6.3Hz,4H；ESIMSmz:718.2[M+H]+；HRMSmz:calcdforC34H36N7O9S[M+H]+,704.2133；found,704.2147.2N-2-氨基甲基-3-甲基戊基-2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺G7c的合成。将G5a溶于二甲基甲酰胺中，依次加入DIPEA3.0mL,6mmol和HATU740mg,2mmol，2-氨基甲基丁基氨基甲酸叔丁酯460mg,2mmol，氩气保护下室温反应8小时。TLC检测反应完成，反应液旋干后加乙酸乙酯，析出大量固体后过滤，滤液旋干柱层析，得到中间体G6cDCMMeOH＝35:1，旋干为黄色固体。将G6c溶于DCM中，冰浴下滴加三氟乙酸，室温反应3小时。TLC检测反应完成，反应液旋干，产物G7c为黄色固体，产率为46％。实施例6：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-N-4-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基氧基乙酰氨基甲基己基-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺PG3的合成。化合物PG3的的合成过程和PG1一样，其合成过程如图4所示。产物为黄色粉末，产率为30％。1HNMRCDCl3,δppm:11.09s,1H,11.01s,1H,8.73d,J＝3.5Hz,4H,,8.62s,1H,8.42d,J＝6.2Hz,1H,7.91t,J＝6.1Hz,1H,7.79t,J＝9.5Hz,1H,7.60t,J＝6.2Hz,1H,7.54d,J＝6.3Hz,1H,7.47d,J＝9.1Hz,1H,7.36d,J＝9.1Hz,1H,5.10m,1H,4.75s,2H,4.14s,3H,3.25t,J＝6.3Hz,3H,3.14d,J＝6.1Hz,2H,2.87m,1H,2.69d,J＝12.5Hz,1H,2.58d,J＝18.1Hz,2H,2.02t,J＝6.5Hz,2H,1.46t,J＝6.5Hz,4H,1.28t,J＝6.1Hz,4H,0.83t,J＝6.3Hz,4H；ESIMSmz:746.2[M+H]+；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.0,172.7,169.8,166.7,165.5,162.3,160.4,159.4,155.0,153.1,149.2,140.6,136.9,133.0,120.3,116.8,116.0,115.0,110.0,108.6,67.6,58.2,54.1,48.8,38.2,30.9,29.2,28.9,26.0,22.0,14.2,7.9；HRMSmz:calcdforC36H40N7O9S[M+H]+,732.2446；found,732.2452.实施例7：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG4的合成。G6a400mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P2337mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。柱层析DCMMeOH＝30:1。产物PG4为黄色固体，产率为26％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:11.16s,1H,11.03s,1H,8.63d,J＝6.5Hz,1H,8.42d,J＝3.1Hz,1H,7.88t,J＝3.4Hz,2H,7.64-7.55m,3H,5.16q,J＝3.1Hz,1H,4.74t,J＝3.3Hz,1H,4.66t,J＝3.1Hz,1H,4.58s,1H,4.43d,J＝15.6Hz,1H,2.92d,J＝3.2Hz,1H,2.83t,J＝3.4Hz,3H,2.63d,J＝9.6Hz,1H,2.55d,J＝6.1Hz,1H,2.08d,J＝3.2Hz,1H,2.04d,J＝3.1Hz,1H,1.23t,J＝9.4Hz,1H,1.17t,J＝3.1Hz,1H,0.85t,J＝3.1Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.53,173.23,170.22,166.87,162.95,160.41,153.60,149.76,140.95,137.98,132.52,131.98,131.91,129.27,129.19,126.21,124.19,115.47,111.33,109.07,91.06,84.81,70.50,68.14,58.53,49.57,31.38,26.74,22.38,14.74,8.37；HRMSmz:calcdforC32H29N6O8S[M+H]+,657.1762；found,657.1773.实施例8：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基丁-3炔-1-基氧基噻唑-5-甲酰胺PG5的合成。取G6b356mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P2337mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。柱层析DCMMeOH＝30:1。产物PG5为黄色固体，产率为27％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:11.17s,1H,11.08s,1H,8.66s,1H,8.46d,J＝3.1Hz,1H,7.97s,1H,7.89-7.84m,3H,7.58d,J＝3.3Hz,1H,7.14s,1H,5.19-5.15m,1H,4.75t,J＝6.1Hz,2H,3.14t,J＝6.3Hz,2H,2.88d,J＝15.3Hz,1H,2.63s,2H,2.06d,J＝12.3Hz,2H,0.84d,J＝9.2Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.55,173.22,170.23,166.95,166.83,163.44,161.53,160.35,153.63,149.80,138.01,132.21,130.56,129.48,126.18,124.15,115.59,111.44,109.14,92.69,81.08,69.01,49.54,31.38,22.39,20.54,14.74,8.37；HRMSmz:calcdforC30H25N6O7S[M+H]+,613.1500；found,613.1497.实施例9：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基噻唑-5-甲酰胺PG6的合成。G6c386mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P2337mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。柱层析DCMMeOH＝30:1。产物PG6为黄色固体，产率为31％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:11.16s,1H,11.04s,1H,8.63s,1H,8.43d,J＝6.3Hz,1H,7.91-7.88m,4H,7.55d,J＝6.1Hz,1H,7.07s,1H,5.17q,J＝6.4Hz,1H,4.73d,J＝6.1Hz,2H,4.57-4.46m,2H,4.02s,1H,3.69s,1H,2.95-2.84m,1H,2.73s,1H,2.54s,1H,2.06-1.99m,2H,0.84d,J＝9.3Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.53,173.22,170.22,166.88,166.75,163.30,161.59,160.64,153.60,149.76,140.96,138.05,132.16,131.00,128.57,126.27,124.16,115.53,111.37,109.10,91.03,84.82,70.48,68.17,58.50,49.57,31.38,22.38,14.74,8.37；HRMSmz:calcdforC31H27N6O8S[M+H]+,643.1606；found,643.1605.实施例10：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基戊-4炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG7的合成。G6d384mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P2337mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。其合成过程示意图如图5所示。柱层析DCMMeOH30:1。产物PG7为黄色固体，产率为29％。1HNMR300MHz,CDCl3,δppm:11.18s,1H,11.05s,1H,8.63s,1H,8.41d,J＝6.4Hz,1H,7.84s,3H,7.56s,2H,5.16q,J＝6.1Hz,1H,2.95s,1H,2.82d,J＝3.1Hz,3H,2.75s,2H,2.63s,1H,2.51s,1H,2.20s,2H,2.09s,1H,2.02t,J＝6.2Hz,1H,0.83d,J＝6.1Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.50,173.22,170.24,166.96,166.86,162.87,160.45,160.40,153.61,149.71,141.02,137.86,132.17,130.32,129.92,126.09,124.10,115.44,110.78,109.10,95.57,80.34,70.50,55.39,49.53,31.38,27.96,26.86,22.40,16.17,14.73,8.35；HRMSmz:calcdC32H29N6O7S[M+H]+,641.1813；found,641.1829.实施例11：4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丁-3-炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG8的合成。G6e370mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P5323mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。柱层析DCMMeOH＝30:1。产物为黄色固体，产率为34％。1HNMR300MHz,CDCl3,δppm:11.00s,1H,7.72d,J＝3.3Hz,1H,7.63-7.60m,1H,7.51t,J＝3.2Hz,1H,4.74s,1H,4.59s,1H,4.38d,J＝9.2Hz,1H,4.26d,J＝9.2Hz,1H,3.35s,1H,3.13s,2H,3.00s,3H,2.81s,2H,2.74s,2H,2.59t,J＝9.3Hz,1H,2.36d,J＝6.3Hz,1H,1.98d,J＝6.3Hz,1H,1.14s,3H,0.85s,5H；HRMSmz:calcdC31H29N6O6S[M+H]+,613.1864；found,613.1848.实施例12：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基戊-4-炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG9的合成。G6f384mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P5323mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干，柱层析DCMMeOH＝30:1。产物为黄色固体，产率为35％。1HNMR300MHz,CDCl3,δppm:11.03s,1H,10.98s,1H,8.63s,1H,8.39s,1H,7.70d,J＝9.2Hz,1H,7.62d,J＝9.1Hz,1H,7.54d,J＝6.6Hz,2H,7.47s,1H,5.11q,J＝6.4Hz,1H,4.70t,J＝6.1Hz,2H,4.46-4.27m,2H,2.94-2.85m,1H,2.81d,J＝3.1Hz,3H,2.71t,J＝6.4Hz,2H,2.57s,1H,2.42-2.33m,1H,2.19-2.19m,2H,2.03t,J＝6.1Hz,1H,1.99-1.94m,1H,0.84d,J＝6.3Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.54,173.28,171.39,168.10,162.28,150.44,160.40,153.60,149.72,144.23,141.00,134.56,132.40,129.01,123.17,119.07,115.42,110.77,109.10,95.86,77.24,70.58,55.38,52.04,47.40,31.62,28.22,26.84,22.78,16.19,14.74,8.36；HRMSmz:calcdC32H31N6O6S[M+H]+,627.2020；found,627.2017。实施例13：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG10的合成。G6g400mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P5323mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。柱层析DCMMeOH＝30:1。产物为黄色固体，产率为36％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:11.05s,1H,11.00s,1H,8.64d,J＝3.1Hz,1H,8.44d,J＝3.3Hz,1H,7.76d,J＝3.3Hz,1H,7.66d,J＝3.2Hz,1H,7.62d,J＝3.4Hz,1H,7.58d,J＝3.2Hz,1H,7.54d,J＝3.1Hz,1H,4.72d,J＝3.2Hz,1H,4.67-4.63m,1H,4.53t,J＝3.3Hz,2H,4.45d,J＝6.4Hz,1H,4.32d,J＝9.1Hz,1H,4.01t,J＝3.1Hz,1H,3.80t,J＝3.2Hz,2H,2.90q,J＝3.1Hz,1H,2.84d,J＝3.4Hz,3H,2.58d,J＝3.4Hz,1H,2.43t,J＝3.1Hz,1H,2.04t,J＝3.1Hz,1H,2.00t,J＝3.3Hz,1H,0.85t,J＝3.2Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.30,171.37,167.93,162.98,160.40,160.30,153.61,149.79,144.38,141.04,140.94,134.83,132.51,129.14,123.99,117.83,115.52,111.39,111.12,109.10,91.58,81.96,70.51,68.04,58.57,52.09,47.36,31.64,22.78,18.54,17.18,12.97；HRMSmz:calcdforC32H31N6O7S[M+H]+,643.1969；found,643.1984.实施例14：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基噻唑-5-甲酰胺PG11的合成G6h386mg,1mmol溶于DMF15mL，依次加入P5323mg,1mmol,CuI57.6mg,0.3mmol和PdPh3PCl241mg,0.2mmol，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。反应液用乙酸乙酯和水萃取，合并有机层，旋干。其合成过程示意图如图6所示。柱层析DCMMeOH＝30:1。产物为黄色固体,产率为27％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:11.05-11.00m,1H,8.65s,1H,8.44d,J＝3.3Hz,1H,7.87s,1H,7.58-7.53m,2H,7.03d,J＝12.4Hz,1H,4.73-4.66m,2H,4.44-4.39m,1H,4.00-3.83m,2H,3.68-3.51m,2H,2.03d,J＝6.1Hz,1H,0.84d,J＝9.4Hz,4H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.56,171.38,167.95,163.32,161.61,161.56,160.73,160.57,153.61,149.79,144.40,140.99,134.86,132.50,129.13,123.96,115.55,111.48,111.33,109.16,76.98,70.33,69.29,68.94,68.23,58.39,52.11,31.65,22.77,14.74,8.37；HRMSmz:calcdforC31H29N6O7S[M+H]+,629.1813；found,629.1800.实施例16：2-2-环丙烷甲酰胺基吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-氧代异吲哚-4-基戊基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG12的合成。将化合物G溶于THF，依次加入甲醇，10％PdC，H2还原条件下，室温反应24h。TLC反应检测反应结束。其合成过程如图7所示。实施例17：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶己基氧基噻唑-5-甲酰胺PG13的合成。将G6I600mg,20mmol溶于四氢呋喃中50mL，加入P7和三苯基膦6g,6mmol，氩气保护冰浴条件下用恒压滴液漏斗缓慢滴加由10mL四氢呋喃稀释过的DIAD600μL,3mmol，持续滴加10分钟，撤去冰浴后室温反应24小时。TLC检测反应完成，向反应液中加入乙酸乙酯，析出大量固体，过滤，滤液旋干后柱层析，得到产物DCMMeOH＝20:1。产物为黄色粉末，产率为34％。1HNMRCDCl3,δppm:11.05d,J＝9.1Hz,2H,8.76d,J＝3.1Hz,2H,8.66s,1H,8.54d,J＝6.5Hz,2H,8.45d,J＝3.3Hz,1H,7.81s,1H,7.75t,J＝6.3Hz,1H,7.58d,J＝3.1Hz,1H,7.52m,2H,7.44d,J＝3.1Hz,1H,7.35d,J＝6.2Hz,1H,4.57t,J＝6.3Hz,2H,4.19d,J＝6.4Hz,2H,2.05d,J＝3.5Hz,1H,1.88t,J＝3.1Hz,1H,1.80m,1H,1.53m,4H,1.28m,6H,0.87m,5H；ESIMSmz:661.2[M+H]+.13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.5,163.2,161.6,156.2,153.6,151.4,149.7,140.0,136.9,135.1,129.2,121.1,119,7,115.5,115.1,110.8,109.2,71.6,69.1,54.0,40.6,40.2,39.8,29.0,28.7,25.4,14.7,8.3.HRMSmz:calcdforC32H33N6O8S[M+H]+,661.2133；found,661.2076.实施例18：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶-1,3-二酮氧己基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG14的合成。化合物PG14的的合成过程和PG13一样，产物为黄色粉末，产率为30％。实施例19：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶氧基-4-乙基己基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG15的合成化合物PG15的的合成过程和PG13一样，产物为黄色粉末，产率为32％。1HNMRCDCl3,δppm:8.73s,1H,8.45d,J＝3.5Hz,1H,8.34d,J＝6.5Hz,1H,7.65d,J＝6.3Hz,1H,7.50s,1H,7.44d,J＝6.1Hz,1H,7.19s,1H,7.07d,J＝3.2Hz,1H,4.94t,J＝6.3Hz,1H,4.60d,J＝6.0Hz,2H,4.17d,J＝6.4Hz,1H,3.79m,1H,3.67s,1H,3.00d,J＝3.5Hz,3H,2.77d,J＝6.1Hz,1H,2.06s,1H,1.85t,J＝9.1Hz,12H,1.45s,7H,1.39s,3H,0.90m,6H；ESIMSmz:703.2[M+H]+.实施例20：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-4-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基乙基-5-甲基庚基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG16的合成化合物PG16的的合成过程和PG13一样，产物为黄色粉末，产率为27％。1HNMRCDCl3,δppm:11.01s,1H,8.63d,J＝3.5Hz,1H,8.42d,J＝6.5Hz,1H,7.78m,1H,7.53m,1H,7.47s,1H,7.43d,J＝6.2Hz,1H,5.11m,1H,4.50m,2H,4.15m,1H,3.62t,J＝6.4Hz,1H,3.36m,1H,3.18s,1H,2.87m,2H,2.75d,J＝3.1Hz,1H,2.04s,1H,1.78t,J＝6.1Hz,2H,1.72d,J＝6.5Hz,1H,1.23s,4H,1.19m,12H,0.84t,J＝6.5Hz,4H；ESIMSmz:731.29[M+H]+；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.4,173.2,171.9,170.3,169.8,169.8,167.2,165.7,162.8,160.5,156.4,153.6,149.6,141.0,137.4,133.6,120.1,116.6,115.5,115.3,110.5,109.1,71.5,69.2,49.0,29.4,29.1,29.0,28.8,26.6,25.7,25.5,14.7,8.3.实施例21：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-4-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基乙基-2-乙基-5-甲基庚基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG17的合成。化合物PG17的的合成过程和PG13一样，产物为黄色粉末，产率为30％。其合成过程如图8所示。1HNMRCDCl3,δppm:11.02s,1H,8.64s,1H,,8.42d,J＝6.5Hz,1H,7.78s,1H,7.64d,J＝6.2Hz,1H,7.50m,2H,7.29d,J＝9.2Hz,1H,5.16d,J＝3.3Hz,2H,5.12m,1H,4.51d,J＝6.2Hz,2H,4.16m,1H,3.62t,J＝6.1Hz,1H,2.96t,J＝6.3Hz,1H,2.82s,3H,2.71m,1H,2.61s,1H,2.04s,2H,1.79s,2H,1.73d,J＝6.3Hz,1H,1.37m,4H,1.22t,J＝6.4Hz,12H,0.83d,J＝9.3Hz,4H；ESIMSmz:759.3[M+H]+；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:173.4,172.0,162.8,160.6,160.5,153.6,149.7,149.6,141.0,137.4,133.6,120.1,116.6,115.5,115.4,110.5,109.1,71.5,69.2,55.3,28.4,29.1,29.0,28.8,27.7,26.7,25.7,25.6,14.7,8.3.实施例22：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-2-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-2-基哌啶-4-基氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG18的合成。将G6g999mg,3mmol溶于THF20mL，加入P7，Ph3P2.358g,9mmol，冰浴下滴加DIAD900μL,4.5mmol，随后移至室温搅拌24h，TLC检测反应结束。反应液加入乙酸乙酯，有黄色固体析出，抽滤，滤液用水和乙酸乙酯萃取3次，将有机层合并加入无水硫酸钠干燥，旋干溶剂后，加入二氯甲烷复溶，柱层析纯化DCMMeOH＝40:1。产率为26％。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:9.15s,1H,8.70s,1H,8.31d,J＝6.2Hz,1H,7.59t,J＝9.4Hz,1H,7.43t,J＝6.4Hz,2H,7.28-7.16m,2H,4.98-4.93m,1H,4.89s,2H,4.28s,1H,4.02s,1H,3.80s,3H,3.72s,1H,3.64s,3H,2.94d,J＝3.1Hz,3H,2.79-2.74m,1H,2.41s,1H,2.09s,1H,1.12s,2H,0.90d,J＝6.2Hz,2H；ESI-MS:705.7[M-H]-.实施例23：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-2-2-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3二氧代异吲哚啉-4-基氧基乙氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG19的合成。将G6h649mg,1mmol溶于THF20mL，加入P7，Ph3P,2.358g,9mmol，冰浴下滴加DIAD900μL,4.5mmol，随后移至室温搅拌24h，TLC检测反应结束。加入乙酸乙酯40mL，黄色固体析出，抽滤，滤液用水和乙酸乙酯萃取3次，将有机层合并加入无水硫酸钠干燥，旋干溶剂后，加入二氯甲烷复溶，柱层析纯化DCMMeOH＝30:1。产率为31％。实施例24：2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-14-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基-3,6,9,12-四氧杂十四烷基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG20的合成。将G6I693mg,1mmol溶于THF20mL，加入P7，Ph3P,2.358g,9mmol，冰浴下滴加DIAD900μL,4.5mmol，随后移至室温搅拌24h，TLC检测反应结束。加入乙酸乙酯40mL，有黄色固体析出，抽滤，滤液用水和乙酸乙酯萃取，将有机层合并，然后旋干溶剂，柱层析纯化DCMMeOH＝25:1。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:9.16s,1H,8.71s,1H,8.32d,J＝6.2Hz,1H,7.65-7.60m,1H,7.44-7.39m,2H,7.25t,J＝9.3Hz,2H,4.96d,J＝6.2Hz,1H,4.70s,2H,4.02d,J＝9.4Hz,1H,3.88t,J＝9.1Hz,3H,3.74-3.58m,14H,2.96d,J＝3.2Hz,3H,2.79s,1H,2.44s,1H,2.06s,1H,1.66s,1H,1.12s,2H,0.90d,J＝3.3Hz,2H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:172.77,170.97,168.66,167.02,165.62,162.90,161.13,160.14,156.31,152.74,148.50,141.87,136.36,133.72,119.43,117.27,115.98,115.59,111.77,109.96,71.05,70.58,70.55,70.50,70.23,70.03,69.31,69.17,67.41,53.48,49.84,39.28,31.96,26.35,21.95,15.70,8.53；ESI-MS:793.8[M-H]-.实施例25：2-2-环丙烷甲酰胺基吡啶-4-基-4-8-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚-4-基基氧基甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基辛基氧-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG21的合成。将G7a471mg,1mmol溶于正丁醇20mL，加入P10312g,1mmol，随后加入三乙胺500μL和抗坏血酸钠99mg,0.5mmol，最后向反应液中加入硫酸铜80mg,0.5mmol，室温搅拌7h，TLC检测反应结束。反应液用水和乙酸乙酯萃取，将有机层合并，然后旋干溶剂，柱层析纯化DCMMeOH＝25:1。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:9.16s,1H,8.71s,1H,8.32d,J＝6.2Hz,1H,7.65-7.60m,1H,7.44-7.39m,2H,7.25t,J＝9.3Hz,2H,4.96d,J＝6.2Hz,1H,4.70s,2H,4.02d,J＝9.4Hz,1H,3.88t,J＝9.1Hz,3H,3.74-3.58m,14H,2.96d,J＝3.2Hz,3H,2.79s,1H,2.44s,1H,2.06s,1H,1.66s,1H,1.12s,2H,0.90d,J＝3.3Hz,2H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:172.77,170.97,168.66,167.02,165.62,162.90,161.13,160.14,156.31,152.74,148.50,141.87,136.36,133.72,119.43,117.27,115.98,115.59,111.77,109.96,71.05,70.58,70.55,70.50,70.23,70.03,69.31,69.17,67.41,53.48,49.84,39.28,31.96,26.35,21.95,15.70,8.53；ESI-MS:793.8[M-H]-。实施例26：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-4-2-2-2-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基氧基甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG22的合成。将G7b475mg,1mmol溶于正丁醇20mL，加入P10312g,1mmol，随后加入三乙胺500μL和抗坏血酸钠99mg,0.5mmol，最后向反应液中加入硫酸铜80mg,0.5mmol，室温搅拌7h，TLC检测反应结束。反应液用水和乙酸乙酯萃取，将有机层合并，然后旋干溶剂，柱层析纯化DCMMeOH＝25:1。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:9.16s,1H,8.71s,1H,8.32d,J＝6.2Hz,1H,7.65-7.60m,1H,7.44-7.39m,2H,7.25t,J＝9.3Hz,2H,4.96d,J＝6.2Hz,1H,4.70s,2H,4.02d,J＝9.4Hz,1H,3.88t,J＝9.1Hz,3H,3.74-3.58m,14H,2.96d,J＝3.2Hz,3H,2.79s,1H,2.44s,1H,2.06s,1H,1.66s,1H,1.12s,2H,0.90d,J＝3.3Hz,2H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:172.77,170.97,168.66,167.02,165.62,162.90,161.13,160.14,156.31,152.74,148.50,141.87,136.36,133.72,119.43,117.27,115.98,115.59,111.77,109.96,71.05,70.58,70.55,70.50,70.23,70.03,69.31,69.17,67.41,53.48,49.84,39.28,31.96,26.35,21.95,15.70,8.53；ESI-MS:793.8[M-H]-。实施例27：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-4-2-2-2-2-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-，3-二氧代异吲哚啉-4-基氧基甲基-1H-1,2,3-三唑-1-基乙氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺PG23的合成。将G7c533mg,1mmol溶于正丁醇20mL，加入P10312g,1mmol，随后加入三乙胺500μL和抗坏血酸钠99mg,0.5mmol，最后向反应液中加入硫酸铜80mg,0.5mmol，室温搅拌7h，TLC检测反应结束。反应液用水和乙酸乙酯萃取，将有机层合并，然后旋干溶剂，柱层析纯化DCMMeOH＝20:1。1HNMR300MHz,DMSO-d6,δppm:9.16s,1H,8.71s,1H,8.32d,J＝6.2Hz,1H,7.65-7.60m,1H,7.44-7.39m,2H,7.25t,J＝9.3Hz,2H,4.96d,J＝6.2Hz,1H,4.70s,2H,4.02d,J＝9.4Hz,1H,3.88t,J＝9.1Hz,3H,3.74-3.58m,14H,2.96d,J＝3.2Hz,3H,2.79s,1H,2.44s,1H,2.06s,1H,1.66s,1H,1.12s,2H,0.90d,J＝3.3Hz,2H；13CNMR75MHz,DMSO-d6,δppm:172.77,170.97,168.66,167.02,165.62,162.90,161.13,160.14,156.31,152.74,148.50,141.87,136.36,133.72,119.43,117.27,115.98,115.59,111.77,109.96,71.05,70.58,70.55,70.50,70.23,70.03,69.31,69.17,67.41,53.48,49.84,39.28,31.96,26.35,21.95,15.70,8.53；HRMSmz:calcdforC38H42N9O11S[M+H]+,832.2719；found,832.2740；[M+Na]+,854.2538；found,854.2559。实施例28：蛋白质提取和Westernblot检测1.胞浆蛋白的提取准备好冰，预先将离心机制冷至4℃离心前，所有操作均在冰上进行，从培养箱中取出6孔板，在显微镜下观察细胞状态，用移液枪吸净培养基，预冷的PBS洗板3次，1mL次，用移液枪吸净PBS。每个孔加90μl的细胞裂解液，均匀的滴加到孔内，摇床上铺好冰，将6孔板放置摇床上，裂解30min。裂解完，用细胞刮将细胞刮下，吸入准备好并编号好的1.5mLEP中，离心4℃、12000rpm、15min，所得上清液即为蛋白，用于评估核内GSK-3β和TauS396表达水平，组蛋白GAPDH作为内参。同时，应该进行BCA蛋白定量，进一步确认其蛋白浓度。2.BCA蛋白定量根据样品数量，将BCA试剂A和B以50:1混匀配制适量BCA工作液，充分混匀。取适量25mgmL蛋白标准，稀释至终浓度0.5mgmL。标准品按照0,1,2,4,8,12,16,20μL加到96孔板的标准品孔板中，加标准品稀释液补足到20μL。加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20μL。每孔加入200μLBCA工作液，37℃放置30min。测定A562处的吸光度值，根据标准曲线计算蛋白浓度。3.Westernblot检测蛋白表达1工作液的配制10％的过硫酸铵：配制1.5ml的AP，准确称量0.15g的过硫酸铵，然后用1.5mL双蒸水将0.15gAP溶解之后，4℃避光保存不超过七天。2使用液的配制电泳缓冲液：用1L的水将3.03gTris和18.77g甘氨酸还有1gSDS搅拌充分溶解。调节其PH8.3，常温保存。转膜缓冲液：将甘氨酸14.4g192mM、Tris3.03g25mM用200mlMeOH20％溶解，再加水至总体积为1L。封闭液：用100mlTBST将5g脱脂奶粉搅拌溶解。在4℃条件下保存。抗体：TBST将其稀释到指定浓度备用。3电泳a10％分离胶的制备：将3.3mL30％AcrBis和2.5mL下层胶缓冲液还有4.1mL双蒸水，100μL10％过硫酸胺、4μLTEMED充分在烧杯中充分混匀用于灌胶；b堆积胶的制备：将0.67mL30％AcrBis和1.0mL上层胶缓冲液还有2.35mL双蒸水，40μL10％过硫酸胺、4μLTEMED，充分混匀之后用于加堆积胶。c将混匀好的分离胶加入已装好电泳槽垂直的玻璃夹层中，缓慢的将分离胶灌到离玻璃板上边缘大约1cm处，一定要缓慢的加入乙醇到其顶部，开始室温或者37℃凝胶；d等到分离胶凝了之后，倒掉分离胶上层的乙醇，用平板纸吸掉剩余的乙醇，将堆积胶灌到顶部并且缓缓地插入梳子，在整个过程中避免气泡产生，然后等待聚合凝固；e等到堆积胶完全凝固之后再缓慢的拔掉梳子；f使用Bio-Rad微型凝胶系统，将凝胶板放入电泳槽内，将配好的电泳缓冲液倒入电泳槽中，确保整个凝胶能泡在之前配好的电泳液中；g将蛋白含量为30μg的蛋白样品缓慢的加入上样孔中，在对照孔中加入预染蛋白Marker，最后在样品孔和加marker孔两侧分别加入少量上样缓冲液，为了避免边缘效应的发生；h在插上电源之后，先用80V恒定电压跑电泳，等到红色的marker跑出来之后，换到120V继续跑电泳；i等到溴酚蓝跑板底端时候，关闭电源，取下凝胶，按照自己的目标蛋白的位置，对照相应的marker，切下相应位置的分离胶，然后将分离胶放到转移缓冲液中为后续转膜实验备用。4转膜在转膜之前，将PVDF膜用甲醇浸泡15min，使PVDF膜充分活化，再将它们移到转移缓冲液中，同时将滤纸和分离胶也放到转移缓冲液中；转移夹层由下到上分别为：3层滤纸、一层PVDF膜、胶、3层滤纸，形成三明治模型，在整个铺膜的过程中一定要注意不要铺出气泡。用300mA电流转膜70min，等到转膜完成之后取出膜，准备后续的封闭。5蛋白质免疫检测将转好的PVDF膜放入5％脱脂奶粉的TBST溶液中进行封闭，4℃封闭过夜或常温封闭2h；从封闭液中取出PVDF膜并用TBST洗三次，每次十分钟；将PVDF膜用稀释好的一抗孵育，4℃过夜；回收一抗并用TBST清洗孵育过一抗的转印膜三次，每次十分钟；将洗涤后的转印膜用TBST稀释的二抗室温孵育2h；取出转印膜，用TBST洗膜三次，每次十分钟。6Tanon发光成像仪显影将PVDF膜条带放置到显影仪的板上合适位置上，将ECLPlus发光液A液和B液以等体积混匀之后，将发光液均匀的加在铺好的条的正面，关上显影仪的门，自动凝胶图像分析。后续用相应的图像处理的软件Image-ProPlus6.0分析相应条带的光密度值。部分PROTACs分子在PC12细胞上降解GSK-3β如图10所示。合成的PROTACs化合物降解GSK-3β蛋白的能力总结在表1。大部分含有炔键的PROTACs分子没有观察到降解GSK-3β蛋白的能力，只有PG10具有一定的降解GSK-3β的能力。PG13具有优异的降解蛋白的能力，而当伯胺被甲基化后PG14，其降解能力丧失。当延长碳链，PROTACs降解蛋白的能力显著增强，当碳链延长至12个碳时PG17其降解活性甚至稍微优于PG13。PG18三甘醇和PG19四甘醇在浓度为0.5μM下便能够显著降解GSK-3β蛋白，其中PG19在10μM的浓度下能够降解91％的GSK-3β蛋白。而具有更长连接链的PROTACPG20降解GSK-3β蛋白的能力基本丧失。表1PROTACs分子降解GSK-3β蛋白的能力

权利要求：1.如通式Ⅰ所示的化合物：或者其药学上可接受的盐、溶剂化物或者前药或者对映异构体或者代谢物；其中，L选自C3～C15饱和烷基、C3～C15不饱和烷基、C4～C20烷氧基或三氮唑基团；R1选自-OR3、-NHR4或含有沙利度胺片段的基团；R2选自氢、甲氧基等烷基、取代芳香基、环烷基或含有沙利度胺片段的基团；R3选自含沙利度胺片段的基团、环丙甲酰基或烷烃；所述含有沙利度胺片段的基团如通式Ⅱ所示：其中，X选自C＝O、CH2；Y选自O、CH2。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2选自烷氧基、C3-C6环烷基。3.选自下组的一种化合物或者其药学上可接受的盐、或者其溶剂化物：2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-N-3-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基氨基乙酰氨基丙基-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-N-1-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基氨基乙酰氨基戊烷-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-基-N-4-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基氧基乙酰氨基甲基己基-4-甲氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基丁-3炔-1-基氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基戊-4炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；4-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丁-3-炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基戊-4-炔-1-基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-3-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-二氧代异吲哚啉-4-基丙-2-炔-1-基氧基乙氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺基吡啶-4-基-4-5-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1-氧代异吲哚-4-基戊基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶己基氧基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶-1,3-二酮氧己基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-6-2-2,6-二氧代哌啶氧基-4-乙基己基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-4-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基乙基-5-甲基庚基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰氨基吡啶-4-4-2-2-2,6-二氧代哌啶氧基乙基-2-乙基-5-甲基庚基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-2-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-2-基哌啶-4-基氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-2-2-2-2-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3二氧代异吲哚啉-4-基氧基乙氧基乙氧基乙氧基乙氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺；2-2-环丙烷甲酰胺吡啶-4-基-4-14-2-2,6-二氧代哌啶-3-基-1,3-二氧代异吲哚啉-4-基-3,6,9,12-四氧杂十四烷基氧基-N-甲基噻唑-5-甲酰胺。4.一种药物组合物，包括权利要求1所示的化合物。5.权利要求1～3任一所述化合物在制备靶向降解GSK-3β蛋白药物中的应用。6.权利要求1～3任一所述化合物用于治疗或预防GSK-3β介导的病症。7.权利要求1～3任一所述化合物用于治疗神经退行性疾病、癌症或炎症。

百度查询： 中国药科大学 靶向泛素化降解GSK-3β蛋白的化合物及其应用

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