申请/专利权人：福建师范大学

申请日：2020-03-17

公开（公告）日：2022-11-22

公开（公告）号：CN111208109B

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64;C09K11/58;B82Y20/00;B82Y30/00;B82Y40/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.11.22#授权;2020.07.07#实质审查的生效;2020.05.29#公开

摘要：本发明提供一种基于AuPB@AuNPs荧光检测酪氨酸酶的方法，该检测方法利用硝酸铁溶液与氨三乙酸三钠发生螯合反应制备FeNTA标签修饰的AuPB@Au‑FeNTANPs，修饰于核壳纳米表面的FeNTA的羟基基团能与多巴胺的酚羟基形成络合物FeNTADA，荧光增强；当体系中出现TYR时，催化氧化多巴胺变成成多巴醌时，不能形成络合物FeNTADA，荧光减弱。据此构建了AuPB@AuNPs荧光传感器，与不同浓度的酪氨酸酶建立标准曲线。通过本发明，使用荧光法检测酪氨酸酶，提高了检测体系的准确性，实现了原位定量检测。

主权项：1.一种基于AuPB@AuNPs荧光检测酪氨酸酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备AuPB@AuNPs基底；S2、将多巴胺溶液与等体积的酪氨酸酶标准溶液混合得标准混合溶液，接着将AuPB@Au-FeNTA溶液和等体积的标准混合溶液混合，在室温下，轻微振荡3-15min，使溶液分散均匀，得AuPB@AuNPs荧光检测基底；S3、将步骤S2制备的AuPB@AuNPs荧光检测基底进行荧光光谱检测；记录在318nm处的荧光强度，酪氨酸酶活性为横坐标作出相对应的荧光工作曲线；S4、将待测物质进行荧光光谱检测后，并通过荧光工作曲线计算出待测物质中酪氨酸酶的浓度；所述AuPB@AuNPs基底的制备方法如下：1AuPB@AuNPs的合成取10mL纳米金胶溶液，加入10-20μL浓度为0.1molL的普鲁士蓝溶液作为拉曼信号分子，搅拌混合均匀后离心，重新悬浮于10mL超纯水中，得Au@PB胶体；往10mL的制备好的Au@PB胶体中加入250μL浓度为6*10-2molL的柠檬酸钠溶液，磁力搅拌加热至沸腾后，加入2.5mL浓度为1mmolL氯金酸溶液后停止加热，继续磁力搅拌1h后，将胶体离心洗涤2次，重新分散于5mL超纯水中，得到AuPB@Au胶体；2FeNTA溶液的合成首先取浓度为10-3M的九水硝酸铁溶液和浓度为10-3M的氨三乙酸三钠溶液按体积1:1混合后，往溶液中添加pH调节剂调节FeNTA溶液的pH为7.0，混合液静置，得FeNTA溶液；3AuPB@AuNPs荧光检测基底的制备将步骤1制备好的AuPB@Au胶体与步骤2制备的FeNTA溶液按体积1:1混合后，搅拌混合后，离心洗涤除去未反应的FeNTA，去除上清液，剩下AuPB@Au-FeNTA胶体备用。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 福建师范大学 一种基于Au^PB@Au NPs荧光检测酪氨酸酶的方法

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