申请/专利权人：陕西脉元生物科技有限公司

申请日：2021-09-01

公开（公告）日：2022-11-25

公开（公告）号：CN113651881B

主分类号：C07K14/705

分类号：C07K14/705;C12N15/85;C12N5/10;G01N33/68;G01N33/543

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.11.25#授权;2021.12.03#实质审查的生效;2021.11.16#公开

摘要：本发明公开了一种用于检测人体液中乙酰胆碱受体自身抗体的细胞爬片及其制备方法和应用，属于生物技术领域。采用的方案包括：将乙酰胆碱受体的各个亚基与空载质粒按照一定的比例进行共同转染，再经过固定、洗涤、终止、洗涤、烘干处理，制得检测人体液中乙酰胆碱受体自身抗体的细胞爬片。该方法与放免法和酶联免疫法相比，具有较高的灵敏度；与现有技术的文献所报道的免疫荧光方法相比，在降低了背景的同时提高了检测的特异性。因此，无论从研究角度还是作为重症肌无力疾病的辅助诊断手段，本发明均具有良好的应用前景。

主权项：1.一种用于检测人体液中乙酰胆碱受体自身抗体的细胞爬片的制备方法，其特征在于，包括：将乙酰胆碱受体的各个亚基的重组真核表达载体与一个无外源基因连入的真核表达载体按照一定的比例混合，进行共同转染，再经过固定、洗涤、终止、洗涤、烘干处理，制得检测乙酰胆碱受体自身抗体的细胞爬片；其中，所述将乙酰胆碱受体的各个亚基的重组真核表达载体与一个无外源基因连入的真核表达载体混合，按照一定的比例进行共转，具体操作为：将乙酰胆碱受体的各个亚基基因α1（P3A-）、β1、δ1、ε和γ通过分子克隆方法分别连至一个空载质粒pCDNA3.1，分别构建得到各个亚基基因α1（P3A-）、β1、δ1、ε和γ的重组载体；再将上述各个亚基基因α1（P3A-）、β1、δ1、ε和γ的重组载体与一个无外源基因连入的真核表达载体17-T2A混合，获得共转质粒，将该共转质粒转染至已经铺好细胞的爬片上；各个亚基基因α1（P3A-）、β1、δ1、ε和γ的重组载体与一个无外源基因连入的真核表达载体17-T2A的转染质量比为2:1:1:1:1:24。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 陕西脉元生物科技有限公司 一种用于检测人体液中乙酰胆碱受体自身抗体的细胞爬片及其制备方法和应用

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