申请/专利权人:西南交通大学
申请日:2019-12-05
公开(公告)日:2022-11-29
公开(公告)号:CN110791483B
主分类号:C12N9/02
分类号:C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/06;C12R1/19
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.11.29#授权;2020.03.10#实质审查的生效;2020.02.14#公开
摘要:本发明公开了一种短链还原酶及其制备方法和应用。制备还原酶时,先制备具有如SEQ.IDNO.3所示基因序列的目的DNA片段;然后将该片段克隆入表达载体,得重组质粒;再将重组质粒转化感受态细胞,并将其转接到培养基中培养至OD600为0.5~0.7后,加入IPTG继续培养20~24h;最后取菌液,收集、纯化其中的可溶性蛋白,得短链还原酶。采用本发明的方法制得的短链还原酶可以克服目前酶法拆分并同步回收手性物质过程中存在的成本高、连续化生产困难、产物抑制带来的反应效率低、反应时间长等难题,使手性化合物的拆分工艺得以简化,拆分时间短,成本降低,经济可行。
主权项:1.短链还原酶在制备手性色满醇中的应用,其特征在于,所述手性色满醇为6-氟-4-色满醇,所述短链还原酶的基因序列如SEQ.IDNO.3所示,其经过以下步骤制得:S1:制备具有如SEQ.IDNO.3所示基因序列的目的DNA片段;S2:将目的DNA片段克隆入表达载体,得重组质粒;S3:将重组质粒转化感受态细胞,然后将其转接到培养基中培养至OD600为0.5~0.7后,加入IPTG继续培养20~24h;S4:取经过S3培养后的菌液,收集、纯化其中的可溶性蛋白,得短链还原酶。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 西南交通大学 一种短链还原酶及其制备方法和应用
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