申请/专利权人：朱文敏

申请日：2022-08-31

公开（公告）日：2022-12-02

公开（公告）号：CN115418346A

主分类号：C12N5/0775

分类号：C12N5/0775;A61K35/28;A61K35/51;A61P29/00;A61P37/02;A61P25/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2022.12.20#实质审查的生效;2022.12.02#公开

摘要：本发明提供了一种预处理间充质干细胞调理液的制备方法，包括一个配制间充质干细胞完全培养液的步骤；配制IFN‑γ、TNF‑α小分子组合物储存液；一个配制间充质干细胞预处理液的步骤；一个培养间充质干细胞预处理液的步骤；一个浓缩收集间充质干细胞调理液的步骤；将收集的细胞上清液转入超滤管中进行超滤的步骤。本发明还提供了上述的预处理间充质干细胞调理液在制备抗炎或者调节体内免疫的药物中的用途。本发明制备的调理液在现有的间充质干细胞培养模式的基础上仅添加两种小分子，由于预处理培养间充质干细胞所获得的调理液含有外泌体、生长因子，因此可实现大幅度提高细胞上清液抗炎和免疫调控的功效。

主权项：1.一种预处理间充质干细胞调理液的制备方法，其特征在于包括如下步骤1一个配制间充质干细胞完全培养液的步骤，所述的间充质干细胞完全培养液由高糖DMEM培养基、血清替代物、肝素钠溶液组成；2配制IFN-γ、TNF-α小分子组合物储存液；3一个配制间充质干细胞预处理液的步骤，在步骤1的间充质干细胞完全培养液中加入步骤2的小分子组合物储存液，使得IFN-γ、TNF-α的终浓度分别为8～12ngml。4一个培养步骤3的间充质干细胞预处理液的步骤：当细胞长至汇合度为90-100％时，胰酶消化细胞，计数，将1*10^5细胞接种于6孔板中或者1*10^6细胞接种于10cm细胞培养皿，培养18-24小时；弃掉原有培养基，更换间充质干细胞预处理液，继续培养24小时；弃掉含有小分子组合物的培养基，PBS缓冲液洗涤至少两次，继续培养36小时以上；5一个浓缩收集间充质干细胞调理液的步骤：收集步骤4的细胞上清，离心，去除死细胞和细胞碎片；6将步骤5收集的细胞上清液转入超滤管中进行超滤，超滤管的型号为30KD，4000～4500rpm离心；冻存于-80℃待用。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 朱文敏 一种预处理间充质干细胞调理液的制备方法和用途

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD