申请/专利权人：徐州锡沂康成食品检验检测研究院有限公司

申请日：2022-09-28

公开（公告）日：2023-01-06

公开（公告）号：CN115572775A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的撤回

法律状态：2023.06.23#发明专利申请公布后的撤回;2023.01.06#公开

摘要：本发明公开了一种食用菌病毒检测方法，将待检测的食用菌样品制备成匀浆液取上清液点样于方形膜片，利用dsRNA单克隆抗体J2通过斑点杂交检测食用菌dsRNA病毒；在封闭和洗膜处理中增加温度限制，通过降低环境温度使样本的RNA保存更加完整，提高检测精度。

主权项：1.一种食用菌病毒检测方法，其特征在于，所述食用菌病毒检测方法包括以下步骤：步骤一，将待检测的食用菌样品制备成匀浆液，并将所述匀浆液离心处理，待所述匀浆液分层后取其上清液备用；步骤二，将膜布裁剪成若干方形膜片，将若干所述方形膜片固定在移料板上；取所述上清液点样于所述方形膜片上，随后进行干燥处理；步骤三，将干燥后的所述方形膜片设于容器内，并将所述容器内加入封闭液直至完全浸没所述方形膜片，随后将所述容器放入冷藏设备在2-3℃温度下放置40-50min；步骤四，将冷藏后的所述容器置于水平摇床上封闭5-7min；步骤五，将所述方形膜片取出后清理封闭液，然后放入抗体溶液中在室温条件下孵育2h；步骤六，孵育后将所述方形膜片在4℃环境下放置在洗涤液中进行洗膜处理；步骤七，将所述方形膜片放入稀释过的二抗中孵育2h后再次进行所述步骤六中的洗膜处理；步骤八，将所述方形膜片放于显色缓冲液中浸泡至少20min，如显色出现紫色，则判断所述食用菌样品携带病毒。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 徐州锡沂康成食品检验检测研究院有限公司 一种食用菌病毒检测方法

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