申请/专利权人：中国计量科学研究院

申请日：2021-04-08

公开（公告）日：2023-01-06

公开（公告）号：CN113151425B

主分类号：C12Q1/6869

分类号：C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.01.06#授权;2021.08.10#实质审查的生效;2021.07.23#公开

摘要：本发明公开一种基于关键指标提高准确性的单细胞测序方法。建立了10XGenomics和BDRhapsody平台样本制备方法并加以优化确定了关键参数，确定单细胞转录组测序技术样本的评价标准；通过建立细胞系对不同单细胞转录组测序平台的结果分析,进而解决单细胞转录组测序技术存在可比性和重复性差、缺乏质量控制标准的问题。

主权项：1.一种基于关键指标提高准确性的单细胞测序方法，其中测序平台是10XGenomics，或BDRhapsody平台，其特征在于，单细胞测序的样本满足下述标准：细胞活性80％，细胞浓度700-1200cellsuL，细胞直径5-40um；单细胞测序上机样本满足下述要求：cDNA产量大于150ng；片段长度范围200bp～9000bp；主峰值在1000-2000之间；cDNA浓度1～60ngul；测序文库达到下述要求：片段大小位于400-500bp；文库峰位于250bp-1500bp之间；Qubit浓度＝4ngul；所述单细胞测序是指采用IlluminaHiseqPE150或NovaSeqPE150测序策略，每个细胞测50,000-100,000条reads，或每个细胞测15-30M数据量；所述单细胞是细胞系A549或NIH3T3。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国计量科学研究院 基于关键指标提高准确性的单细胞测序方法

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