申请/专利权人：南京农业大学

申请日：2021-09-09

公开（公告）日：2023-03-14

公开（公告）号：CN115786540A

主分类号：C12Q1/689

分类号：C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.03.31#实质审查的生效;2023.03.14#公开

摘要：本发明公开了一种基于饱和荧光染料的的蜡样芽孢杆菌及其毒素的快速检测技术及试剂盒。本方法针对蜡样芽孢杆菌的cer、bceT以及hblD基因，使用PMA和qPCR结合的方法，建立了检测蜡样芽孢杆菌活菌及其毒素的多重反应体系，并创新性地使用第三代饱和荧光染料SYTO9Green替换了传统实时荧光PCR体系中的非饱和荧光染料SYBRGreenI，以提高方法的灵敏度和熔解曲线分辨率，可实现闭管检测，减少样品污染；较之一般qPCR方法，可实现活菌检测，提高检测效率；较之TaqMan探针法，无需合成荧光基团修饰探针，较为经济实惠；实现了快速、准确地鉴定出蜡样芽孢杆菌活菌及其毒素的目的。

主权项：1.一种用于检测蜡样芽孢杆菌活菌或其毒素的三重实时荧光PCR引物组合物，所述的毒素为cer、bceT、hblD中的任意一种或多种，其特征在于，所述的PCR引物组合物由针对cer基因、bceT基因、hblD基因的特异性引物组成；其中，各引物序列如下所示：cer-F：SEQIDNO.1，cer-R：SEQIDNO.2，bceT-F：SEQIDNO.3，bceT-R：SEQIDNO.4，hblD-F：SEQIDNO.5，hblD-R：SEQIDNO.6。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京农业大学 一种基于饱和荧光染料的蜡样芽孢杆菌及其毒素的快速检测技术及试剂盒

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