申请/专利权人：天津大学

申请日：2022-08-08

公开（公告）日：2023-03-14

公开（公告）号：CN115786582A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.03.31#实质审查的生效;2023.03.14#公开

摘要：本发明公开一种结合CRISPRCas12a与RPA检测猴痘病毒方法、检测猴痘病毒核酸的试剂盒以及制备方法包括以下步骤：获取猴痘病毒的基因组序列，通过生物信息学分析对比，寻找其特异性鉴定区域；设计得到检测猴痘病毒核酸的crRNA‑1、crRNA‑2；RPA扩增MPXVF3L和B6R基因；取上述体系加入Cas12a系统，crRNA与dsDNA进行识别并结合，并激活Cas12a酶活性；Cas12a酶随机切割ssDNAFQ探针；荧光恒温放大器捕捉荧光信号，输出结果。该检测系统可在40min内检测MPXV基因组DNA，检测限为1copyμL，形成了一种高灵敏度、高特异性、低成本的MPXV检测工具。

主权项：1.一种结合CRISPRCas12a与RPA检测猴痘病毒方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：样品的特定片段经过特异性引物的RPA扩增；步骤2：上一步扩增得到的含有病毒模板片段的混合物与含有Cas12a酶、crRNA的系统混合，并加入检测探针；步骤3：不同的探针发出的信号分别被便携式荧光恒温放大器捕捉与放大，通过荧光值对结果进行判读。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津大学 结合CRISPR/Cas12a与RPA检测猴痘病毒方法、试剂盒及其制备方法

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