申请/专利权人:广东博与再生医学有限公司
申请日:2019-03-11
公开(公告)日:2023-03-14
公开(公告)号:CN111686302B
主分类号:A61L27/36
分类号:A61L27/36;A61L27/50
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.03.14#授权;2022.03.29#实质审查的生效;2020.09.22#公开
摘要:本发明公开了一种脱细胞角膜的制备方法,包括:一、对摘取的动物眼球进行清洗和消毒处理;二、剪取角膜,用生理盐水清洗干净;三、将角膜置于去离子水中,震荡破碎角膜中的细胞;四、将角膜置于高渗溶液中震荡处理,然后置于低渗溶液中震荡处理;五、角膜重复处理2~4次;六、脱水处理;七、削切,灭菌后保存。采用本发明的方法制备脱细胞角膜,能耗小,周期短,能在短时间内彻底脱除细胞的同时保护角膜的胶原的组成、机械完整性和生物活性,同时没有任何有毒有害的试剂残留,使角膜能更好的发挥其功能以及移植的有效性,制备的脱细胞角膜透明度好,免疫原性低,能够直接用于角膜移植。
主权项:1.一种脱细胞角膜的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、对摘取的动物眼球进行清洗和消毒处理;步骤二、从步骤一中经清洗和消毒处理后的动物眼球上剪取角膜,角膜上保留有2mm~4mm宽的巩膜,然后将剪取的角膜用生理盐水清洗干净;步骤三、将步骤二中清洗干净的角膜置于去离子水中,于摇床中震荡破碎角膜中的细胞;步骤四、将步骤三中震荡后的角膜置于高渗溶液中,于摇床中震荡处理3h~6h,然后置于低渗溶液中,于摇床中震荡处理3h~6h;所述高渗溶液为浓度为1M~3M的氯化钠溶液,所述低渗溶液为去离子水;步骤五、按照步骤四的方法对角膜重复处理2~4次;步骤六、将滤纸放置于干燥的氯化钠上,然后将微孔滤膜放置于滤纸上,形成脱水元件,将步骤五中重复处理后的角膜置于两个所述脱水元件之间进行脱水处理,所述角膜的上下表面均与微孔滤膜接触;所述微孔滤膜的层数为1~4层,滤纸的层数为3~10层;步骤七、对步骤六中脱水处理后的角膜进行削切,然后将削切后的角膜灭菌后保存;步骤一中所述消毒处理采用次氯酸钠溶液浸泡消毒,处理时间为30min~60min;所述次氯酸钠溶液的质量浓度为0.09%~0.2%。
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权利要求:
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