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【发明授权】一种T细胞培养基及其用于T细胞的扩增培养方法_曹彤_202110061155.6 

申请/专利权人:曹彤

申请日:2021-01-18

公开(公告)日:2023-03-17

公开(公告)号:CN112662625B

主分类号:C12N5/078

分类号:C12N5/078;C12N5/0783

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.03.17#授权;2021.05.04#实质审查的生效;2021.04.16#公开

摘要:本发明公开了一种T细胞的培养基及其用于T细胞的扩增培养方法,其特征在于,包括,T细胞培养基,所述T细胞培养基包括无血清培养基、IL‑2、IL‑21、IL‑15和OKT‑3以及人血浆;本发明不需要使用胎牛血清,可以避免外源血型带来的风险;不需要使用流式细胞仪或免疫磁珠技术进行分选纯化;扩增效率高,9天能获得高纯度T细胞,CD3+的纯度不低于90%。

主权项:1.一种T细胞扩增培养方法,其特征在于,包括如下步骤,步骤1:从人脐血中分离出脐血单个核细胞;步骤2:将步骤1所得到的脐血单个核细胞用T细胞培养基进行重悬,重悬后细胞的密度为1×106~2×106个mL,将细胞接种在低吸附培养瓶中,并置于37℃、5%CO2的培养箱中培养;步骤3:每2-3天添加T细胞培养基,使细胞的密度维持在1×106~2×106个mL;步骤4:扩增到9-14天之后收集T细胞;所述T细胞培养基由康宁KBM581淋巴细胞无血清培养基、IL-2、IL-21、IL-15和OKT-3以及人自体血浆组成,其中IL-2的浓度为400UmL、IL-21的浓度为10ngmL、IL-15的浓度为5ngmL、OKT-3的浓度为5ngmL,人自体血浆的体积分数为5-15%。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 曹彤 一种T细胞培养基及其用于T细胞的扩增培养方法

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