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【发明授权】一种修复肌肤用重组人源胶原蛋白及其制备方法_翔鹏(北京)生物科技有限公司_202211524577.3 

申请/专利权人:翔鹏(北京)生物科技有限公司

申请日:2022-12-01

公开(公告)日:2023-03-21

公开(公告)号:CN115637279B

主分类号:C12P21/02

分类号:C12P21/02;C07K14/78;A61K8/65;A61K8/9789;A61K8/02;A61K8/49;A61Q19/00;A61Q19/08;C12R1/84

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.03.21#授权;2023.02.14#实质审查的生效;2023.01.24#公开

摘要:本发明属于生物工程领域,尤其涉及一种修复肌肤用重组人源胶原蛋白及其制备方法。通过种子培养、摇瓶发酵、离心干燥等得到重组人源胶原蛋白,并将其应用到敷贴中,敷贴包括重组人源胶原蛋白原液和载体,将重组人源胶原蛋白原液和载体无菌封装于铝箔袋中,封口后低温辐射灭菌得到敷贴,其中重组人源胶原蛋白原液由重组人源胶原蛋白、促透剂、增稠剂、薰衣草提取物、防腐剂和水组成,制备得到的敷贴能够有效的提高皮肤的含水量,适用于不同情况后的修复。

主权项:1.一种重组人源胶原蛋白在敷贴中的应用,其特征在于,所述敷贴包括重组人源胶原蛋白原液和载体;所述重组人源胶原蛋白原液由以下重量份组分组成:重组人源胶原蛋白10份,促透剂6份,增稠剂5份,薰衣草提取物4份,防腐剂3份,水45份;所述载体为非织无纺布;所述重组人源胶原蛋白的制备方法为:S1、将在新鲜MD培养基中培养的工程菌按10%-12%的接种量接种到BMG培养基中,25-28℃,200-400rmin振荡培养过夜,然后接入BMG培养基中继续培养至OD600达6.0-8.0;所述工程菌保藏编号为CGMCCNo.16462;S2、室温下10000-12000rmin离心10-15min,收集BMG培养基中菌体,以BMM液体培养基重新悬浮菌体,使菌浓OD600为3.0,在25-28℃,自然pH值下,200-400rmin培养24-28h,每6-8h补加甲醇至3%;S3、对发酵液进行离心分离,收集上清液,上清液经滤膜过滤后,用SephadexG100凝胶柱层析分离纯化,再经冷冻干燥得到成品重组人源胶原蛋白;所述促透剂的制备方法为:以四氢呋喃为溶剂,加入己内酰胺和氯甲基环氧乙烷,搅拌均匀后加热回流反应2-4h,生成1-(环氧乙烷-2-基甲基)氮杂环-2-酮,即为所述促透剂;所述重组人源胶原蛋白原液的制备步骤为:A1、以乙醇为溶剂,加入重组人源胶原蛋白和N,N-二异丙基乙胺,混合均匀后向其中添加所述促透剂,升高温度至45-55℃,反应4-6h,将得到的反应液置于透析袋中用去离子水透析30-36h,透析完成后,经离心、冻干得到白色固体;A2、将步骤A1得到的白色固体溶解于部分水中,混合均匀后依次加入促透剂和增稠剂,搅拌均匀后得到第一溶液;A3、在剩余水中加入薰衣草提取物和防腐剂,搅拌均匀后得到第二溶液;A4、在搅拌状态下,向第二溶液中加入第一溶液,添加完成后,持续搅拌至混合均匀,得到所述重组人源胶原蛋白原液。

全文数据:

权利要求:

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