申请/专利权人:黑龙江八一农垦大学
申请日:2020-08-24
公开(公告)日:2023-05-26
公开(公告)号:CN112062820B
主分类号:C07K14/245
分类号:C07K14/245;C07K1/22;C07K1/34;C07K1/36;C07K1/14
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.05.26#授权;2020.12.29#实质审查的生效;2020.12.11#公开
摘要:本发明涉及一种大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法,该方法包括以下步骤:1诱导表达的rOmpA包涵体蛋白沉淀的收集;2rOmpA包涵体蛋白用8M尿素溶液变性;3用含15mMβ‑环糊精、pH8.5的100mMTris‑HCl缓冲液进行5倍稀释复性;4复性的rOmpA亲和层析纯化;5纯化的rOmpA置透析袋中,于pH7.6的PBS缓冲液中4℃透析12h以上,离心后收集上清,即获得纯化的复性rOmpA蛋白。本发明对表达的rOmpA包涵体蛋白进行复性和纯化,可获得纯度高达95%的可溶性rOmpA蛋白;本发明使用的复性方法简便快捷,有效解决了大肠杆菌rOmpA包涵体蛋白的复性纯化问题,为大规模生产利用rOmpA降低成本。
主权项:1.一种大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:(1)诱导表达的大肠杆菌rOmpA包涵体蛋白沉淀的收集;(2)rOmpA包涵体蛋白用8M尿素溶液变性;(3)用含15mMβ-环糊精的pH8.5的100mMTris-HCl缓冲液进行5倍稀释复性;(4)复性的rOmpA用亲和层析纯化;(5)复性纯化后的rOmpA置透析袋中,用pH7.6的PBS缓冲液于4℃透析12h以上,离心后收集上清,即获得纯化的复性rOmpA蛋白。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 黑龙江八一农垦大学 大肠杆菌重组外膜蛋白A包涵体蛋白的复性纯化方法
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