申请/专利权人:福建师范大学
申请日:2022-06-17
公开(公告)日:2023-05-30
公开(公告)号:CN115058441B
主分类号:C12N15/70
分类号:C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12N11/14;C12R1/19
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.05.30#授权;2022.10.04#实质审查的生效;2022.09.16#公开
摘要:本发明公开了利用细菌表面展示技术构建的重组菌株及其强化细胞固定化的方法,属于生物技术和工程领域,主要涉及一种改造大肠杆菌Escherichiacoli菌株,利用细菌表面展示技术,将能够携带负电荷的氨基酸例如谷氨酸、天冬氨酸锚定在E.coli表面,增加E.coli细胞膜表面携带的负电荷,并与带正电荷的载体进行静电吸附,从而提高重组E.coli在正电荷载体表面的固定化能力。
主权项:1.一种利用细菌表面展示技术强化细胞固定化的方法,其特征在于:包括:1)构建重组菌株E.colipRB1K-INaA-NCAs:制备含有冰核蛋白和带负电荷的氨基酸的融合蛋白的基因序列INaA-NCAs,所述基因序列INaA-NCAs如SEQIDNo.3所示;将所述基因序列INaA-NCAs与质粒pRB1K连接并转化、筛选,得到质粒pRB1K-INaA-NCAs;将所述质粒pRB1K-INaA-NCAs转化至大肠杆菌感受态细胞E.coli,得到重组菌株E.colipRB1K-INaA-NCAs;2)将生物炭依次用盐酸和FeCl3溶液进行表面改性,得到表面带正电荷的改性生物炭;将所述重组菌株E.colipRB1K-INaA-NCAs与表面带正电荷的改性生物炭混合,使所述重组菌株E.colipRB1K-INaA-NCAs吸附于所述改性生物炭上,实现细胞固定化。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 福建师范大学 利用细菌表面展示技术构建的重组菌株及其强化细胞固定化的方法
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