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龙图腾网恭喜南京普恩瑞生物科技有限公司申请的专利基于PDX/PDTX肿瘤活组织生物样本和数据库的分子标志物检测产品及其制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116593262B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2023-09-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310861191.X，技术领域涉及：G01N1/30；该发明授权基于PDX/PDTX肿瘤活组织生物样本和数据库的分子标志物检测产品及其制备方法是由朱燕萍;宋航;张小利;陈淼;郑晖设计研发完成，并于2023-07-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于PDX/PDTX肿瘤活组织生物样本和数据库的分子标志物检测产品及其制备方法在说明书摘要公布了：基于PDXPDTX肿瘤活组织生物样本和数据库的分子标志物检测产品及其制备方法，步骤为（1）PDXPDTX肿瘤活组织样本筛选；（2）PDXPDTX肿瘤活组织样本检测；（3）肿瘤组织PDXPDTX建模复苏和扩增；（4）PDXPDTX肿瘤活组织样本复测；（5）分子标志物检测产品的制备。该试剂盒质控片可辅助分子标志物表达结果的精准判读，减小不同医院、不同医生之间的主观判读误差，可进一步提高分子标志物识别判读的特异性及准确度。

本发明授权基于PDX/PDTX肿瘤活组织生物样本和数据库的分子标志物检测产品及其制备方法在权利要求书中公布了：1.基于PDXPDTX肿瘤活组织生物样本和数据库的分子标志物检测产品的制备方法，其特征在于，步骤为：（1）PDXPDTX肿瘤活组织样本筛选：1.1PDXPDTX肿瘤活组织样本初筛：根据分子标志物表达对应的CNV值和RNA-seqTPM值设定阳性样本和阴性样本，然后分组，其中阳性样本为：CNV≥10和TPM≥50，阴性样本为：CNV≤4和TPM≤10；通过PDXPDTX肿瘤活组织数据库中存储的样本CNV值和RNA-seqTPM值进行样本初筛，筛选出符合阳性或阴性要求的PDXPDTX肿瘤活组织样本并编号；1.2PDXPDTX肿瘤活组织样本库选取：依据筛选出的样本编号和分组情况，按照每组至少5例进行分配，从PDXPDTX肿瘤活组织生物样本库中提取样本，每份样本的取样体积不少于8mm3；（2）PDXPDTX肿瘤活组织样本检测：2.1PDXPDTX肿瘤活组织蜡块制备：将上步取得的样本库存储的PDXPDTX肿瘤活组织进行组织固定和蜡块制备；2.2病理检测：将制备好的PDXPDTX肿瘤活组织蜡块进行HE染色，剔除掉肿瘤细胞比例＜30%及坏死比例＞20%的样本，然后进行IHC染色，在显微镜下观察PDXPDTX肿瘤活组织样本的分子标志物表达水平是否符合上述1.1分组要求；2.3FISH检测确定最优的目标样本：将通过病理检测并符合1.1分组要求的PDXPDTX肿瘤活组织蜡块进行FISH检测，根据分子标志物表达对应的FISH信息特征确定最优的目标样本；（3）肿瘤组织PDXPDTX建模复苏和扩增：对步骤2.3确定的目标样本进行肿瘤组织的建模复苏和扩增；（4）PDXPDTX肿瘤活组织样本复测：4.1PDXPDTX肿瘤活组织蜡块制备：将复苏和扩增后的PDXPDTX肿瘤活组织制备成蜡块；4.2病理复测：将制备好的PDXPDTX肿瘤活组织蜡块进行HE染色，筛选出肿瘤细胞比例≥30%及坏死比例≤20%的样本，然后进行IHC染色，在显微镜下观察PDXPDTX肿瘤活组织样本的分子标志物表达水平是否符合分组要求；4.3FISH复测：将通过病理检测并符合分组要求的PDXPDTX肿瘤活组织蜡块进行FISH复测，根据分子标志物表达对应的FISH信息特征复测确定最优目标样本；（5）分子标志物检测产品的制备：1）制备组织芯片：根据IHC染色结果，在显微镜下划出分子标志物表达均一的阳性区域或阴性区域，再利用组织芯片取样器对照上述划出的区域分别取出直径1mm的分子标志物阳性表达和阴性表达的PDXPDTX肿瘤活组织样本柱，按照特定顺序放入预铸蜡块模具中，根据分子标志物特征确定组织芯片中的对照区样本具体分布；将带有组织的蜡块放入不锈钢底模，切面朝下，置入70℃烤箱30-60min，待蜡块完全透明，取出；组织包埋盒至于蜡块上方，继续注蜡至盒底部完全浸入，放置冷却；取出后进行切角标记；2）组织切片：将蜡块放在切片机上进行切片，先对蜡块进行修块：修块模式下，修块切片厚度调节至15-20μm，修切蜡块至组织全部暴露后，调整切片厚度为3μm，然后进行切片；3）展片：用镊子将切片移至摊片机中的水面展开；4）捞片：将展开的切片贴于载玻片上，倾斜载玻片至45°使切片上多余的水流下，晾干而得。

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