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龙图腾网获悉新泰市佳禾生物科技有限公司;汕头市佳禾生物科技有限公司申请的专利一种尼克酰胺磷酸核糖转移酶的提取纯化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113684193B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2023-09-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110848343.3，技术领域涉及：C12N9/10；该发明授权一种尼克酰胺磷酸核糖转移酶的提取纯化方法是由岳明瑞;郭永胜;谢沛;曹华杰;滕义卫设计研发完成，并于2021-07-27向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种尼克酰胺磷酸核糖转移酶的提取纯化方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种尼克酰胺磷酸核糖转移酶的提取纯化方法，包括以下步骤：1将NAMPT生产菌株进行发酵培养，得到发酵液，离心，收集发酵液中的菌体；2向菌体中加入纯水，用氨水调节pH至7.2‑7.4，过均质机后离心，分离得到上清液；3将上清液依次经活性炭脱色和陶瓷膜过滤处理，得到滤液；4向滤液中加入非离子型去垢剂去除包涵体，得到粗酶液；5将粗酶液采用镍柱进行亲和层析，收集洗脱液，洗脱液经电渗析脱盐后浓缩结晶，干燥，即提取纯化得到NAMPT。采用本发明的方法可以从含有尼克酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液中将NAMPT有效的提取纯化出来，NAMPT的收率和纯度都有了显著的提高。

本发明授权一种尼克酰胺磷酸核糖转移酶的提取纯化方法在权利要求书中公布了：1.一种尼克酰胺磷酸核糖转移酶的表达纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：1将NAMPT生产菌株进行发酵培养，得到发酵液，离心，收集发酵液中的菌体；2向菌体中加入纯水，每1g菌体中加入999g水，用氨水调节pH至7.2-7.4，过均质机后离心，均质压力15,000PSI，均质流量400LHr，离心速度10000rmin，离心20min，分离得到上清液；3将上清液依次经活性炭脱色和陶瓷膜过滤处理，陶瓷膜的孔径是100nm，过滤压力0.5MPa，得到滤液；4向滤液中加入非离子型去垢剂TritonX-100和氯化钠，使TritonX-100的终质量浓度为2％，氯化钠的终浓度为500mM，去除包涵体，得到粗酶液；5将粗酶液采用镍柱进行亲和层析，结合缓冲液是50mM的PBS，洗脱剂是80mM的咪唑磷酸盐缓冲液，洗脱剂的用量为5倍柱体积，流速为2Lmin，收集洗脱液，洗脱液经电渗析脱盐后浓缩结晶，干燥，即提取纯化得到NAMPT；步骤1中，所述NAMPT生产菌株由如下方法构建而成：将SEQIDNO.1所示的编码NAMPT的核苷酸片段连入质粒pLLP-ompA，获得第一重组表达载体；将SEQIDNO.2所示的编码PARP1的核苷酸片段连入质粒pET-42a+，获得第二重组表达载体；再将获得的第一重组表达载体和第二重组表达载体导入大肠杆菌，即构建得到NAMPT生产菌株；步骤1中，发酵培养的条件为：初始发酵温度为32-34℃，搅拌转速为200-400rpm，发酵过程中控制溶氧为20-40％，pH值为6.8-7.2；发酵培养至发酵液稀释100倍后的OD600值为0.18-0.20；将发酵体系的温度降至21℃-23℃，加入IPTG，使IPTG在发酵体系中的终浓度为0.5mmolL；同时流加补料，所述补料由甘油和水按体积比1:1配制而成，补料的加入量为发酵培养基重量的10-20％，调控补料的流加速度使发酵体系的溶氧控制在20-40％，诱导培养20-30h，得到发酵液；所述发酵培养基的组成为：甘油10gL，酵母浸膏8gL，氯化钠3gL，硫酸铵2.5gL，三水磷酸氢二钾4gL，柠檬酸铁铵0.3gL，柠檬酸2.1gL，蛋白胨12gL，七水硫酸镁0.5gL。

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