恭喜山东省生物制品研究所彭延杰获国家专利权
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龙图腾网恭喜山东省生物制品研究所申请的专利一种减少蛋白在protein L凝胶层析中形成多聚体的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN109111498B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201811061562.1,技术领域涉及:C07K1/22;该发明授权一种减少蛋白在protein L凝胶层析中形成多聚体的方法是由彭延杰;展波;曹强庚;庞广礼;林童俊;丁艳;李锋;梁邦领设计研发完成,并于2018-09-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种减少蛋白在protein L凝胶层析中形成多聚体的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种减少蛋白在proteinL凝胶层析中形成多聚体的方法,包括:1在proteinL洗脱体系中加入半胱氨酸Cys,利用NaOH溶液中和洗脱体系;2蛋白proteinL凝胶层析纯化后的样品利用G25葡聚糖凝胶层析处理,用于去除Cys。本发明有效抑制了低pH洗脱引起的多聚体形成,且纯化蛋白没有发生降解。本发明工艺操作简单,效果明显,为实验室研究及工业生产中proteinL凝胶层析工艺提供参考,也为进一步研究去除其它类似蛋白在纯化中形成多聚体的方法提供了新思路。
本发明授权一种减少蛋白在protein L凝胶层析中形成多聚体的方法在权利要求书中公布了:1.一种减少蛋白在proteinL凝胶层析中形成多聚体的方法,其特征在于,所述方法包括: 1在proteinL洗脱体系中加入半胱氨酸Cys,利用NaOH溶液中和洗脱体系; 2蛋白proteinL凝胶层析纯化后的样品利用G25葡聚糖凝胶层析处理,用于去除Cys; 所述步骤1中洗脱体系的pH为2.0-7.0; 具体步骤如下: a用5倍柱体积的PBS平衡液平衡proteinL凝胶层析柱; b将融合蛋白4D5Fv-PE25以20mgml凝胶的上样量进行上样; c再用5倍柱体积的PBS平衡液平衡proteinL凝胶层析柱; d用含有半胱氨酸的洗脱体系进行蛋白洗脱,并收集洗脱液; e将洗脱体系轻微混匀后,立即利用0.5M的NaOH溶液将洗脱体系中和至pH为8.5±0.3; f利用超滤浓缩的方法将中和液浓缩至蛋白含量为2mgml; g将浓缩样品上样至用PBS平衡好的G25葡聚糖凝胶柱后,用PBS缓冲液洗脱,收集洗脱液即可获得目的蛋白的单体; 所述步骤d中用含有0.1M半胱氨酸的30mM柠檬酸洗脱缓冲液进行蛋白洗脱。
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