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【发明授权】抗菌肽buforinⅡ和猪INF-α融合表达毕赤酵母菌及其应用_中国科学院亚热带农业生态研究所_200910273232.3 

申请/专利权人:中国科学院亚热带农业生态研究所

申请日:2009-12-11

公开(公告)日:2012-05-30

公开(公告)号:CN101717737B

主分类号:C12N1/19(2006.01)I

分类号:C12N1/19(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A23K1/16(2006.01)I;A23K1/18(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N

优先权:

专利状态码:有效-专利权人的姓名或者名称、地址的变更

法律状态:2015.08.19#专利权人的姓名或者名称、地址的变更;2013.07.31#专利权的转移;2012.05.30#授权;2010.11.17#著录事项变更;2010.07.21#实质审查的生效;2010.06.02#公开

摘要:本发明公开了一种抗菌肽buforin II和猪INF-α融合表达毕赤酵母菌及制备方法和应用,毕赤酵母菌Pichia pastoris FZM2009,CCTCC NO:M209259。其步骤是:A、表达盒PAOX1-αFactor-IFNα-6×His-bufforin II-Zeocinr的构建;B、表达工程菌Pichia pastoris FZM2009的构建,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定得到工程菌。C、融合蛋白的制备步骤是:1在含有100μgml Zeocin的YPD平板上复苏;2挑单克隆接种于含有YPD培养基中,振摇培养;3将一体积培养物接种于十体积发酵培养基培养;4离心,获取上清;5加一倍体积上样缓冲液上清中,电泳检测;6上清液过分子筛凝胶柱,收集组分;7冷冻干燥收集的组分,得到融合蛋白;8用肠激酶酶切融合蛋白获得buforin II和IFNα。融合表达融合蛋白buforin II和INF-α应用猪饲料。方法易行、操作简便、表达量高、成本低廉、生物学活性强。

主权项:一种抗菌肽buforin II和猪INF‑α融合表达毕赤酵母菌,其特征在于:所述的毕赤酵母菌Pichia pastorisFZM2009的保藏编号为CCTCC NO:M 209259。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国科学院亚热带农业生态研究所 抗菌肽buforinⅡ和猪INF-α融合表达毕赤酵母菌及其应用

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