申请/专利权人：埃尔萨里斯生物技术公司;法国国家科学研究中心;法国居里学院

申请日：2016-04-15

公开（公告）日：2018-05-22

公开（公告）号：CN108064245A

主分类号：C07K16/28(2006.01)I

分类号：C07K16/28(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P35/02(2006.01)I;A61P31/00(2006.01)I

优先权：["2015.04.17 EP 15305581.9"]

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的视为撤回

法律状态：2021.08.20#发明专利申请公布后的视为撤回;2018.06.15#实质审查的生效;2018.05.22#公开

摘要：本发明涉及结合到人类Tyro3受体的细胞外结构域、特别是免疫球蛋白样结构域Ig‑1，并减少或抑制人类Gas6与所述受体的结合的抗体，特别是人类或人源化抗体。本发明还涉及这些抗体在过度增殖性疾病或传染性疾病的诊断、预防或治疗中的用途。

主权项：一种分离的人类或人源化抗体，其结合到人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig‑1，但不结合到人类Axl和Mer受体，并减少或抑制人类Gas6与人类Tyro3受体的结合。

全文数据：抗Tyro3抗体及其用途技术领域[0001]本发明涉及医学领域，具体来说涉及结合到Tyr〇3受体酪氨酸激酶的细胞外结构域的抗体。这些抗体表现出有利的特征，特别是对于治疗和诊断目的来说。背景技术[0002]Tyro3,也被称为13}^、0七1^、1^6、1^1^、31^或1'丨;1^，是受体酪氨酸激酶的15^〇3^叉1MerTAM家族的成员。[0003]酪氨酸激酶受体由能够结合特定配体的细胞外结构域、跨膜结构域和能够结合并磷酸化所选细胞内物质的细胞内催化结构域构成。配体与细胞外区域的结合引起酪氨酸激酶受体中的一系列结构重排，导致它的酶促激活，通过细胞内蛋白的磷酸化触发事件的级联，最终将细胞外信号传导到细胞核，引起基因表达改变。[0004]所述TAM受体含有N-端细胞外结构域，其包含两个免疫球蛋白（Ig相关的结构域和两个III型纤连蛋白（FNIII相关的结构域，后面跟着单个跨膜螺旋和细胞质酪氨酸激酶结构域。在配体结合后，受体二聚化并且酪氨酸激酶变得激活。[0005]这些受体可以由同源配体Gas6生长停滞特异性基因-6和或蛋白S激活，这两者表现出约43%的氨基酸序列同一性，并且除了在蛋白S中存在凝血酶切割位点但在Gas6中不存在之外，共有相同的复杂的多结构域结构。[0006]最近的研究揭示，TAM受体在免疫力、止血和炎症中发挥关键作用（Zheng等，J.Immunol2015,194;Rothlin等，Cell.2007,131,1124-1136。也已显示，这些受体，特别是Tyro3,与肿瘤发生和肿瘤细胞存活相关Linger等，AdvCancerRes，2008;100:35-83;VanderMeer等，Blood.2014;21316:2460-2469。基于这些发现，Tyro3被鉴定为用来开发用于过表达Tyr〇3的癌症例如膀胱癌、黑素瘤或乳腺癌WO2010031828;Ekyal〇ng〇等，AnticancerRes.2014Jul;347:3337-45.或增强免疫应答（Lemke和Rothlin，NatRevImmunol.2008;85:327-336的治疗剂的靶点。[0007]TAM受体抑制剂包括降低受体活性的分子，例如特异性结合Gas6或蛋白S或细胞外结构域并阻止所述配体与受体之间的相互作用的分子，降低Gas6或蛋白S的浓度的分子，抑制组成性Tyro3活化的分子和结合到细胞内结构域并阻止受体的信号传导的分子。选择性抑制剂可以为小分子、缺少酪氨酸激酶结构域的可溶性受体或抗体的任一种形式。[0008]Tyr〇3受体是研究最少的TAM受体，并且到目前为止没有有效的方法用于这种受体的治疗性选择性抑制。一些针对Tyro3的鼠类抗体是可商购的，并已被Demarest等人描述Biochemistry2013,52,3102-3118，用于研究这种受体在黑素瘤中的活性。然而，鼠类单克隆抗体在人类患者治疗中的使用可能引起针对所述抗体的宿主免疫应答，因此损害了治疗功效。[0009]因此，对于有效且特异性结合到Tyr〇3并调节其活性的人类或人源化抗体，存在着强烈需求。发明内容[0010]本发明提供了抗Tyr〇3抗体及其使用方法。[0011]第一方面，本发明涉及一种分离的人类或人源化抗体，其结合到人类Tyr〇3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I，不结合到人类Axl和Mer受体，并且减少或抑制人类Gas6与人类Tyro3受体的结合。[0012]具体来说，本发明的抗体可以包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll和或包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的CDR-Hl0[0013]所述抗体还可以结合到人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。具体来说，结合到人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-I和Ig-2的抗体可以包含：[0014]轻链，其包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll，和由或基本上由SEQIDNO:88、102、116、130、144或158的轻链可变区的CDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L2和CDR-L3,以及[0015]重链，其包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl，和由或基本上由SEQIDNO:89、103、117、131、145或159的重链可变区的CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-H2和CDR-H3。[0016]或者，所述抗体可以结合到人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-I，但是不结合到免疫球蛋白样结构域Ig-2。具体来说，这种抗体可以包含：[0017]轻链，其包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll，和由或基本上由SEQIDNO:10、32、46、60或74的轻链可变区的CDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L2和CDR-L3,和[0018]重链，其包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl，和由或基本上由SEQID觀：：11、33、47、61或75的重链可变区的0«-!12和01?-!13构成的CDR-H2和CDR-H3。[0019]具体来说，本发明的抗体可以包含：[0020]包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和⑶R-L3构成的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:11的重链可变区的⑶R-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0021]包含由或基本上由SEQIDNO:32的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和⑶R-L3构成的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:33的重链可变区的⑶R-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0022]包含由或基本上由SEQIDN0:46的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:47的重链可变区的⑶R-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0023]包含由或基本上由SEQIDN0:60的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:61的重链可变区的⑶R-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0024]包含由或基本上由SEQID勵:74的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:75的重链可变区的⑶R-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0025]包含由或基本上由SEQID勵:88的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:89的重链可变区的⑶R-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0026]包含由或基本上由SEQID勵：102的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的⑶R-L1、CDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:103的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0027]包含由或基本上由SEQID勵：116的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的⑶R-L1、CDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:117的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0028]包含由或基本上由SEQID勵：130的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的⑶R-L1、CDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:131的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0029]包含由或基本上由SEQID勵：144的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的⑶R-L1、CDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:145的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或[0030]包含由或基本上由SEQID勵：158的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的⑶R-L1、CDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:159的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链。[0031]所述抗体可以是Tyro3受体的抑制剂，优选为减少或阻断Tyr〇3配体与Tyr〇3的细胞外结构域的结合和或减少或阻断Tyro3介导的信号转导和或减少或阻断Tyro3磷酸化和或减少或阻断Tyro3二聚化的抑制剂。[0032]所述抗体可以是IgGl、IgG2、IgG3或IgG4抗体，优选为IgGl抗体。[0033]另一方面，本发明涉及一种分离的核酸分子，其选自：[0034]a编码本发明的抗体的核酸序列，以及[0035]⑹与a中的任一序列互补的核酸。[0036]本发明还涉及包含本发明的核酸的载体。[0037]本发明还涉及包含本发明的核酸或载体的宿主细胞。[0038]另一方面，本发明涉及一种用于生产本发明的抗体的方法，所述方法包括将本发明的宿主细胞在适合于所述抗体表达的条件下培养，并任选地回收所述抗体。[0039]另一方面，本发明涉及一种药物组合物，其包含本发明的抗体、核酸、载体或宿主细胞，以及可药用载体或赋形剂。[0040]最后一方面，本发明还涉及本发明的抗体或药物组合物，其用于过度增殖性疾病或传染性疾病的诊断、预防或治疗。附图说明[0041]图1:产生的人类Tyr〇3细胞外结构域ECD的不同片段的示意图。[0042]图2:双重夹心ELISA的设计。[0043]图3:针对hTyro3ECD的scFvIgG的ELISA结合测定法。图3A:ScFv的结果。图3B:IgG的结果。[0044]图4:将hTyro3、hAxl或hMer的纯化的细胞外结构域包被在微量滴定板上，并在抗Tyro3scFvlygmL存在下温育。图4厶.2410、2411、2412、2413、2414、24158。卩¥。图48.2717和2718scFv。图4：.2709、2710、2711和27138〇?¥。结合的片段用抗]\^3-!11^抗体揭示。[0045]图5:使用抗Tyro3scFv的GAS6竞争测定法。图5A.scFv和MAB859与全长Tyro3的结合。将全长Tyr〇3包被在ELISA微量滴定板上。ScFv以IOygmL的浓度使用，MAB859以3种浓度使用：lwgmLMAB859-1，5ygmLMAB859-5和lOygmLMAB859-10。结合到全长Tyro3的scFv使用抗HIS-HRP抗体检测，MAB859使用抗小鼠HRP抗体检测。示出了只使用检测抗体的阴性对照抗HIS或抗小鼠抗体）。图5B.scFv对Tyro3GAS6结合的影响。将单独的生物素化的GAS62.5ygmL或scFvGAS6混合物在室温下在全长Tyro3包被的板上施加1小时。GAS6与Tyr〇3的结合使用链亲和素-HRP400ngmL检测。示出了在单独的链亲和素-HRP存在下测量到的OD。[0046]图6:scFV图6A和IgG格式（图6B的抗Tyro3抗体针对食蟹猴Tyro3ECD的交叉反应性。[0047]图7:scFV格式的抗Tyro3抗体针对鼠类Tyro3E⑶的交叉反应性。[0048]图8:抗Tyro3scFv对Tyro3EO的结构性结构域的表位限制。[0049]图9:在活细胞中抗Tyr〇3IgG的结合。将被转染以表达重组人类Tyr〇3的HEK293细胞和未转染的HEK293细胞用Live-DeadNIR染料染色，并且与TYRO3特异性MAB859单克隆抗体、它的同种型对照（上图）或各个抗Tyr〇3IgG中图和下图）温育。IgG同种型对照是IGX2656。使用PE偶联的山羊抗小鼠IgAbBDPharmingen来揭示MAB002和MAB859结合。使用PE偶联的小鼠抗人类λ轻链Ab来揭示抗Tyr〇3IgG结合。使用ARIAIII流式细胞仪BectonDickinson获取数据并使用Kaluza软件（BeckmanCoulter分析数据。示出的柱状图限于显示出HEK293细胞的特征性尺寸和粒度测量值的活细胞。抗Tyr〇3IgGTyr〇3特异性结合由Tyr〇3转染的细胞黑线与未转染的细胞灰线相比荧光强度的增加来显示。[0050]图10:来自于本发明的不同的捕获的抗hTYR03IgG与人类Tyr〇3蛋白的细胞外结构域之间的相互作用的传感图迹线。[0051]图11:在octetK2上通过生物膜层干涉测量法BiolayerInterferometryBLI评估的抗人类Tyro3IgG的动力学参数。[0052]发明详述[0053]定义[0054]当在本文中使用时，术语“Tyro3”、“Tyro3酪氨酸激酶”或“Tyro3受体”是指Tyro3蛋白，优选是指人类Tyro3蛋白。人类Tyro3基因ID:7301也被称为Byk、Dtk、Rse、Rek、Sky或Tif，并且是受体酪氨酸激酶的Tyr〇3AxlMerTAM家族的成员。多核苷酸和氨基酸序列在本领域中是公知的。参考序列分别是Genbank登记号MN_006293.2和NP_006284.2。人类Tyro3在转录组数据库UniGene中的参考条目是Hs.381282。Tyro3受体由包含两个免疫球蛋白（Ig相关的结构域Ig-I和Ig-2和两个III型纤连蛋白（FNIII相关的结构域FNIII-I和FNIII-2的N-端细胞外结构域，以及跟随在其后的单个跨膜螺旋和细胞质酪氨酸激酶结构域构成。每个结构域的位置是已知的并且可以容易地在公共数据库中获得。在Uniprot登记号Q06418中公开的人类Tyro3蛋白（SEQIDNO1的细胞外结构域包括SEQIDNO1的第41位至第128位的第一Ig结构域（Ig-I、SEQIDNO1的第139位至第220位的第二Ig结构域Ig-2、SEQIDNO1的第227位至第320位的第一FNIII结构域FNIII-I和SEQIDNO1的第325位至第416位的第二FNIII结构域FNIII-2JyroS蛋白酪氨酸激酶结构域从SEQIDNO1的第518位延伸到第790位。[0055]本文中所定义的“恒定区”意味着抗体来源的恒定区，其由轻链或重链免疫球蛋白恒定区基因之一编码。本文中使用的“恒定轻链”或“轻链恒定区”意味着由κCk或λα轻链编码的抗体区域。恒定轻链通常包含单个结构域，并且如本文中所定义是指Ck或α的第108-214位，其中编号是按照EU指数（Kabat等，1991，《免疫学重要的蛋白质的序列》SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版，美国公共卫生服务部UnitedStatesPublicHealthService，美国国立卫生研究院（NationalInstitutesofHealth，Bethesda。本文中使用的“恒定重链”或“重链恒定区”意味着由μ、δ、γ、α或ε基因编码的抗体区域，其将抗体的同种型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA或IgE。对于全长IgG抗体来说，本文中所定义的恒定重链是指CHl结构域的N-端到CH3结构域的C-端，因此包含第118-447位，其中编号是按照EU指数。[0056]抗体的“可变区”或“可变结构域”是指抗体的重链或轻链的氨基端结构域。重链的可变结构域可以被称为“VH”。轻链的可变结构域可以被称为“VL”。这些结构域通常是抗体的最可变的部分，并含有抗原结合位点。轻链或重链可变区VL或VH由被三个称为“互补决定区”或“CDR”的高变区打断的构架区构成。构架区和CDR的范围已被精确定义，例如在Kabat参见《免疫重要的蛋白质的序列》（SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，E.Kabat等，美国卫生与人类服务部（U.S.DepartmentofHealthandHumanServices，（1983和Chothia中。抗体的构架区，即构成要件轻链和重链的组合的构架区，起到定位和对齐CDR的作用，所述CDR主要负责与抗原的结合。[0057]当在本文中使用时，“构架”或“FR”区意味着抗体可变结构域的排除被定义为CDR的那些区域之外的区域。每个抗体可变结构域构架可以被进一步细分成被CDR分隔开的毗邻区域FR1、FR2、FR3和FR4。[0058]当在本文中使用时，术语“高变区”是指抗体的负责抗原结合的氨基酸残基。高变区通常包含来自于“互补决定区”或“CDR”的氨基酸残基例如轻链可变结构域中的第24-34位LI、第50-56位L2和第89-97位L3残基和重链可变结构域中的第31-35位Hl、第50-65位H2和第95-102位H3残基;Kabat等，1991和或来自于“高变环”的残基例如轻链可变结构域中的第26-32位LI、第50-52位L2和第91-96位L3残基和重链可变结构域中的第26-32位（Hl、第53-55位（H2和第96-101位（H3残基；Chothia和Lesk，J.Mol.Biol1987;196:901-917jbMCDR代表了KabatCDR与Chothia结构环之间的折衷，并且被OxfordMolecular的AbM抗体建模软件使用。“Contact”CDR是基于可用的复杂晶体结构的分析。已定义了頂GT独特编号，以比较不论何种抗原受体、链类型或物种的可变结构域（LefrancM.-P.,ImmunologyToday18,5091997;LefrancM.-P.，TheImmunologist，7,132-1361999;Lefranc，Μ·-P·等，Dev·Comp·Immunol·，27，55-772003。通常，这个区域中氨基酸残基的编号通过在Kabat等（同上）中所描述的方法来进行。[0059]术语“Kabat位置”或“Kabat中的可变结构域残基编号”或“Kabat中的氨基酸位置编号”及其变化形式，是指在Kabat等（同上）中用于抗体汇编的重链可变结构域或轻链可变结构域的编号系统。使用这种编号系统，真实的线性氨基酸序列可能含有更少或添加的氨基酸，其对应于可变结构域的FR或CDR的缩短或其中的插入。对于给定抗体来说，残基的Kabat编号可以通过在抗体序列的同源性区域处与“标准的”Kabat编号的序列对齐来确定。[0060]当在本说明书中使用时，术语“约”是指指定值的±10%的值范围，更优选为指定值的±5%的值范围。例如，“约Γ当考虑10%时意味着0.9至1.1，当考虑5%时意味着0.95至1.05〇[0061]当在本文中使用时，术语“基本上由……构成”是指氨基酸序列与参比序列具有至少80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99%的序列同一性。相对于参比序列，所述序列可以含有置换、优选为保守置换，插入或缺失。优选地，所述序列可以含有相对于参比序列1至10个置换、插入或缺失，更优选地相对于参比序列1、2、3、4或5个，甚至更优选地1或2个置换、插入或缺失。在某些实施方式中，置换、插入和或缺失发生在CDR之外的区域中（即在构架区中）。[0062]当在本文中使用时，术语“序列同一性”或“同一性”是指来自于两个多肽序列的对齐的位置中的匹配相同的氨基酸残基数目（％。序列同一性通过在将序列对齐以便使重叠和同一性最大化并同时使序列间隙最小化时对序列进行比较来确定。具体来说，序列同一性可以根据两个序列的长度，使用多种数学全局或局部对齐算法中的任一种来确定。长度相近的序列优选地使用在整个长度内将序列最佳对齐的全局对齐算法例如Needleman和Wunsch算法;Needleman和Wunsch，1970来对齐，而长度显著不同的序列优选地使用局部对齐算法（例如Smith和Waterman算法（Smith和Waterman，I98I或Altschul算法Altschul等，1997;Altschul等，2005来对齐。旨在确定氨基酸序列百分比同一性的对齐可以以本领域技术内的各种不同方式实现，例如，使用在因特网网站如http：www.ncbi.nlm.nih.govigblastgichttp：www.ebi.ac.ukToolsemboss_Lnj公开获得的计算机软件。本领域技术人员可以确定用于测量对齐的适合参数，包括在待比较的序列的全长内实现最大对齐所需的任何算法。出于本发明的目的，氨基酸序列同一性％值是指使用成对序列对齐程序EMBOSSNeedle产生的值，所述程序使用Needleman-Wunsch算法产生两个序列的最佳全局对齐，其中所有搜索参数被设定到缺省值，即评分矩阵=BL0SUM62，缺口开放=10,缺口延长=0.5,末端缺口罚分=false，末端缺口开放=10并且末端缺口延长=0·5〇[0063]“保守的”氨基酸置换是其中氨基酸残基被具有物理化学性质相似的侧链的氨基酸残基代替的置换。具有相似侧链的氨基酸残基的家族在本领域中是已知的，并包括具有碱性侧链例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸）、酸性侧链例如天冬氨酸、谷氨酸）、不带电荷的极性侧链例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸）、非极性侧链例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸）、β分支的侧链例如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和芳香族侧链例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸的氨基酸。[0064]当在本文中使用时，与多肽或核酸相关联的术语“纯化的”或“分离的”是指多肽或核酸不是处于其天然介质中或天然形式下。因此，术语“分离的”包括从其原始环境，例如如果它是天然存在的，从天然环境取出的多肽或核酸。例如，分离的多肽通常不含通常与其结合或通常与其混合或在溶液中的至少某些蛋白质或其他细胞组分。分离的多肽包括细胞裂解物中包含的天然生产的所述多肽，纯化或部分纯化形式的所述多肽，重组多肽，被细胞表达或分泌的所述多肽，以及在异源宿主细胞或培养物中的所述多肽。与核酸相关联，术语分离的或纯化的指示例如所述核酸不在其天然的基因组背景中（例如在载体中，作为表达盒，连接到启动子，或人工引入到异源宿主细胞中）。[0065]本发明的抗体[0066]本发明是基于在治疗上可用于在人类对象中有效且选择性地调节Tyr〇3受体活性的新抗体的产生。[0067]因此，第一方面，本发明涉及一种结合到人类Tyro3受体的细胞外结构域的抗体。[0068]在本文中，术语“抗体”以最宽泛的意义使用，并且具体来说覆盖了单克隆抗体包括全长单克隆抗体）、多克隆抗体、多特异性抗体例如双特异性抗体）、抗体片段及其衍生物，只要它们表现出所需的生物活性即可。在某些实施方式中，抗体可以是通过抗体与一种或多种其他蛋白质或肽的共价或非共价结合形成的较大的融合分子的一部分。[0069]在某些实施方式中，所述抗体是全长抗体。当在本文中使用时，术语“全长抗体”是指具有与本源抗体结构基本上相似的结构的抗体，而不是下文所定义的抗体片段。所述术语特别是指具有含有Fc区的重链的抗体。在优选实施方式中，所述抗体是选自IgGl、IgG2、IgG3和IgG4的全长IgG抗体，优选为全长IgG1抗体。[0070]在某些其他实施方式中，所述抗体是抗体片段。“抗体片段”包含全长抗体的一部分，通常是其抗原结合或可变结构域。抗体片段的实例包括Fab、Fab、Fab2、Fab’）2、Fab3、Fv通常为抗体的单一臂的VL和VH结构域）、单链FvScFv、dsFv、Fd通常为VH和CHl结构域和dAb通常为VH结构域片段、微型抗体、双价抗体、三价抗体、四价抗体、κ体、线性抗体、单链抗体分子、由抗体片段形成的多特异性抗体以及保留了抗原结合功能的其他抗体片段（例如Holliger和Hudson，NatBiotechnol.2005Sep;239:1126-36。抗体片段可以通过各种不同技术制造，包括但不限于完整抗体的蛋白水解消化以及重组宿主细胞例如大肠杆菌E.coli或噬菌体）。这些技术被本领域技术人员公知并且在文献中广泛描述。[0071]抗体的木瓜蛋白酶消化产生两个相同的各具有单个抗原结合位点的被称为“Fab”片段的抗原结合片段，以及残留的“Fc”片段，后者的名称反映出它容易结晶的能力。胃蛋白酶处理产生Fab’）2片段，其具有两个抗原结合位点并且仍能交联抗原。[0072]本文中使用的“Fab”、“Fab片段”或“Fab区”意味着包含VH、CH1、VL和CL免疫球蛋白结构域的多肽。Fab可以是指分离的该区域或者在本文中所描述的多肽的背景中的该区域。[0073]Fal片段与Fab片段的差异在于在重链CHl结构域的羧基端处添加了几个残基，包括来自于抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab’）2抗体片段最初作为一对Fat产生，在它们之间具有铰链半胱氨酸。抗体片段的其他化学偶联也是已知的。[0074]本文中使用的“Fv”、“Fv区”或“Fv片段”意味着包含单个抗体的VL和VH结构域的多肽。这个片段是含有完整的抗原结合位点的最小抗体片段。在一个实施方式中，双链Fv种类由紧密、非共价结合的一个重链可变结构域和一个轻链可变结构域的二聚体构成。在单链FvscFv种类中，一个重链可变结构域和一个轻链可变结构域可以由柔性肽连接物共价连接，使得所述轻链和重链可以结合成与双链Fv种类中的结构类似的“二聚体”结构。Fv可以是指分离的该区域或者在本文中所描述的多肽的背景中的该区域。[0075]“单链Fv”或“scFv”抗体片段包含抗体的VH和VL结构域，其中这些结构域存在于单一多肽链中。对于scFv的综述，参见Pluckthun，《单克隆抗体的药理学》ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies，vol·113，Rosenburg和Moore主编，Springer-Verlag，NewYork，pp.269-3151994。[0076]本文中使用的“Fc”、“Fc片段”或“Fc区”意味着包含抗体的恒定区但排除第一恒定区免疫球蛋白结构域的多肽。因此，Fc是指IgA、IgD和IgG的最后两个恒定区免疫球蛋白结构域以及IgE和IgM的最后三个恒定区免疫球蛋白结构域，以及这些结构域N-端的柔性铰链。对于IgA和IgM来说，Fc可以包括J链。对于IgG来说，Fc包含免疫球蛋白结构域Cγ2CH2和Cy3CH3以及Cγ1与Cy2之间的铰链。尽管Fe区的边界可能变化，但人类IgG重链Fe区通常被定义为从C226、P230或A231位处的氨基酸残基延伸到羧基端，其中编号是按照EU指数。在例如抗体的生产或纯化期间或通过重组工程化改造编码抗体重链的核酸时，Fc区的C-端赖氨酸按照EU编号系统第447位的残基可以被移除。因此，完整抗体的组合物可以包含所有K447残基都被移除的抗体群体、K447残基未被移除的抗体群体和具有含和不含K447残基的抗体的混合物的抗体群体。Fc可以是指分离的该区域或者在本文中所描述的多肽的背景中的该区域。[0077]术语“双价抗体”是指具有两个抗原结合位点的抗体片段，所述片段包含在同一多肽链中与轻链可变结构域VL相连的重链可变结构域VHVH-VL。通过使用太短而不允许同一条链上的两个结构域之间配对的连接物，所述结构域被迫与另一条链的互补结构域配对，并产生两个抗原结合位点。双价抗体可以是双价或双特异性的。双价抗体被更充分描述在例如Hudson等，Nat.Med.9:129-1342003和HoIlinger等，Proc.Natl.Acad.Sci·USA90:6444-64481993中。三价抗体和四价抗体也被描述在Hudson等，Nat.Med.9:129-1342003中。[0078]在某些优选实施方式中，所述抗体是选自Fab、Fab2、Fab’）2、Fab3、Fv、单链FvScFv片段和双价抗体的抗体片段。[0079]当在本文中使用时，术语“抗体衍生物”是指本文中提供的抗体例如全长抗体或抗体片段，其中一个或多个氨基酸通过例如烷基化、PEG化、酰化、酯或酰胺形成等被化学修饰。特别是，该术语可以指称本文中提供的抗体，其被进一步修饰以含有本领域中已知的并且容易获得的其他非蛋白质组成部分。适合于抗体衍生的组成部分包括但不限于水溶性聚合物。水溶性聚合物的实例包括但不限于PEG、乙二醇丙二醇的共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖和聚乙烯醇。[0080]所述衍生物也可以是包含偶联到一种或多种异源分子或固体支持物例如琼脂糖珠等的本发明的抗Tyr〇3抗体的免疫偶联物，所述异源分子包括但不限于细胞毒性剂、可检测的组成部分例如荧光组成部分、诊断性放射性同位素或成像剂。细胞毒性剂的实例包括但不限于化疗剂或药物、生长抑制剂、毒素例如细菌、真菌、植物或动物来源的蛋白毒素、酶活性毒素或其片段或放射活性同位素。抗体与细胞毒性剂的偶联物可以使用本领域技术人员公知的各种不同的双功能蛋白质偶联剂来制造。连接物可以是促进细胞毒性药物在细胞中的释放的“可切割连接物”。例如，可以使用酸不稳定的连接物、肽酶敏感性连接物、光不稳定的连接物、二甲基连接物或含有二硫键的连接物Chari等，CancerRes.52:127-1311992〇[0081]本发明的抗体可以包含功能性Fe区、本源序列Fe区或变体Fe区。[0082]“功能性Fe区”具有本源序列Fe区的效应物功能。示例性的“效应物功能”包括Clq结合、细胞依赖性细胞毒性CDC、Fe受体结合、抗体依赖性细胞毒性ADCC、细胞吞噬作用、抗体依赖性细胞吞噬作用ADCP、细胞表面受体的下调等。这些效应物功能通常需要Fe区与结合结构域（例如抗体可变结构域组合，并且可以使用各种不同的公知测定法来评估。[0083]“本源序列Fe区”包含与自然界中存在的Fe区的氨基酸序列一致的氨基酸序列。本源序列人类Fe区包括本源序列人类IgGlFe区（非A和A同种异型）、本源序列人类IgG2Fe区、本源序列人类IgG3Fe区和本源序列人类IgG4Fe区，以及它们的天然存在的变体。[0084]“变体Fe区”包含凭借至少一个氨基酸修饰、优选为一个或多个氨基酸置换而与本源序列Fe区的氨基酸序列不同的氨基酸序列。优选地，变体Fe区与本源序列Fe区或亲本多肽的Fe区相比具有至少一个氨基酸置换，例如在本源序列Fe区或亲本多肽的Fe区中约1至约10个氨基酸置换，优选地约1至约5个氨基酸置换。本文中的变体Fe区优选地与本源序列Fe区和或亲本多肽的Fe区具有至少约80%的同源性，最优选地与它们具有至少约90%的同源性，更优选地与它们具有至少约95%的同源性。[0085]在某些实施方式中，本文中提供的抗体是多特异性抗体例如双特异性抗体。多特异性抗体是对至少两个不同位点具有结合特异性的单克隆抗体。在某些实施方式中，所述结合特异性之一是对Tyr〇3,特别是人类Tyr〇3的细胞外结构域，另一个是对任何其他抗原。在某些实施方式中，双特异性抗体可以结合到Tyro3的两个不同表位。双特异性抗体也可用于将细胞毒性剂定位到表达Tyr〇3的细胞。双特异性抗体可以作为全长抗体或抗体片段制备。[0086]用于制造多特异性抗体的技术包括但不限于具有不同特异性的两个免疫球蛋白重链-轻链对的重组共表达（参见Milstein和Cuello，Nature305:5371983，W09308829，和Traunecker等，EMBOJ·10:36551991和“knob-in-hole”工程（参见例如美国专利号5,731，168。多特异性抗体也可以通过下述方法来制造:用于制造抗体Fe-异二聚体分子的工程静电转向效应WO2009089004A1;将两个或更多个抗体或片段交联参见例如美国专利号4,676,980,和Brennan等，Science229:811985:使用亮氨酸拉链来生产双特异性抗体参见例如Kostelny等，J.Immunol.，148⑸：1547-15531992;使用“双价抗体”技术来制造双特异性抗体片段参见例如HolIinger等，Proc.NatI.Acad.Sci.USA，90:6444-64481993;使用单链FvsFv二聚体（参见例如Gruber等，J.Immunol152:53681994;以及按照例如Tutt等，J.Immunol.147:601991中所述制备三特异性抗体。具有三个或更多个功能性抗原结合位点的工程化的抗体，包括“章鱼抗体”，也被包括在本文中参见例如US20060025576A1。[0087]在优选实施方式中，所述抗体是分离的抗体。“分离的抗体”是已与其天然环境的组分分离开的抗体。具体来说，所述抗体可以被纯化到超过95%或99%的纯度，正如通过例如电泳例如SDS-PAGE、等电聚焦（IEF、毛细管电泳或层析例如离子交换或反相HPLC所确定的。对于评估抗体纯度的方法的综述，参见例如Flatman等，J·Chromatogr·B848:79-872007〇[0088]本发明的抗体可以是多克隆或单克隆抗体。优选地，所述抗体是单克隆抗体。当在本文中使用时，术语“单克隆抗体”是指从基本上均质的抗体群体获得的抗体，即构成所述群体的各个抗体除了可能少量存在的可能的天然出现的突变之外是相同的。单克隆抗体是高度特异性的，针对单个抗原性位点。此外，与通常包括针对不同决定簇表位的不同抗体的常规多克隆抗体制备物相反，每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。修饰语“单克隆”表明所述抗体的特点在于从基本上均质的抗体群体获得，并且不应被解释为需要通过任何特定方法来生产所述抗体。例如，根据本发明使用的单克隆抗体可以通过K〇hIer等，Nature256:4951975首次描述的杂交瘤方法来制造，或者可以通过重组DNA方法来制造。“单克隆抗体”也可以使用在例如Clackson等，Nature352:624-6281991和Marks等，J.Mol.Biol.222:581-5971991中描述的技术，从噬菌体抗体文库分离。[0089]本发明的抗体可以是嵌合、人源化或人类抗体。[0090]“嵌合”抗体是其中重链和或轻链的一部分与源自于特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列一致或同源，而所述链的其余部分与源自于另一个物种或属于另一个抗体类别或亚类的抗体中的相应序列一致或同源的抗体，以及这种抗体的片段，只要它们表现出所需生物活性即可Morrison等，Proc.Natl.AcadSci.USA81:6851-68551984。优选地，所述抗体的至少一部分构架是人类共有构架序列。[0091]非人类例如鼠类抗体的“人源化”形式是含有源自于非人类免疫球蛋白的极少序列的嵌合抗体。在大多数情况下，人源化抗体是人类免疫球蛋白（受体抗体），其中所述受体抗体的高变区残基被来自于非人类物种供体抗体例如小鼠、大鼠、兔或非人类灵长动物的具有所需特异性、亲和性和能力的高变区残基代替。此外，人源化抗体可以包含在受体抗体或供体抗体中不存在的残基。做出这些修饰是为了进一步改善抗体性能。一般来说，人源化抗体包含至少一个、通常两个可变结构域的基本上所有部分，其中所有或基本上所有的高变区对应于非人类免疫球蛋白的高变区，并且所有或基本上所有的FR是人类免疫球蛋白序列的FR。人源化抗体任选地还包含至少一部分免疫球蛋白恒定区Fe，通常为人类免疫球蛋白恒定区（Jones等，Nature321:522-5251986;Reichmann等，Nature332:323·3291988;以及Presta，Curr·Op·Struct·Biol·2:593-5961992。[0092]嵌合或人源化抗体可以通过本领域技术人员公知并且在文献中广泛描述的各种不同技术来制造。[0093]“人类抗体”或“完全人类抗体”是具有与人类产生的抗体相对应的氨基酸序列和或使用本文中所公开的用于制造人类抗体的任何技术制造的抗体。人类抗体的这个定义具体排除了包含非人类抗原结合残基的人源化抗体。人类抗体可以使用本领域中已知的各种不同技术来生产，包括噬菌体展示文库。Hoogenboom和Winter，J.Mol.Biol.，227:3811991;Marks等，J.Mol.Biol.,222:5811991。也可用于制备人类单克隆抗体的是在下述文献中描述的方法：Cole等，《单克隆抗体和癌症疗法》（MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy，AlanR.Liss,p.771985；Boerner^,J.Immunol·，147I:86-951991。也参见vanDijk和vandeWinkel，Curr.0pin.Pharmacol.，5:368_742001。人类抗体可以通过将抗原给药到转基因动物来制备，所述转基因动物已被修饰以对抗原性激惹做出响应而产生这些抗体，但是其内源基因座已缺陷例如免疫接种的异种小鼠）并被人类基因座代替（关于XEN0M0USETM技术，参见例如美国专利号6,075，181和6，150,584。关于通过人类B-细胞杂交瘤技术产生的人类抗体，也参见例如Li等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，103:3557-35622006〇[0094]在优选实施方式中，本发明的抗体是人类或人源化单克隆抗体，更优选为人类单克隆抗体。[0095]本发明的抗Tyro3抗体对Tyro3、特别是人类Tyro3表现出高的特异性和或选择性。[0096]当在本文中使用时，“特异性结合”或“特异性”是指抗体可检测地结合抗原例如Tyr〇3上存在的表位，同时与其他蛋白质或结构例如其他TAM受体具有相对小的可检测的反应性的能力。抗体特异性可以使用公知的方法例如在实验部分中描述的ELISA结合测定法，通过交叉反应性的测量来确定。特异性可以表现为，例如，与特异性抗原的结合相比于与其他无关分子的非特异性结合的亲和性亲和力比率为约10:1、约20:1、约50:1、约100:1、10.000:1或更大。[0097]“选择性结合”或“选择性”是指与一种或多种其他生物分子、结构、细胞、组织等相反，蛋白质与特定区域、靶或肽的偏好性结合。结合Tyr〇3的抗体可以对在特定生物体中（例如与在鼠类生物体中相反，在人类中）产生的Tyro3受体，和或对Tyro3受体的特定部分例如特定表位或抗原决定区）具有选择性。例如，选择性可以通过竞争性ELISA或Biacore测定法来确定。标志选择性的亲和性亲和力的差异可以是任何可检测的偏好性例如，如果可检测的话，超过1:1.1或超过约1:5的比率将是适合的，包括1:10、1:100、1:1000或更高）。[0098]优选地，本发明的抗Tyro3抗体特异性选择性地结合到人类Tyro3。具体来说，所述抗体不显著结合到人类Axl和Mer受体和或非灵长类哺乳动物Tyr〇3例如鼠类Tyr〇3,特别是这些受体的细胞外结构域。[00"]在某些实施方式中，所述抗Tyro3抗体不显著结合到人类Axl和Mer受体的细胞外结构域。人类Axl蛋白的序列被公开在Uniprot登记号P30530SEQIDN0:6中，并且细胞外结构域从SEQIDN0:6的第26位延伸到第451位。人类Mer蛋白的序列被公开在Uniprot登记号Q12866SEQIDNO:7中，并且细胞外结构域从SEQIDNO:7的第21位延伸到第505位。[0Ί00]在某些实施方式中，所述抗Tyro3抗体不显著结合到鼠类Tyro3的细胞外结构域。鼠类Tyr〇3蛋白的序列被公开在Uniprot登记号P55144SEQIDN0:8中，并且细胞外结构域从SEQIDNO:8的第31位延伸到第419位。[0101]在优选实施方式中，所述抗Tyro3抗体不显著结合到人类Axl和Mer受体的细胞外结构域，并且不结合到鼠类Tyro3的细胞外结构域。[0102]优选地，所述抗Tyro3抗体还结合到食蟹猴或MacacafascicularisTyro3受体的细胞外结构域。食蟹猴Tyr〇3蛋白的细胞外结构域的序列被公开在SEQIDNO:9中。在特定实施方式中，所述抗Tyro3抗体不显著结合到人类Axl和Mer受体的细胞外结构域，不结合到鼠类Tyro3的细胞外结构域，并且结合到食蟹猴Tyro3受体的细胞外结构域。[0103]在其他实施方式中，所述抗Tyro3抗体不显著结合到人类Axl和Mer受体的细胞外结构域，但结合到鼠类Tyr〇3的细胞外结构域。这种抗体可以针对在人类和鼠类Tyr〇3中同源的受体片段，例如Tyr〇3的细胞外结构域的从SEQIDNO:1的第310位延伸到第340位的部分。[0104]所述抗Tyro3抗体可能是Tyro3配体结合的竞争性抑制剂，即结合到Tyro3受体并显著减少或抑制Tyro3配体与所述受体、特别是人类Tyro3受体的细胞外结构域的结合的抗体。所述竞争性抑制剂可以以比Tyr〇3配体更大的亲和性结合到Tyr〇3。竞争测定法可以使用本领域中标准的技术例如竞争性ELISA或其他结合测定法来进行。[0105]所述Tyr〇3配体可以是GAS6蛋白或蛋白S，优选为GAS6蛋白，更优选为人类GAS6蛋白。[0106]GAS6生长停滞特异性蛋白6在结构上属于血浆维生素K依赖性蛋白家族。GAS6通过它与TAM家族的受体酪氨酸激酶Tyr〇3、AXL和MER的相互作用而具有生长因子样性质。人类GAS6是678个氨基酸的蛋白质，由介导与磷脂膜的结合的富含γ-羧基谷氨酸的结构域、四个表皮生长因子样结构域和两个层粘连蛋白G样结构域构成。人类GAS6在转录组数据库UniGene中的参考条目是Hs·646346。[0107]蛋白S是血液凝结级联中的抗凝剂。它充当活化的蛋白C一种降解因子V和因子VIII的蛋白酶）的辅因子，并因此抑制血液凝结。人类蛋白S在转录组数据库UniGene中的参考条目是Hs.64016AaM和蛋白S总体表现出44%的氨基酸序列同一性，共有相同的复杂的多结构域结构，并且是小鼠和人类基因组中编码的表现出这种结构域构造的仅有的两种蛋白质。[0108]本发明的抗Tyro3抗体可以将人类Gas6与人类Tyro3受体的结合降低或抑制至少10%，优选地约20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85至约90%基于在实验部分中所描述的竞争性ELISA，在饱和的抗体水平下阻断的配体的百分数）。具体来说，本发明的抗Tyro3抗体对人类Gas与人类Tyro3受体的结合的减少或抑制可以在约25%至约75%、优选地约50%至75%、更优选地约60%至约75%的范围内。[0109]本发明的抗Tyro3抗体可以是Tyro3受体的抑制剂诘抗剂或激动剂。[0110]在优选实施方式中，所述抗Tyro3抗体是Tyro3的抑制剂，即抑制或降低Tyro3受体的至少一种活性的抗体。[0111]“Tyro3受体活性”或“Tyro3活性”包括Tyro3的任何生物活性，例如由Tyro3配体如Gas6或蛋白S与Tyr〇3受体的结合增强或诱导的活性。特别是，已显示Tyr〇3受体参与控制细胞存活和增殖、精子发生、免疫调节和细胞吞噬作用。这种受体也被鉴定为埃博拉和马尔堡病毒的细胞侵入因子。[0112]所述抗体可以例如通过减少或阻断Tyro3配体例如Gas6与Tyro3的细胞外结构域的结合、减少或阻断Tyro3介导的信号转导和或减少或阻断Tyro3磷酸化和或减少或阻断Tyro3二聚化来抑制Tyro3活性。所述抑制活性可以通过本领域中已知的任何方法容易地测定。具体来说，这种活性可以通过结合测定法、竞争性结合测定法或磷酸化或自磷酸化测定法来测定。[0113]在某些其他实施方式中，所述抗Tyro3抗体是Tyro3的激动剂，即刺激Tyro3受体的活性的抗体。激动剂可以例如促进Tyr〇3配体与所述受体的结合，诱导或促进所述受体的二聚化和或诱导或促进Tyr〇3磷酸化和或改善Tyr〇3介导的信号转导。所述激动剂活性可以通过例如上文描述的本领域中已知的任何方法容易地测定。[0114]本发明的抗Tyr〇3抗体结合到人类Tyr〇3受体的细胞外结构域SEQIDN0:1的第41位至第429位）。所述抗体可以结合两个免疫球蛋白样结构域Ig-I和Ig-2中的一个或几个和或两个ΠI型纤连蛋白样结构域FNIII-I和FNII1-2中的一个或几个。[0115]在优选实施方式中，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-1。具体来说，这些抗体可以结合包含下述氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽：[0116]AGLKLMGAPVKLTVSQGQPVKLNCSVEGMEEPDIQffVKDGAVVQNLDQLYIPVSEQHWIGFLSLKSVERSDAGRYffCQVEDGGETEISQPVffLTSEQIDN0：2〇[0117]在某些其他实施方式中，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-1，但是不结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。优选地，所述抗体特异性或选择性地结合人类Tyr〇3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I。具体来说，这些抗体可以结合包含SEQIDNO:2的氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽，以及包含SEQIDNO:3的氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽，并且不结合或不显著结合包含SEQIDNO:4的氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽。[0118]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:11的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I，并且不显著结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0119]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0120]优选地，所述抗体包含含有SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-LUCDR-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的重链。[0121]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0122]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDEKRASGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSQERNGNYAVFGGGTKLTVLSEQIDN0:10，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0123]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGQlVPRASRTNYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRPYFQTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDN0:11。[0124]下面给出了SEQIDNO:10和11的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contac1^PIIMGT定义系统的CDR序列。[0125]表I:SEQIDNO:10和11的可变区的⑶R的序列[0127]在另一个特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:32的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:33的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I，并且不显著结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0128]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDNO:32的轻链可变区的⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDN0:33的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0129]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:32的轻链可变区的⑶R-LUCDR-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDNO:33的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的重链。[0130]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0131]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDWKRASGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSQERKGNYFVFGGGTKLTVLSEQIDN0:32，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0132]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGQINRHASNTMYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRSGGATSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDN0:33。[0133]下面给出了SEQIDN0:32和33的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contact*IMGT定义系统的CDR序列。[0134]表2:SEQIDNO:32和33的可变区的⑶R的序列[0136]在另一个特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:46的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:47的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I，并且不显著结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0137]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:46的轻链可变区的⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDN0:47的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0138]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:46的轻链可变区的⑶R-LUCDR-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDN0:47的重链可变区的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链。[0139]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0140]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDKKRVSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSLAVDGNYGVFGGGTKLTVLSEQIDN0:46，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0141]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGAISRNGSTTYYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffRSLEASDTAMYYCVRSGGLTSGGTIPEYYQHWGPGTLVPVSSVDSEQIDN0：47〇[0142]下面给出了SEQIDN0:46和47的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contact*IMGT定义系统的CDR序列。[0143]表3:SEQIDNO:46和47的可变区的⑶R的序列[0145]在另一个特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:60的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:61的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I，并且不显著结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0146]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:60的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDN0:61的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0147]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:60的轻链可变区的⑶R-LUCDR-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDN0:61的重链可变区的⑶R-H1、⑶R-H2和⑶R-H3的重链。[0148]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0149]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDSKRPSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSQNPQGNYFVFGGGTKLTVLSEQIDN0:60，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0150]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGVINKYASffTRYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRSGGLTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDN0:61。[0151]下面给出了SEQIDN0:60和61的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contac1^PIIMGT定义系统的CDR序列。[0152]表4:SEQIDNO:60和61的可变区的⑶R的序列[0153][0154]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:74的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:75的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I，并且不显著结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0155]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:74的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDN0:75的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0156]优选地，所述抗体包含含有SEQIDNO:74的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDNO:75的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的重链。[0157]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0158]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDNKRGSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSKSPEGNYMVFGGGTKLTVLSEQIDN0:74，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0159]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGEIFLPPSTTvYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRQTRLTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDN0:75。[0160]下面给出了SEQIDN0:74和75的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contac1^PIIMGT定义系统的CDR序列。[0161]表5:SEQIDNO:74和75的可变区的⑶R的序列[0162][0163]在某些实施方式中，所述抗体结合人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-I，但是不结合或不显著结合免疫球蛋白样结构域Ig-2，并且包含：[0164]轻链，其包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll，以及由或基本上由SEQIDN0:10、32、46、60或74、优选为SEQIDN0:10、32、46或60的轻链可变区的CDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L2和CDR-L3,以及[0165]重链，其包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl，以及由或基本上由SEQIDN0:11、33、47、61或75、优选为SEQIDN0:11、33、47或61的重链可变区的CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-H2和CDR-H3。[0166]在某些实施方式中，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I并且结合人类Tyr〇3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。具体来说，这种抗体可以结合：[0167]-包含SEQIDN0:2的氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽，和[0168]-包含下述氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽：[0169]AGLKLMGAPVKLTVSQGQPVKLNCSVEGMEEPDIQffVKDGAVVQNLDQLYIPVSEQHWIGFLSLKSVERSDAGRYffCQVEDGGETEISQPVWLTVEGVPFFTVEPKDLAVPPNAPFQLSCEAVGPPEPVTIVffffRGTTKIGGPAPSPSVLNVTGVTQSTMFSCEAHNLKGLASSRTATVHLQSEQIDN0:3jP[0170]-包含下述氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽：[0171]VPFFTVEPKDLAVPPNAPFQLSCEAVGPPEPVTIVffffRGTTKIGGPAPSPSVLNVTGVTQSTMFSCEAHNLKGLASSRTATVHLQALPAAPFNITVTKLSSSNASVAWMPGADGRALLQSCTVQVTQAPGGWEVLAWvPVPPFTCLLRDLVPATNYSLRVRCANALGPSPYADWVPFQTKGLASEQIDN0:4。[0172]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:88的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:89的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I和人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0173]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:88的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDN0:89的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0174]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:88的轻链可变区的⑶R-LUCDR-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDN0:89的重链可变区的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链。[0175]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0176]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDSKRSSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSANQRGNYMVFGGGTKLTVLSEQIDN0:88，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0177]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGSITRSSSRTHYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQWRSLEASDTAMYYCVRGYTHLRTWGPGTLVTVSSSEQIDN0:89。[0178]下面给出了SEQIDN0:88和89的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contac1^PIIMGT定义系统的CDR序列。[0179]表6:SEQIDNO:88和89的可变区的⑶R的序列[0180][0181]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDNO:102的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQID勵：103的重链可变区的01?-!11、001?-!12和01?-!13中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I和人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0182]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDNO:102的轻链可变区的⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:103的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0183]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:102的轻链可变区的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3的轻链和含有SEQID从:103的重链可变区的01?-!11、01?-!12和01?-!13的重链。[0184]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0185]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDAKRVSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSASANGNYRVFGGGTKLTvLSEQIDN0:102，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0186]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGRIRPLLSHTMYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffRSLEASDTAMYYCVRSWLATSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDN0：103〇[0187]下面给出了SEQID勵：102和103的可变区的符合〇1〇也丨3^匕]\1、1^匕3扒：〇1^3^和IMGT定义系统的CDR序列。[0188]表7:SEQIDNO:102和103的可变区的CDR的序列[0189][0190]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDNO:116的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQID勵：117的重链可变区的0«-!11、001?-!12和01?-!13中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I和人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0191]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDNO:116的轻链可变区的⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:117的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0192]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:116的轻链可变区的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3的轻链和含有SEQID从:117的重链可变区的01?-!11、01?-!12和01?-!13的重链。[0193]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0194]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDDKRISGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSTEINGNYAVFGGGTKLTVLSEQIDN0:116，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0195]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGRIHTYQSSTRYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffRSLEASDTAMYYCVRHHSTTTANPYSSWGPGTLVTVSSSEQIDNO：117.[0196]下面给出了SEQIDN0:116和117的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contact*IMGT定义系统的CDR序列。[0197]表8:SEQIDNO:116和117的可变区的⑶R的序列[0198][0199]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:130的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQIDNO:131的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I和人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0200]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:130的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:131的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0201]优选地，所述抗体包含含有SEQIDNO:130的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQID从:131的重链可变区的01?-!11、01?-!12和01?-!13的重链。[0202]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0203]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDKKRISGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSTSTGGNyMVFGGGTKLTVLSEQIDNO:130，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0204]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGQIRGPASATHYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffRSLEASDTAMYYCVRHQQQTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDNO：131〇[0205]下面给出了SEQIDNO:130和131的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contac1^PIIMGT定义系统的CDR序列。[0206]表9:SEQIDNO:130和131的可变区的⑶R的序列[0207][0208]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDNO:144的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQID勵：145的重链可变区的0«-!11、001?-!12和01?-!13中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I和人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0209]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDNO:144的轻链可变区的⑶R-Ll、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:145的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0210]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:144的轻链可变区的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3的轻链和含有SEQID从：145的重链可变区的01?-!11、01?-!12和01?-!13的重链。[0211]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0212]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDAKRSSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSLSDSGNYFVFGGGTKLTVLSEQIDN0:144，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0213]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGQIRGQHSSTLYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffRSLEASDTAMYYCVRHGASTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDN0：145〇[0214]下面给出了SEQIDNO:144和145的可变区的符合Chothia、AbM、Kabat、Contac1^PIIMGT定义系统的CDR序列。[0215]表10:SEQIDNO:144和145的可变区的CDR的序列[0216][0217]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:158的轻链可变区的⑶R-Ll、CDR-L2和CDR-L3以及SEQID勵：159的重链可变区的0«-!11、001?-!12和01?-!13中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-I和人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。[0218]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:158的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:159的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0219]优选地，所述抗体包含含有SEQIDN0:158的轻链可变区的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3的轻链和含有SEQID从：159的重链可变区的01?-!11、01?-!12和01?-!13的重链。[0220]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0221]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDHKRASGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSISPAGNYGVFGGGTKLTVLSEQIDN0:158，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0222]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGRISRHGSQTYYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffRSLEASDTAMYYCVRAGGQTSGGTIPEYYQHWGPGTLVTVSSSEQIDNO：159〇[0223]下面给出了SEQID勵：158和159的可变区的符合〇1〇也丨3、六匕]«、1^匕3扒：〇1^3^和IMGT定义系统的CDR序列。[0224]表11:SEQIDNO:158和159的可变区的CDR的序列[0225][0226]在某些实施方式中，所述抗体结合人类Tyr〇3的免疫球蛋白样结构域Ig-I和免疫球蛋白样结构域Ig-2，并且包含：[0227]轻链，其包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll，以及由或基本上由SEQIDN0:88、102、116、130、144或158、优选为SEQIDN0:102、116、130、144或158的轻链可变区的CDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L2和CDR-L3，以及[0228]重链，其包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl，以及由或基本上由SEQIDN0:89、103、117、131、145或159、优选为SEQIDN0:103、117、131、145或159的重链可变区的01?-!12和01?-!13构成的01?-!12和01?-!13。[0229]在其他实施方式中，所述抗体结合人类Tyr〇3受体的纤连蛋白III结构域FNIII-I。具体来说，这些抗体可以结合：[0230]-包含SEQIDN0:4的氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽，和[0231]-包含下述氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽：[0232]AAPFNITVTKLSSSNASVAWMPGADGRALLQSCTVQVTQAPGGWEVLAVVVPVPPFTCLLRDLVPATNYSLRVRCANALGPSPYADffVPFQTKGLAPASAPQNLHAIRTDSGLILEWEEVIPEAPLEGPLGPYKLSWVQDNGTQDELTVEGTRANLTGWDPQKDLIVRVCVSNAVGCGPWSQPLVVSSHDRSEQIDNO：5,[0233]并且不结合包含SEQIDN0:2或3的氨基酸序列、基本上由所述序列构成或由所述序列构成的多肽。[0234]在特定实施方式中，所述抗体包含选自SEQIDN0:172的轻链可变区的⑶R-L1、CDR-L2和CDR-L3以及SEQID勵：173的重链可变区的0«-!11、001?-!12和01?-!13中的一个、两个、三个、四个、五个或六个、优选地六个CDR。优选地，所述抗体结合人类Tyro3受体的纤连蛋白III结构域FNIII-I。[0235]具体来说，所述抗体可以包含含有选自SEQIDN0:172的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的轻链，和或含有选自SEQIDNO:173的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的一个、两个或三个、优选地三个⑶R的重链。[0236]优选地，所述抗体包含含有SEQIDNO:172的轻链可变区的⑶R-L1、⑶R-L2和⑶R-L3的轻链和含有SEQIDNO:173的重链可变区的⑶R-Hl、⑶R-H2和⑶R-H3的重链。[0237]在更特定实施方式中，所述抗体包含由下述氨基酸构成或基本上由其构成的轻链可变区：[0238]SYELTQPPSVSVSPGQTARITCSGDALPKKYAYWYQQKSGQAPVLVIYEDTKRHSGIPERFSGSSSGTMATLTISGAQVEDEADYYCYSAEHRGNYAVFGGGTKLTVLSEQIDN0:172，和由下述氨基酸构成或基本上由其构成的重链可变区：[0239]EVQLVQSGADVKKPGASLTISCQASGYTFTDYffISffVRQKPGKGLEffMGHINPMRSTTTYGPSFQGHVTISADRSTATAYLQffHSLEASDTAMYYCVRNDNHDDYTYTDDWGPGTLVTVSSSEQIDNO：173〇[0240]下面给出了SEQID勵：172和173的可变区的符合〇1〇也丨3^匕]\1、1^匕3扒：〇1^3^和IMGT定义系统的CDR序列。[0241]表12:SEQIDNO:172和173的可变区的CDR的序列[0242][0243]在优选实施方式中，所述抗体包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll和或包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的CDR-Hl。优选地，所述抗体包含由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-L1构成的⑶R-L1并包含由SEQIDNO:11的重链可变区的CDR-Hl构成的CDR-Hl。[0244]在更特定的优选实施方式中，所述抗体包含一个、两个、三个、四个、五个或六个，优选地六个符合Kabat定义的下述⑶R:[0245]-由氨基酸共有序列SGDALPKKYAYSEQIDN0:12构成或基本上由所述序列构成的CDR-Ll;[0246]-由氨基酸共有序列EDX1RX2SEQIDNO:186构成或基本上由所述序列构成的CDR-L2,其中X1是E、W、K、S、N、A、D、H或T，优选为E、W、K、S、N、A、D或H，并且X2是A、V、P、G、S、V、1^、1或!1，优选为厶、¥、？、6、3、¥、1^或1;[0247]-由氨基酸共有序列YSX1X2X3X4GNYX5VSEQIDNO:187构成或基本上由所述序列构成的CDR-L3,其中父1是〇丄、1^、1'、1^或I，X2是E、A、N或S，X3是R、V、P、Q、A、I、T、D或H，优选为尺、¥、卩、〇、厶、1、1'或0，父4是11、0、〇^、1?、6、3或厶，并且父5是厶、卩、6、]\1或1?;[0248]-由氨基酸共有序列DYWISSEQIDNO:21构成或基本上由所述序列构成的⑶R-Hl;[0249]-由氨基酸共有序列XJXsXsXaXsSXsTXTYGPSFQGCSEQIDN0:188构成或基本上由所述序列构成的CDR-H2,其中或H，优选为Q、A、V、E、S或R，X2是V、N、S、F、T、R或H，X3是P、R、K、L、T或G，X4是R、H、N、Y、P、S、L、Q或M，优选为R、H、N、Y、P、S、L或Q，X5是A、G、P、S、L、Q、H或R，优选为A、G、P、S、L、Q或H，X6是R、N、T、W、H、S、A或Q，并且X7是N、M、Y、R、V、H、L或T，优选为N、M、Y、R、V、H或L;和或[0250]-由氨基酸共有序列X1X2X3X4TSGGTIPEYYQiKSEQIDNO:189构成或基本上由所述序列构成的CDR-H3,其中乂1是？、3、〇、!1或A，X2是Y、G、T、W或Q，X3是F、G、R、L、Q或A，并且X4是Q、A、L或S，或由下述氨基酸序列之一构成或基本上由所述序列构成的⑶R-H3:GYTHLRTSEQIDN0:99，HHSTTTANPYSSSEQIDN0:127或NDNHDDYTYTDDSEQIDN0:183，优选为由如上所定义的氨基酸共有序列XlX2X3X4TSGGTIPEYYQHSEQIDN0:189构成或基本上由所述序列构成的CDR-H3。[0251]本发明的抗体可以包含任何适合的构架可变结构域序列，只要基本上保留与Tyro3的结合活性即可。在特定实施方式中，所述抗体的可变结构域构架如SEQIDNO:10和11中由分隔CDR的区域所定义FR1、CDRl、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。[0252]在优选实施方式中，所述抗体是全长IgG抗体，S卩IgGl、IgG2、IgG3或IgG4，优选为IgGl抗体。所述抗体可以包含如上所述的轻链和重链的任何可变区以及人类IgG链、优选为IgG1链和人类λ或κ链、优选为λ链的恒定区。人类IgG1链的恒定区的示例性序列如SEQIDNO:190中所述。人类λ链的恒定区的示例性序列如SEQIDNO:191中所述。[0253]在优选实施方式中，所述抗体以高亲和性结合人类Tyr〇3受体。“结合亲和性”通常是指分子例如抗体）的单个结合位点与其结合配偶体例如抗原之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另有指明，否则当在本文中使用时，“结合亲和性”是指反映出结合对的成员（例如抗体和抗原之间的1:1相互作用的固有结合亲和性。分子X对其配偶体Y的亲和性通常可以由解离常数Kd表示。亲和性可以通过本领域中已知的常用方法包括本文中描述的方法来测量。低亲和性抗体通常缓慢地结合抗原并倾向于容易解离，而高亲和性抗体通常更快地结合抗原并倾向于更长时间保持结合。各种不同的测量结合亲和性的方法在本领域中是已知的，其中的任一种都可用于本发明的目的。[0254]在某些实施方式中，本文中提供的抗体具有HT5M或更低的解离常数Kd，优选为9、8、7、6、5、4、3、2或1.10_6M或更低的KcU更优选为9、8、7、6、5、4、3、2或1.10_7M或更低的KcU甚至更优选为9、8、7、6、5、4、3、2或I.HT8M或更低的KcL在最优选的实施方式中，本文中提供的抗体具有9、8、7、6、5、4、3、2或1.10^1或更低的解离常数。[0255]在特定实施方式中，本发明的抗体具有3.IxHT7M或更低的解离常数Kd，并且优选地选自具有表13和14中所描述的ScFv2410、2412、2413、2414、2415、2710、2711或2713的重链和轻链的可变结构域或CDR序列的抗体。在另一个实施方式中，本发明的抗体具有1.4xlT7M或更低的解离常数Kd，并且优选地选自具有表13和14中所描述的ScFv2410、2412、2413、2415、2710或2713的重链和轻链的可变结构域或⑶R序列的抗体。在另一个实施方式中，本发明的抗体具有7.4χ10_8Μ或更低的解离常数Kd，并且优选地选自具有表13和14中所描述的ScFv2410、2415、2710或2713的重链和轻链的可变结构域或⑶R序列的抗体。在另一个实施方式中，本发明的抗体具有4xlT8M或更低的解离常数Kd，并且优选为具有表13和14中所描述的ScFv2713的重链和轻链的可变结构域或CDR序列的抗体。[0256]Kd可以使用本领域技术人员已知的任何技术来测量。具体来说，为了测量抗Tyr〇3抗体与人类Tyro3ECDSEQIDNO:1的第40-429位之间的结合亲和性，可以使用BiacoreT100GEHealthcare，Uppsala，Sweden，在包被有affibody®AFFIBODYAB参考目录10.0623.02.0005的SeriesSCM5传感器芯片上进行表面等离子体共振SPR测量。使用15s至55s的进样时间，可以实现具有100RU左右的最大响应的IgG捕获。对于动力学测量来说，可以将0.15至ΙΟμΜ的人类Tyro3ECD溶液在25°C下，以30μ1πΰη的流速注入到PBS-P缓冲液中。平衡解离常数KD可以使用异源配体模型和1:1模型来计算BIAcore评估软件3.2版）。平衡解离常数Kd被计算为比率koffkon。参见例如Chen等，11〇1.8丨〇1.293:865-8811999Hkoff或Kdis和kon常数也可以通过在下面的实验部分中所描述的生物膜层干涉测量法BLI来测量参考实施例5。[0257]在某些特定实施方式中，本发明的抗体具有IxlO4M4iT1或更高、优选为2、3、4、5、6、7、8、办10^1或更高的1«11常数。更优选地，本发明的抗体具有10^1或更高、优选为1.2xl05M_1s_1或更高的kon常数，并且优选地选自具有表13和14中所描述的ScFv2410或2713的重链和轻链的可变结构域或CDR序列的抗体。[0258]在某些特定实施方式中，本发明的抗体具有IxHr2iT1或更低、优选为9、8、7、6、5、^HT3iT1或更低的koff常数。更优选地，本发明的抗体具有SxHr3iT1或更低的koff常数，并且优选为具有表13和14中所描述的ScFv2710的重链和轻链的可变结构域或CDR序列的抗体。[0259]在某些实施方式中，本发明提供了一种人类或人源化抗体，其与如上所示的抗体，更具体来说与选自表13中描述的抗体即抗体2410、2414、2709、2710、2717、2411、2412、2413、2415、2711、2713和2718的抗体竞争与人类了7仰3的结合。如果抗体实质上结合到相同表位，则它与另一种抗体竞争。基于ELISA、放射免疫测定法、western印迹分析或使用BIAC0RE分析的流程适合用于简单的竞争试验。在简单的竞争测定法中，表面优选为BIAC0RE芯片或与表面等离子体共振分析相容的另一种支持物）。将对照抗体例如表13中描述的抗体之一在饱和的抗原浓度下与表面相接触，并测量所述对照抗体与携带抗原的所述表面的结合。将所述对照抗体的结合与在存在候选抗体的情况下所述对照抗体与携带抗原的所述表面的结合进行比较。在测定试验中，在存在候选抗体的情况下所述对照抗体的结合的显著降低，指示了所述候选抗体与所述对照抗体本质上识别相同的表位，并因此与该抗体竞争。将所述对照抗体的结合降低至少约30、40或50%、优选地至少约60、70%或更多的任何候选抗体，可以被认为是与所述对照抗体竞争的抗体。应该理解，所述对照和候选抗体之间的顺序可以颠倒，也就是说，可以首先将所述对照抗体结合到表面，并随后在竞争试验中将所述候选抗体与所述表面相接触。[0260]在某些实施方式中，本发明的抗体被改变以提高或降低所述抗体被糖基化的程度。向抗体添加或缺失糖基化位点，可以通过改变氨基酸序列以便产生或移除一个或多个糖基化位点来方便地实现。[0261]当所述抗体包含Fc区时，可以改变附连到它的糖类。由哺乳动物细胞产生的本源抗体通常包含支链的双分支寡糖，其通常通过N-连键附连到Fc区的CH2结构域的Asn297参见例如Wright等，TIBTECH，1997，15:26-32。所述寡糖可以包括各种不同的糖类，例如甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺GlcNAc、半乳糖和唾液酸，以及附连到双分支寡糖结构的“主干”中的GlcNAc的岩藻糖。在某些实施方式中，可以对本发明的抗体中的寡糖做出修饰，以便产生具有某些改良性质的抗体变体。[0262]在一个实施方式中，提供了具有缺少附连到直接或间接Fc区的岩藻糖的糖类结构的抗体变体。例如，这种抗体中岩藻糖的量可以为1%至80%、1%至65%、5%至65%或20%至40%。所述岩藻糖的量通过计算经MALDI-T0F质谱术测量的所述糖链内Asn297处的岩藻糖相对于附连到Asn297的所有糖结构例如复合的、混杂的和高甘露糖的结构）的总和的平均量来确定。Asn297是指位于Fc区中的第297位Fe区残基的Eu编号）附近的天冬酰胺残基;然而，由于抗体中的少量序列变异，Asn297也可能位于第297位的上游或下游±3个氨基酸附近，即第294位至第300位之间。与“脱岩藻糖化”或“岩藻糖缺陷的”抗体变体相关的出版物的实例包括但不限于Okazaki等，J-Mol.Biol.336:1239-12492004*Yamane-OhnukiN，SatohM.mAbs.2009;1:230-236。能够生产脱岩藻糖化抗体的细胞系的实例包括蛋白质岩藻糖化缺陷的Led3CHO细胞Ripka等，Arch·Biochem.Biophys·249:533-5451986和敲除细胞系，例如α-l，6-岩藻糖基转移酶基因FUT8敲除的CHO细胞（参见例如Yamane-Ohnuki等，Biotech.Bioeng.87:6142004;Kanda，Y.等，Biotechnol.Bioeng.，94⑷：680-6882006。[0263]在某些实施方式中，产生其中抗体的一个或多个残基被半胱氨酸残基置换的半胱氨酸工程化的抗体例如“thioMAb”，可能是合乎需要的。在特定实施方式中，被置换的残基出现在抗体的可接近位点处。通过用半胱氨酸置换那些残基，反应性巯基因此被置于所述抗体的可接近位点处，并且可用于将所述抗体偶联到其他组成部分例如药物组成部分或连接物-药物组成部分，以产生本文中进一步描述的免疫偶联物。在某些实施方式中，可以用半胱氨酸置换下述任何一个或多个残基：轻链的V205Kabat编号），重链的A118EU编号），和重链Fc区的S400EU编号）。半胱氨酸工程化的抗体可以按照例如美国专利号7,521，541中所述来产生。[0264]核酸、载体、宿主细胞和重组生产[0265]另一方面，本发明涉及编码如上所述的本发明的抗体的核酸或与所述编码序列互补的核酸。优选地，所述核酸是分离或纯化的核酸。[0266]所述核酸可以是DNAcDNA或gDNA、RNA或两者的混合物。它可以是单链形式或双链体形式或这两者的混合物。它可以包含修饰的核苷酸，其包含例如修饰的键、修饰的嘌呤或嘧啶碱基或修饰的糖。它可以通过本领域技术人员已知的任何方法来制备，包括化学合成、重组和诱变。本发明的核酸可以从本发明的抗体的序列推导出，并且可以根据所述核酸将在其中转录的宿主细胞改编密码子用法。这些步骤可以按照本领域技术人员公知的方法来进行，一些所述方法被描述在参考手册Sambrook等（SambrookJ，RussellD2001，《分子克隆实验指南》（Molecularcloning:alaboratorymanual，第三版，ColdSpringHarbor中。[0267]本发明的核酸可以编码构成所述抗体的轻链的氨基酸序列和或构成所述抗体的重链的氨基酸序列，或者可以与这些编码序列互补。[0268]本发明还提供了包含本发明的核酸的载体。任选地，所述载体可以包含几个本发明的核酸。特别是，所述载体可以包含可操作地连接到调控区、即包含一个或多个控制序列的区域的本发明的核酸。任选地，所述载体可以包含可操作地连接到几个调控区的几个本发明的核酸。[0269]术语“控制序列”意味着编码区的表达所必需的核酸序列。控制序列可以是内源或异源的。公知的且当前被本领域技术人员使用的控制序列将是优选的。这些控制序列包括但不限于启动子、信号肽序列和转录终止子。[0270]术语“可操作地连接”意味着其中将控制序列相对于编码序列置于适合位置处，使得所述控制序列指导所述编码序列的表达的构造。[0271]本发明还涉及使用本发明的核酸或载体在转化、转染或转导宿主细胞中的用途。[0272]本发明还提供了包含一个或几个本发明的核酸和或一个或几个本发明的载体的宿主细胞。[0273]术语“宿主细胞”也涵盖由于复制期间发生突变而造成的与亲本宿主细胞不一致的任何亲本宿主细胞后代。[0274]适合用于编码抗体的载体的克隆或表达的宿主细胞包括本文中所描述的原核或真核细胞。[0275]例如，抗体可以在细菌中生产，特别是当糖基化和Fc效应物功能不需要时。对于在细菌中表达抗体片段和多肽来说，参见例如美国专利号5,648,237、5,789,199和5,840，523。（也参见Charlton，《分子生物学方法》（MethodsinMolecularBiology，Vol.248B·K·C·Lo主编，HumanaPress，Totowa，NJ，2003，pp·245-254，其描述了抗体片段在大肠杆菌中的表达）。在表达后，所述抗体可以以可溶级分从细菌细胞裂解物分离，并且可以被进一步纯化。[0276]除了原核生物之外，真核微生物例如丝状真菌或酵母是适用于编码抗体的载体的克隆或表达宿主，包括其糖基化途径已被“人源化”的真菌和酵母菌株，导致生产具有部分或完全人类糖基化模式的抗体。参见Gerngross，Nat·Biotech·22:1409-14142004，以及1^等，恥181〇七6*.24:210-2152006。[0277]适用于糖基化抗体的表达的宿主细胞也源自于多细胞生物体无脊椎动物和脊椎动物）。无脊椎动物细胞的实例包括植物和昆虫细胞。已鉴定到大量杆状病毒株可以与昆虫细胞联合使用，特别是用于草地贪夜蛾细胞的转染。植物细胞培养物也可用作宿主。参见例如美国专利号5,959，177、6,040,498、6,420,548、7，125,978和6,417,429。[0278]脊椎动物细胞也可用作宿主。例如，适应于悬浮生长的哺乳动物细胞系可能是有用的。有用的哺乳动物宿主细胞系的其他实例是用SV40转化的猴肾CVl细胞系C0S-7，人类胚胎肾细胞系（293或例如在Graham等，J.GenVirol.36:591977中所描述的293细胞），幼仓鼠肾细胞BHK，小鼠Sertoli细胞例如在Mather，Biol.Reprod.23:243-2511980中所描述的TM4细胞），猴肾细胞CVl，非洲绿猴肾细胞VER0-76，人类宫颈癌细胞HELA，犬肾细胞MDCK，布法罗大鼠肝细胞BRL3A，人类肺细胞W138，人类肝细胞HepG2，小鼠乳腺肿瘤MMT060562，例如在Mather等，AnnalsN.Y.Acad.Sci.383:44-681982中所描述的TRI细胞，MRC5细胞和FS4细胞。其他有用的哺乳动物宿主细胞系包括中华仓鼠卵巢（CHO细胞，包括DHFR-CHO细胞UrIaub等，Proc·Nat1·Acad·Sci·USA77:42161980，以及骨髓瘤细胞系例如Y〇、NSO和Sp20。对于适用于抗体生产的某些哺乳动物宿主细胞系的综述，参见例如Yazaki和Wu，《分子生物学方法》（MethodsinMolecularBiology，Vol·248Β·Κ·C.Lo主编，HumanaPress，Totowa，NJ，pp·255-2682003〇[0279]本发明还涉及用于生产本发明的抗体的方法，所述方法包括将包含如上所提供的本发明的核酸或本发明的载体的宿主细胞在适合于所述抗体表达的条件下进行培养，以及任选地从所述宿主细胞或所述宿主细胞培养基回收所述抗体。任选地，回收的抗体可以被进一步纯化或分离。适合的培养基、培养条件和生产方法是本领域技术人员公知的，并且可以根据宿主细胞和待生产的抗体容易地选择。[0280]药物组合物[0281]本发明还涉及包含本发明的抗体、核酸、载体或宿主细胞的药物组合物。所述组合物可以包含一种或几种本发明的抗体、一种或几种本发明的核酸和或一种或几种本发明的载体和或一种或几种本发明的宿主细胞。优选地，所述药物组合物包含一种或几种本发明的抗体。[0282]包含本发明的抗体的药物组合物可以按照用于制备制药学有用的组合物的已知方法来配制，由此将具有所需纯度水平的抗体与任选的生理上可接受的载体、赋形剂或稳定剂（《雷明顿：药学科学与实践》（Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy，第20版，（2000，以水性溶液、冻干制剂或其他干燥制剂的形式混合。[0283]当在本文中使用时，术语“药物制剂”或“药物组合物”是指这样一种制备物，其为允许活性成分的生物学活性有效的形式，并且不含对所述制剂将要给药的对象具有不可接受的毒性的其他组分。优选地，这些制剂是经过灭菌的，即无菌的或不含所有活的微生物和它们的孢子。[0284]可接受的载体、赋形剂或稳定剂在所使用的剂量和浓度下对接受者无毒性，并且包括但不限于缓冲剂、稳定剂、防腐剂、等渗剂、非离子型去污剂、抗氧化剂和其他混杂的添加剂。[0285]缓冲剂有助于将pH维持在近似生理条件的范围内。它们优选地以约ImM至约50mM范围内的浓度存在。适合与本发明一起使用的缓冲剂包括但不限于有机和无机酸两者及其盐，例如柠檬酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、延胡索酸盐、葡萄糖酸盐、草酸盐、乳酸盐和乙酸盐缓冲剂，以及磷酸盐缓冲剂、组氨酸缓冲剂和三甲基胺盐例如Tris。[0286]可以添加防腐剂以延滞微生物生长，并且其可以以0.2%_1%wv范围内的量添加。适合与本发明一起使用的防腐剂包括但不限于苯酚、丁醇或苯甲醇、间甲酚、对羟基苯甲酸烷基酯例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯、十八烷基二甲基苯甲基氯化铵、苄烷铵的卤化物例如氯化物、溴化物、碘化物）、氯化六甲铵或苄索氯铵、邻苯二酚、间苯二酚、环己醇和3-戊醇。[0287]可以添加等渗剂以确保本发明的液体组合物的等渗性，其包括多元糖醇、优选为三元或更多元糖醇，例如甘油、赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨糖醇和甘露糖醇。[0288]稳定剂是指类别广泛的赋形剂，其功能范围可以从增量剂到溶解治疗剂或有助于防止变性或粘附到容器壁的添加剂。典型的稳定剂可以是多元糖醇上文列举的），氨基酸例如精氨酸、赖氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、丙氨酸、鸟氨酸、L-亮氨酸、2-苯丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸等，有机糖或糖醇例如乳糖、海藻糖、水苏糖、甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、核糖醇、肌醇myoinisitol、半乳糖醇、甘油等，包括环多醇例如肌醇，聚乙二醇，氨基酸聚合物，含硫还原剂例如脲、谷胱甘肽、硫辛酸、硫代乙醇酸钠、硫代甘油、α-单硫代甘油和硫代硫酸钠，低分子量多肽（即10个残基），蛋白质例如人血清白蛋白、牛血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白，亲水性聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮，单糖例如木糖、甘露糖、果糖、葡萄糖，二糖例如乳糖、麦芽糖、蔗糖和三糖例如棉子糖，多糖例如葡聚糖。稳定剂可以以每份重量的治疗剂0.1至1〇,〇〇〇重量的范围存在。[0289]可以添加非离子型表面活性剂或去污剂也被称为“润湿剂”）以帮助溶解所述治疗剂并针对搅拌诱导的聚集保护所述治疗性蛋白质。适合的非离子型表面活性剂包括但不限于聚山梨酸酯（20、80等）、泊洛沙姆（184、188等）、PLUR0NICS™、多元醇、聚氧乙烯失水山梨糖醇单醚（TWEEN™-20、TWEEN™-80等）。非离子型表面活性剂可以以约0.05mgml至约I.Omgml、优选地约0.07mgml至约0.2mgml的范围存在。[0290]其他混杂的赋形剂包括但不限于增量剂例如淀粉）、螯合剂例如EDTA、抗氧化剂例如抗坏血酸、甲硫氨酸、维生素E和共溶剂。[0291]所述活性成分也可以被包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊例如分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚甲基丙烯酸甲酯微胶囊）中，在胶体药物递送系统（例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子和纳米胶囊）中或在粗乳液中。这些技术被公开在《雷明顿：药学科学与实践》（Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy，第20版，（2000中。[0292]所述药物组合物的形式、给药途径、剂量和方案取决于待治疗的病症、疾病的严重性、患者的年龄、体重和性别等。[0293]用于所述给药的剂量可以随着各种不同参数，特别是随着所使用的给药方式、相关的病理或所需的治疗持续时间而改变。[0294]本发明的药物组合物可以被配制成用于表面、口服、肠胃外、鼻内、静脉内、肌内、皮下或眼内给药等。[0295]优选地，所述药物制剂是能够被注射的制剂。具体来说，它们可以是等渗无菌的盐水溶液磷酸二氢钠或磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙或氯化镁等，或这些盐的混合物），或干燥、特别是冷冻干燥的组合物，其在根据情况添加无菌水或生理盐水后，允许构造可注射溶液。[0296]无菌可注射溶液可以如下制备：将所述活性化合物以所需量并入到适合的溶剂中，所述溶剂在需要时含有上文列举的各种不同的其他成分，然后进行过滤除菌。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉剂的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，其从之前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何其他所需成分的粉剂。[0297]除了被配制用于肠胃外给药例如静脉内或肌内注射的组合物之外，其他可药用形式包括例如用于口服给药的片剂或其他固体、延时释放胶囊和目前使用的任何其他形式。[0298]本发明的药物组合物可以包含一种或几种本发明的抗体。[0299]所述药物组合物还可以包含一种或几种其他活性化合物。其他活性化合物的实例包括但不限于化疗药物、抗生素、抗寄生虫剂、抗真菌剂或抗病毒剂。[0300]化疗药物的实例包括但不限于他莫昔芬、芳香化酶抑制剂、曲妥珠单抗、GnRH类似物、吉西他滨、多西他赛、紫杉醇、丝裂霉素、顺铂、卡铂、奥沙利铂、多柔比星、道诺霉素、多西他赛、环磷酰胺、表柔比星、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、长春瑞滨、博来霉素、磷酸雌二醇氮芥或磷酸依托泊苷。[0301]抗生素的实例包括但不限于阿莫西林、克拉霉素、头孢呋辛、头孢氨苄、环丙沙星、强力霉素、甲硝哒唑、特比萘芬、左氧氟沙星、呋喃妥因、四环素和阿奇霉素。[0302]抗真菌剂的实例包括但不限于克霉唑、布替萘芬、布康唑、环吡酮胺、氯碘羟喹、氯碘羟喹、克霉唑、益康唑、氟康唑、氟胞嘧啶、灰黄霉素、齒丙炔氧苯、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、萘替芬、制霉菌素、奥昔康唑、硫康唑、特比萘芬、特康唑、噻康唑和托萘酯。[0303]抗病毒剂的实例包括但不限于齐多夫定、地达诺新、扎西他滨、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、替诺福韦、奈韦拉平、地拉夫定、依法韦仑、沙奎那韦、利托那韦、茚地那韦、奈非那韦、沙奎那韦、安普那韦和洛匹那韦。[0304]在特定障碍或病症的治疗中有效的本发明的抗体的量取决于所述障碍或病症的本质，并且可以通过标准的临床技术来确定。[0305]在优选实施方式中，每一剂可以在每千克体重约0.Img至约25mg抗体，或者更优选地每千克体重约Img至约IOmg抗体的范围内。[0306]取决于多种临床因素，包括疾病的类型、疾病的严重性和对象对治疗剂的敏感性，用于给药的用药方案可以从每月一次变化到每日一次。[0307]治疗和诊断应用[0308]本发明还涉及本发明的抗体或本发明的药物组合物，其用于预防或治疗过度增殖性疾病或传染性疾病。[0309]本发明涉及本发明的抗体或本发明的药物组合物作为用于治疗疾病的药物的用途。本发明还涉及本发明的抗体用于制造或制备药物的用途。[0310]具体来说，本发明涉及一种在对象中治疗过度增殖性疾病的方法，所述方法包括向患有过度增殖性疾病的对象给药有效量的本发明的抗体或组合物。[0311]当在本文中使用时，术语“对象”或“患者”是指哺乳动物，优选为人类。[0312]所述有效量可以是治疗或预防上有效的量。“治疗有效量”是指在剂量上并且对于必需的时间长度来说有效地实现所需治疗或预防结果的量。本发明的抗体或组合物的治疗有效量可以根据多种因素而变，例如疾病状态、个体的年龄、性别和体重，以及所述抗体或组合物在所述个体中引发所需应答的能力。治疗有效量涵盖其中治疗有益的效果远超过所述抗体或组合物的任何有毒或不利效果的量。“预防有效量”是指在剂量上并且对于必需的时间长度来说有效地实现所需预防结果的量。通常但不是必需地，由于预防药剂在疾病之前或疾病的早期阶段用于对象中，因此预防有效量将小于治疗有效量。[0313]术语“过度增殖性疾病”是指与某种程度的异常细胞增殖相关的障碍。在一个实施方式中，所述过度增殖性疾病是癌症。[0314]术语“癌症”指称或描述哺乳动物中通常以不受调控的细胞生长增殖为特征的生理状况。癌症的实例包括但不限于上皮癌、淋巴瘤例如霍奇金和非霍奇金淋巴瘤）、母细胞瘤、肉瘤和白血病。这些癌症的更具体的实例包括但不限于鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺的腺癌、肺的鳞状细胞癌、腹膜的癌症、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、神经胶质瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞瘤、骨肉瘤、黑素瘤、乳腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、肝癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、白血病和其他淋巴增生性障碍，以及各种不同类型的头颈部癌。在优选实施方式中，所述癌症选自膀胱肿瘤、弥散性大B-细胞淋巴瘤、唾液腺的腺样囊性癌、伯基特淋巴瘤、多发性骨髓瘤、胰腺导管腺癌、毛细胞白血病、转移性前列腺癌、黑素瘤、结肠直肠癌。[0315]本发明还涉及一种治疗患有传染性疾病的对象的方法，所述方法包括向所述对象给药有效量的所述抗体或组合物。[0316]所述对象可以由病原体引起，所述病原体可以是例如病毒、细菌、真菌或寄生虫。[0317]可以使用本文中提供的方法治疗的传染性细菌的实例但不限于任何类型的革兰氏阳性细菌（例如链球菌（Streptococcus、葡萄球菌（Staphylococcus、棒杆菌Corynebacterium、李斯特菌Listeria、芽抱杆菌Bacillus和梭菌Clostridium或革兰氏阴性细菌（例如沙门氏菌（SalmoneIla、志贺氏菌（ShigeIla、肠杆菌科Enterobacteriaceae、假单胞菌Pseudomonas、莫拉克斯氏菌Moraxella、螺旋杆菌Helicobacter、寡养单胞菌（Stenotrophomonas、輕弧菌Bdellovibrio、乙酸细菌、甲型变形菌纲（alpha-proteobacteria、大肠杆菌Escherichiacoli、淋病奈瑟氏菌Neisseriagonorrhoeae、脑膜炎奈瑟氏菌Neisseriameningitidis、卡他莫拉克斯氏菌Moraxellacatarrhalis、流感嗜血杆菌Hemophilusinfluenzae、肺炎克雷伯氏菌Klebsiellapneumoniae、嗜肺军团菌（Legionellapneumophila、铜绿假单胞菌Pseudomonasaeruginosa、奇异变形杆菌（Proteusmirabilis、阴沟肠杆菌Enterobactercloacae和粘质沙雷氏菌（Serratiamarcescens。不例性的传染性细菌包括但不限于：幽门螺旋杆菌（Helicobacterpyloris，伯氏疏螺旋体（Boreliaburgdorferi，嗜肺军团菌Legionellapneumophilia，分枝杆菌物种Mycobacteriasps例如结核分枝杆菌（M.tuberculosis、鸟分枝杆菌（M.avium、胞内分枝杆菌M·intraceIlulare、M·kansaii、M·gordonae，金黄色葡萄球菌（StaphyIococcusaureus，淋病奈瑟氏菌（Neisseriagonorrhoeae，脑膜炎奈瑟氏菌（Neisseriameningitidis，单核细胞增多性李斯特菌（Listeriamonocytogenes，酿脓链球菌Streptococcuspyogenes甲类链球菌），无乳链球菌（Streptococcusagalactiae乙类链球菌），链球菌（Streptococcus草绿色链球菌类），类链球菌（Streptococcusfaecalis，牛链球菌（Streptococcusbovis，链球菌（Streptococcus厌氧物种），肺炎链球菌（Streptococcuspneumoniae，致病性弯曲杆菌物种Campylobactersp.，肠球菌物种（Enterococcussp.，流感嗜血杆菌（Haemophilusinfluenzae，炭疽芽抱杆菌Bacillusanthracis，白喉棒杆菌（corynebacteriumdiphtheriae，棒杆菌物种corynebacteriumsp.，猪红斑丹毒丝菌Erysipelothrixrhusiopathiae，产气荚膜梭菌（Clostridiumperfringers，破伤风梭菌（Clostridiumtetani，产气肠杆菌Enterobacteraerogenes，肺炎克雷伯氏菌Klebsiellapneumoniae，多杀巴氏杆菌Pasturellamultocida，拟杆菌属物种Bacteroidessp.，具核梭杆菌Fusobacteriumnucleatum，念珠状链杆菌（Streptobacillusmoniliformis，苍白密螺旋体（Treponemapallidium，细弱密螺旋体（Treponemapertenue，钩端螺旋体（Leptospira和衣氏放线菌Actinomycesisraelii〇[0318]可以使用本文中提供的方法治疗的传染性真菌的实例包括但不限于新型隐球菌Cryptococcusneoformans、荚膜组织胞楽菌（Histoplasmacapsulatum、粗球抱子菌Coccidioidesimmitis、皮炎芽生菌（Blastomycesdermatitidis、沙眼衣原体Chlamydiatrachomatis和白假丝酵母（Candidaalbicans。[0319]可以使用本文中提供的方法治疗的传染性寄生虫的实例包括但不限于恶性疟原虫（Plasmodiumfalciparum和刚地弓形虫（Toxoplasmagondii。[0320]可以使用本文中提供的方法治疗的病毒的实例包括但不限于包膜病毒例如下述病毒科的成员：反转录病毒科例如HIV如HIVl和HIV2、11^、31¥1¥、人类1'-细胞白血病病毒1和2、XMRV和科蜱病毒属例如CTFV或版纳病毒），披膜病毒科例如甲病毒属如罗斯河病毒、辛德毕斯病毒、塞姆利基森林病毒、阿尼昂尼昂病毒、基孔肯雅病毒、东部马脑炎病毒、西部马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒或风瘆病毒），黄病毒科例如登革病毒、脑炎病毒例如西尼罗病毒或日本脑炎病毒）、黄热病毒），冠状病毒科例如冠状病毒如SARS病毒或凸隆病毒），弹状病毒科例如水疱性口炎病毒、狂犬病毒），副黏液病毒科例如副流感病毒、腮腺炎病毒、麻瘆病毒、呼吸道合胞病毒、仙台病毒和偏肺病毒），正黏液病毒科例如流感病毒），布尼亚病毒科例如汉坦病毒、布尼亚病毒例如拉克罗斯病毒）、白龄·病毒和内罗病毒），肝病毒科（乙型肝炎病毒），疱瘆病毒科单纯性疱瘆病毒HSV1和HSV-2、水痘带状疱瘆病毒、巨细胞病毒化1^、冊¥-8、冊¥-6、冊¥-7和伪狂犬病毒），丝状病毒科丝状病毒，包括埃博拉病毒和马尔堡病毒和痘病毒科天花病毒、痘苗病毒、痘病毒例如天花、猴痘和接触传染性软疣病毒）、亚塔痘病毒例如特纳河痘和亚巴河痘病毒）。无包膜病毒也可以用本文中提供的方法治疗，例如下述科的成员：杯状病毒科例如引起胃肠炎的病毒株），砂粒病毒科（出血热病毒例如LCMV、拉沙、胡宁、马丘波和瓜纳里托病毒），呼肠孤病毒科例如呼肠孤病毒、环状病毒和轮状病毒），双核糖核酸病毒科，细小病毒科细小病毒，例如人类博卡病毒、腺相关病毒），乳头瘤病毒科例如乳头瘤病毒），乳多空病毒科乳头瘤病毒、多瘤病毒），腺病毒科腺病毒），小核糖核酸病毒科肠病毒、肠道病毒、脊髓灰质炎病毒、柯萨基病毒、肝病毒、心病毒、虫媒病毒、埃可病毒、甲型肝炎病毒、口蹄疫病毒和鼻病毒和虹彩病毒科例如非洲猪瘟病毒）。可以使用本文中提供的方法治疗的其他病毒包括未分类的病毒（例如海绵状脑病的病原体、丁型肝炎的病原体据认为是乙型肝炎病毒的缺陷的随体）、非甲非乙型肝炎的病原体（1类=内部传播;2类=肠胃外传播例如丙型肝炎）、卡西病毒例如诺如病毒、诺沃克和相关病毒）、戊型肝炎病毒例如戊型肝炎、JC和BK病毒和星状病毒）。[0321]在本发明的方法中，本发明的抗体可以与其他活性成分组合使用，所述其他活性成分可以根据待预防或治疗的疾病来选择。其他活性成分的实例包括但不限于化疗药物、抗生素、抗寄生虫剂、抗病毒剂或抗真菌剂。上面提到的这些组合疗法涵盖了组合给药其中两种或更多种治疗剂被包含在同一或分开的制剂中）和分开给药，在后一种情况下，本发明的抗体的给药可以发生在其他治疗剂和或佐剂给药之前、同时和或之后。本发明的抗体也可以与放射疗法组合使用。[0322]本发明的抗体和任何其他治疗剂可以通过任何适合的手段给药，包括肠胃外、肺内和鼻内，并且如果希望用于局部治疗的话，病灶内给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。给药可以通过任何适合的途径，例如通过注射，例如静脉内或皮下注射，这部分取决于所述给药是简短的还是长期的。本文中设想了各种不同的给药时间表，包括但不限于单次给药或在各个不同时间点内多次给药、快速浓注给药和脉冲输注。[0323]本发明还涉及将本发明的抗体或本发明的药物组合物用于疾病的诊断或检测方法中。本发明还涉及检测生物样品中Tyro3的存在的方法。[0324]本发明的任何抗Tyro3抗体都可能可用于检测生物样品中Tyro3的存在。当在本文中使用时，术语“检测”涵盖了定量或定性检测。在某些实施方式中，生物样品包含细胞或组织例如尿道上皮、乳腺、胰腺、食管、肺或脑。[0325]所述方法可以包括将所述生物样品与本发明的抗体在允许所述抗体与可能存在于样品中的Tyr〇3结合的条件下相接触，并检测在所述抗体与Tyro3之间是否形成复合物。这种方法可以是体外或体内方法。[0326]可以使用本发明的抗体诊断的示例性障碍包括癌症例如乳腺癌、肺癌、胰腺癌、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌、白血病、子宫内膜癌、结肠癌、前列腺癌、甲状腺癌、肝癌、骨肉瘤和或黑素瘤）。[0327]本发明的抗体也可用于选择适合于使用抗Tyro3抗体的疗法的对象，例如其中Tyro3是用于患者选择的生物标志物。[0328]因此，本发明还涉及一种用于为使用抗Tyr〇3抗体的疗法选择患有疾病、特别是癌症的对象，或者确定患有疾病、特别是癌症的对象是否易于从使用抗Tyr〇3抗体的疗法获益的方法。[0329]在某些实施方式中，在治疗或诊断方法中使用的本发明的抗体可以被标记。标记物包括但不限于直接检测的标记物或组成部分例如荧光、产色、电子致密、化学发光和放射活性标记物），以及例如通过酶反应或分子相互作用间接检测的组成部分，例如酶或配体。[0330]出于说明而不是限制的目的，给出了下述实施例。实施例[0331]实施例1.通过噬菌体展示产生完全人类的抗Tyr〇3scFv——ScFv向IgG的转变[0332]------------------------------------[0333]选择抗Tyro3抗体、即抗Tyro3scFv，以及通过转化相应的抗Tyro3免疫球蛋白IgG，以特异性识别对应于人类Tyr〇3蛋白（SEQIDNO:1的蛋白质的细胞外结构域。选择的这些抗Tyr〇3scFv不识别TAM受体家族的其他成员，分别为人类AXLSEQIDNO:6和人类MER蛋白（SEQIDN0:7。[0334]抗Tyro3ScFv的筛选[0335]使用快速液体筛选RLS，通过筛选展示针对以下的特异性scFv的噬菌体，产生并选择ScFv克隆：[0336]-融合到具有非生物素化的hTyro3的人类Fe来自于RDBiotech的人类Tyro3hTyro3蛋白的细胞外结构域ECDSEQIDNO:1的第41位至第428位）（重组人类Dtk-Fc嵌合体，RDSystems,Minneapolis，MN;目录号859-DK[0337]-细菌表达的完整hTyro3ECDSEQIDN0:l的第41位至第430位;AxioMx，目录号pAX1635，或[0338]-细菌表达的来自于人类和鼠类Tyr〇3E⑶之间的100%同源区并且不含潜在糖基化位点的肽（具有氨基酸序列DWVPFQTKGLAPASAPQNLHAIRTDSGLILSEQIDN0:192。这个肽对应于SEQIDNO:1的第310位至第340位的序列，在Tyro3序列的结构域FNIII1的末端处。[0339]细菌表达的蛋白质被合成、克隆、表达并纯化，所有三种蛋白质作为生物素化的麦芽糖结合蛋白（MBP融合体。[0340]对单个集落进行筛选，鉴定阳性克隆，对抗体克隆进行测序，并鉴定独特的序列。然后测试阳性独特结合物与来自于RDSystems的鼠类Tyro3E⑶-人类Fc759-DT-100的结合。[0341]ScFv纯化和特异性测试[0342]为了生产蛋白质，将先导scFv克隆在蛋白质生产载体AxioMx;目录号ρΑΡΙΙΙ6中，并将成功克隆的scFv转化到NEBTurbo大肠杆菌感受态细胞NewEnglandBiolabs[NEB]，Ipswich，MA;目录号C2984H中。抗体在大肠杆菌中表达，并使用HisPur钴树脂ThermoScientific，目录号89965通过亲和层析进行纯化。[0343]进行ELISA以评估纯化的蛋白质结合到下述ECD-Fc融合体的能力：hTyro3，mTyro3，hAXLRDSystems，目录号154-AL-100和hMERRDSystems，目录号891-MR-100。还评估了与来自于OriGene的全长FLhTyro3OriGeneTechnologies，Rockvilie，MD;目录号TP308260的结合。[0344]—旦鉴定到具有预期判据的scFv，进行ScFv向作为完整IgGlAIgG的IgG的转变和IgG的生产。[0345]ScFv向IgG的转变[0346]从所选ScFv核苷酸序列的翻译推导出相应的轻链和重链的可变区的氨基酸序列。所选的抗Tyr〇3ScFv的轻链和重链的可变区的氨基酸序列被示出在下文中。在IgG转变后，这些氨基酸序列构成相应的IgG分子的可变区。[0347]表13:所选ScFv的重链和轻链的可变结构域的氨基酸序列。[0348][0349]使用EcoRI和NheI克隆位点将ScFv重链克隆到pAX1566Invivogen;pFUSE2ss-CHIg-hGl中，同时使用EcoRI和AvrII克隆位点将scFv轻链克隆到pAX1642Invivogen;pFUSE2ss-CLIg_hl2中。将序列确认的克隆转化到NEB5α细胞中，并使用QiafilterMaxiprep试剂盒Qiagen，12263制备转染级DNA。为了进行哺乳动物表达，使用FreeStyleMax试剂LifeTechnologies，16447-100，按照制造商的说明书，将Free-styleCHO细胞LifeTeChn〇l〇gies，R800-07用重链和轻链构建物共转染。在转染后第6天通过离心收集细胞上清液，并上样在蛋白A琼脂糖柱LifeTeChn〇l〇gies，101042上。将蛋白A树脂用10倍柱体积的PBS-TPBS0.1%TWeen-20清洗两次，并用3倍柱体积的pH3.5的甘氨酸洗脱。pH用IMTris，pH9.0中和。使用AmiconUltra-4离心过滤器Millipore，UFC801024将IgG缓冲液交换到PBS中。通过SDS-PAGE和考马斯蓝染色分析IgG，并通过CoomassiePlus测定法ThermoScientific，1856210确定IgG浓度。通过LAL产色测定法ThermoScientific，88282测量内毒素水平。[0350]实施例2:本发明的抗Tyr〇3IgG的每条链的⑶R区的定义[0351]------------------------------------[0352]通过将抗Tyr〇3IgG的轻链和重链序列一方面提交到来自于頂GT数据库http:WWW.imgt.org的人类V探索分析工具，另一方面提交到来自于ABYSIS数据库（http:www.bioinf.org.ukabs的请求工具，来确定抗Tyro3抗体的互补决定区，所述数据库被描述在“抗体可变结构域的蛋白质序列和结构分析”（ProteinSequenceandStructureAnalysisofAntibodyVariableDomains，在《抗体工程实验室手册》（AntibodyEngineeringLabManualDuebel，S·和Kontermann，R·主编，Springer-Verlag，Heidelberg中。如下所示，对于本发明的每种抗Tyro3抗体来说，根据IMGT和ABYSIS的⑶R划界结果被概述在表1至12中。[0353]表14:示出了所选抗Tyr〇3抗体的CDR序列的表的列表。[0354][0355]实施例3:重组的带his-strep标签的Tyro3细胞外结构域ECD及其片段的产生[0356]-----------------------------------[0357]为了进行本文中描述的不同结合测定法实验，在由UniProtKnowledgebaseUniProtKB数据库提供的信息的基础上，确定了对应于来自于人类、食蟹猴和鼠类物种的完整Tyr〇3ECD的蛋白质序列。人类Tyr〇3蛋白的完整细胞外结构域或ECD的相应蛋白质序列对应于SEQIDNO:1的第41.429位氨基酸。对于鼠类Tyro3来说，E⑶对应于SEQIDNO:8的第21.505位氨基酸。对于食蟹猴来说，E⑶的序列被描述在SEQIDN0:9中。[0358]还产生了hTyro3E⑶的不同片段（图1。这些片段包含Ig-I结构域，Ig-I和Ig-2结构域，Ig-I、Ig-2和FNIII-I结构域，Ig-2和FNIII-I结构域，或FNIII-I和FNIII-2结构域。对应于Ig-I结构域、Ig-I和Ig-2结构域、Ig-2和FNIII-I结构域以及FNIII-I和FNIII-2结构域的氨基酸序列分别被描述在SEQIDNO:2、3、4和5中。[0359]将对应于这些不同蛋白质的DNA序列进行密码子优化以备在人类中表达，进行基因合成、组装，并克隆到PCDNA3.3I-neoLifeTechnologies中。对于所有这些构建物来说，将共同的信号序列METDTLLLWVLLLWVPGSTGSEQIDN0:193用于重组蛋白的分泌。添加由凝血酶切割位点和后面跟随的偶联到链亲和素标签的八组氨酸SxHis标签构成的C-端标签LVPRGSSAHHHHHHHHSAWSHPQFEKSEQIDNO:194，以便于所述蛋白质的检测（通过抗组氨酸或抗strep标签抗体）、亲和纯化或其在次氮基三乙酸NTAM2+表面或Strepmab免疫板（IBALifesciences上的选择性固定。[0360]将所述人类和食蟹猴Tyr〇3蛋白瞬时转染到HEK293Freestyle细胞中并纯化。使用哺乳动物HEK293freestyle细胞Lifetechnologies的内部优化的瞬时转染方法，将其他构建物成功地表达为分泌蛋白。简单来说，将编码每种构建物的pcDNA3.3质粒扩增，并制备无内毒素小量制备物MachereyNalgene。将这些质粒用于将293Freestyle细胞lifetechnologies电穿孔。然后在8%C02摇床中，在34°C下，在7天内生产蛋白质，其中在32°C下电穿孔后24h添加ImM丁酸钠。通过以8000rpm离心IOmin将表达的蛋白质与细胞分离开，并且在纯化前将上清液用〇.22μπι滤膜过滤。将在哺乳动物细胞中表达的带有8xHis标签的重组Tyr〇3蛋白在非变性条件下，使用Ni-NTA琼脂糖次氮基三乙酸NTA这种四齿螯合配体在高度交联的6%琼脂糖基质中）进行纯化。通过用咪唑竞争来洗脱结合到树脂的蛋白质。然后，将所述蛋白质在制备型HiLoad2656Superdex200凝胶过滤柱（GEhealthcare上进一步纯化并交换缓冲液到I3BSIX缓冲液中。将所述蛋白质用0.22μπι滤膜过滤，然后_80°C储存。使用紫外-可见光分光光度计确定蛋白质浓度。[0361]所有纯化的Tyr〇3构建物的纯度、质量和完整性通过SDSPAGE电泳，随后进行考马斯蓝染色和使用HRP偶联的链亲和素（IBAlifesciences的免疫印迹分析来检查。所述蛋白质也在BioSEC-37.8x300HPLC凝胶过滤柱上进行分析，根据待分析的构建物的尺寸，所述凝胶过滤柱具有15C或30C的孔眼尺寸。[0362]实施例4.针对hTyro3-ECD的scFvIgG的ELISA结合测定法[0363]-----------------------------[0364]进行ELISA结合测定法以检查并比较每种抗Tyr〇3scFv和每种相应的转变后的IgG结合人类Tyr〇3E⑶蛋白的能力（图2。[0365]如实施例3中所述生产人类Tyr〇3ECD蛋白，并使用凝胶过滤进行纯化。这种蛋白质被生产为二聚体糖蛋白，具有约88Kda的表观分子量不含糖基化附加的质量）。[0366]开发了双重夹心ELISA。这种测定法包括测量待测试的抗Tyro3抗体在固定化的带有strep标签的完整人类Tyro3E⑶上的结合，所述E⑶被直接捕获在用抗strepmAb预包被的ELISA板来自于IBAbiotech的StrepMAB免疫包被的微量板上。简单来说，将StrepMAB免疫包被的微量板的96个孔用300yLPBSTween0.2%被称为ELISA清洗溶液清洗三次。通过在室温下温育1小时，实现过量的纯化的带有strep标签的hTyro3ECD蛋白的捕获。在这些实验中，每个孔固定有在I3BSJSA1%被称为ELISA稀释溶液）中稀释的3yg纯化的蛋白。将孔用300yL清洗溶液清洗三次。使用200yL孔的阻断溶液PBS，BSA3%，在室温下在60min期间，阻断孔表面上的非特异性结合位点。将孔用300yL清洗溶液清洗五次。然后每个孔添加IOOyl—式二份在ELISA稀释溶液中稀释的不同浓度的待测试的抗Tyr〇3抗体，并允许其在室温下温育1小时。在这个实验中，也添加无关对照IgG2656。对于ScFv格式的抗Tyro3抗体来说，实验使用一式二份的6种浓度来进行（图3A。对于IgG格式的抗Tyro3抗体来说，实验使用一式二份的9种浓度来进行（图3B。用于第一次稀释的ScFv起始浓度为10μgmL或者对于2718来说30ygmL，然后在ELISA稀释溶液中进行3倍稀释。对于IgG实验来说，用于第一次稀释的起始浓度为3ygml，然后在ELISA稀释溶液中进行3倍稀释。将孔用300yL清洗溶液清洗五次。然后，根据待评估的抗Tyro3抗体的本质参见表15,第1列），通过添加1〇〇μ1孔的在ELISA稀释溶液中以指定稀释度表15中的第4列）稀释的表15中描述的相应的HRP偶联的第二抗体第3列），来揭示它们在捕获的Tyr〇3构建物上的结合。允许所述混合物在室温下温育60min。将孔用300yL清洗溶液清洗五次。辣根过氧化物酶活性的揭示使用1〇〇μ1孔的即用型TMB溶液来实现，并在混合且无光下，在室温下温育5-30min。使用LabsystemsiEMSMF装置读取在450nm和540nm处的光密度。[0367]表15:ELISA结合测定法条件[0368][0369][0370]实施例5.使用生物膜层干涉测量法BLI进行的抗Tyr〇3IgG的亲和性测量[0371]----------------------------------[0372]将20mg重组的带有8his-strep标签的人类Tyro3的细胞外结构域ECDSEQIDNO:1的第40-429位在HiloadSuperdexS2002660上凝胶过滤。待测试的抗人类Tyro3IgG也通过凝胶过滤进行纯化。[0373]亲和性确定使用生物膜层干涉测量法，在装备有anti-HumanKineticsAHC—次性光纤生物传感器探头的OctetK2仪器Pal1ForteBio上进行。所有实验在30°C下，在推荐的Fortebio运行缓冲液PBS，含有0.1%wv牛血清白蛋白（BSA和0.02%vvTween_20中进行。这种缓冲液也用于配体在这里是抗体和被分析物在这里是人类Tyr〇3蛋白的细胞外结构域）的稀释。将96孔微量板（黑色聚丙稀低结合板，GreinerBio-One，Frickenhausen，Germany中的样品以1000rpm搅拌。使用AHC生物传感器（PalICollaboration;参考号：18-5060，将探头用5.625ygmL37.5nM的不同抗hTYR03抗体饱和IOmin，这通常导致0.3nm的捕获水平。通过添加在6种浓度37.5或62.5取决于实验）以及125、250、500、1000和25001^下稀释的人类17仰3的细胞外结构域，确定每种纯化的抗体分子量为150kDa的动力学常数。在测量之间，通过将抗人类Tyro3抗体生物传感器表面暴露到3个循环每个循环包括在pH1.5的IOmM甘氨酸中5秒，然后在PBS中5秒），将它们再生。结合阶段测量300秒，解离阶段取决于相互作用，取决于解离步骤测量300秒。使用双重参比减除法，也就是说通过减去暴露于每种浓度的人类Tyro3蛋白的细胞外结构域的不含配体的对照传感器和仅仅提交到运行缓冲液的含有配体的参比孔，校正所有测量值的基线漂移。在ForteBio数据分析软件9.0上，使用拟合通过传感器链接的全局Rmax的1:1相互作用模型，计算每种抗体的亲和性、结合kon和解离速率常数koff。将通常由异源结合引起的不能用软件可靠地拟合的曲线大多数完全R20.925，从进一步分析中排除。结果被示出在图10和11中。[0374]实施例6:特异性ELISA[0375]-------------------------------[0376]将来自于RDSystems的hTyro3859-DK-100、hAxl154-AL-100或hMer891-MR-100的细胞外结构域在PBS中包被在96孔微量滴定板lyg孔上，并在4°C下温育过夜。将板用PBS清洗三次，并在RT下在PBS3%BSA中阻断1小时。将板如上清洗，以lygmL在PBS中稀释添加scFv并在RT下温育1小时。将板用I3BSTPBS0.01%TWeen-20清洗三次，并添加抗FLAG抗体-HRP第二抗体Abeam，ab49763，在阻断缓冲液中15000稀释），在RT下1小时。将板如上用PBST清洗，并使用Ultra-TMB试剂ThermoScientific，34028产生信号。[0377]图4中示出的结果显示，所选的抗Tyro3scFv不与hAxl或hMer交叉反应。[0378]实施例7:GAS6竞争测定法[0379]-------------------------------[0380]将微量滴定板用ΙΟΟμΙ孔的2.5ygmL的在PBS中的人类重组全长Tyr〇3蛋白OriGene#TP308260包被，并在4°C下温育过夜。将板用I3BS清洗三次，并在RT下在PBS3%BSA中阻断1小时。将板如上清洗，施加抗体抗Tyr〇3scFv或MAB859、生物素化的GAS6或抗体GAS6混合物，在室温下Ih。将板用I3BSTPBS0.01%Tween-20清洗三次，添加在阻断缓冲液中稀释的第二抗体，在RT下1小时。结合到全长Tyr〇3的GAS6使用0.4ygmL的链亲和素-HRPAbeam，ab7403检测，ScFv结合使用抗His-HRP抗体（Sigma-Aldrich，A7058,15000稀释检测，并且MAB859结合使用抗小鼠抗体-HRPAbcam，ab6728110000稀释检测。将板用PBST漂洗，并使用Ultra-TMB试剂（ThermoScientific，34028产生信号。[0381]在不存在GAS6和存在GAS6的情况下这些竞争测定法的结果分别被示出在图5A和5B中。[0382]实施例8:抗Tyr〇3scFv和IgG针对食蟹猴和鼠类Tyr〇3E⑶的交叉反应性[0383]------------------------------[0384]这种测定法的目的是评估抗Tyro3scFv和IgG针对鼠类和食蟹猴Tyro3蛋白的交叉反应性。这种测定法包括在实施例4中描述并在图2中说明的双重夹心ELISA中，测量抗Tyr〇3抗体在如实施例3中所述制备的食蟹猴或鼠类Tyr〇3E⑶上的结合。[0385]在这些实验中，将IOOyL最终稀释度为5ygmL在PBS，BSA1%稀释溶液中稀释）的带有strep标签的食蟹猴和鼠类Tyro3E⑶蛋白添加到每个孔（因此每个孔约500ng的Tyro3蛋白）。[0386]第一和第二抗体以及它们的使用条件被描述在表16中。[0387]表16:用于确定抗Tyr〇3scFv和IgG针对食蟹猴和鼠类Tyr〇3E⑶的交叉反应性的抗体[0388][0389]scFv格式和IgG格式的抗Tyr〇3抗体针对食蟹猴Tyr〇3E⑶的交叉反应性分别示出在图6A和6B中。[0390]scFv格式的抗Tyro3抗体针对鼠类Tyro3E⑶的交叉反应性示出在图7中。[0391]实施列9:抗Tyro3scFv的表位作图[0392]------------------------------------------------[0393]这种测定法的目的是确定本发明的每种抗Tyro3抗体与人类Tyro3E⑶的在Ig样Igl或Ig2或纤连蛋白（FnIII1或2结构域之内的子结构域的结合区。[0394]这种测定法包括测量抗Tyro3scFv与人类Tyro3E⑶的不同片段的结合。使用在实施例4中描述的双重夹心ELISA，并将每个孔约500ngIOOyL孔，在PBS，BSA1%中稀释到5ygmL的在实施例3中描述的生产的Tyro3片段固定化。[0395]第一和第二抗体以及它们的使用条件被描述在表17中。[0396]表17:用于抗Tyro3scFv的表位作图的抗体[0397][0398]根据在Tyro3的不同结构域上的结合结果如图8中所示），鉴定到抗Tyro3抗体的三个亚类：[0399]结合到Igl和Ig2的结合物（2411、2412、2413、2415、2711和2713;[0400]结合Igl并且不结合Ig2的结合物（2410、2414、2709、2710和27172717的情况是特殊的，2717的表位在Igl-Ig2片段中不再可接近结合到Igl，但是对于Igl-Ig2片段来说完全不结合），但是当存在其他结构域，例如在完整Tyr〇3ECD中时，情况不再如此）；[0401]最后是结合到FNIII1结构域的结合物2718ScFv。[0402]实施例10:抗Tyro3IgG在活细胞中的结合[0403]------------------------------------------------[0404]为了评估抗Tyro3IgG与过表达Tyro3的细胞的结合，使用了被转染以表达重组人类Tyro3的HEK293细胞和表达内源Tyro3的未转染的HEK293细胞。[0405]通过将5E5个细胞在4°C下暴露于PBS中的Live-DeadNIR染料（LifeTechnologies，#L10119和IygTyro3特异性MAB859单克隆抗体RDSystems或其同种型对照MAB002，RDsystems30分钟，来控制Tyro3过表达。将细胞用PBS清洗，并在4°C下与IOOyLPBS中的1:100PE偶联的山羊抗小鼠IgAbBDPharmingen温育30分钟。将细胞清洗，并立即在ARIAIII流式细胞仪BecktonDickinson上记录至少10,000个活细胞的PE荧光（图9的上图）。[0406]为了确定各个IgG与未转染的细胞相比进一步结合Tyr〇3转染的细胞的能力，将5E5个未转染的和Tyro3转染的细胞在4°C下暴露于PBS中的Live-DeadNIR染料（LifeTechnologies，#L10119和Iyg每种IgX30分钟。将细胞用PBS清洗，并在4°C下与IOOyLPBS中的20yLPE偶联的小鼠抗人类λ轻链AbBDPharmingen温育30分钟。将细胞清洗，并立即在ARIAIII流式细胞仪BecktonDickinson上记录至少10,000个活细胞的PE荧光（图9的中图和下图）。使用显示出未转染的和Tyr〇3转染的细胞的PE表达情况的叠加柱状图，确定了IgG结合过表达的Tyro3的能力。所述叠加柱状图使用Kaluza软件BeckmanCoulter获得，并且限于具有HEK细胞的特征性尺寸和粒度测量值的细胞，其中死细胞被排除（未示出）。

权利要求：1.一种分离的人类或人源化抗体，其结合到人类Tyr〇3受体的免疫球蛋白样结构域Ig-1，但不结合到人类Axl和Mer受体，并减少或抑制人类Gas6与人类Tyro3受体的结合。2.权利要求1的抗体，所述抗体包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll和或包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl03.权利要求1或2的抗体，所述抗体还结合到人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。4.权利要求1至3任一项的抗体，所述抗体包含轻链，其包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll，和由或基本上由SEQIDNO:88、102、116、130、144或158的轻链可变区的CDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L2和CDR-L3,以及重链，其包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl，和由或基本上由SEQIDNO:89、103、117、131、145或159的重链可变区的CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-H2和CDR-H3。5.权利要求1或2的抗体，所述抗体不结合到人类Tyro3的免疫球蛋白样结构域Ig-2。6.权利要求1、2和5任一项的抗体，所述抗体包含轻链，其包含由或基本上由SEQIDNO:10的轻链可变区的⑶R-Ll构成的⑶R-Ll，和由或基本上由SEQIDNO:10、32、46、60或74的轻链可变区的01?-1^和01?-1^3构成的01?-1^和CDR-L3,和重链，其包含由或基本上由SEQIDNO:11的重链可变区的⑶R-Hl构成的⑶R-Hl，和由或基本上由SEQID勵：11、33、47、61或75的重链可变区的01?-!12和01?-!13构成的01?-!12和CDR-H3。7.权利要求1或2的抗体，所述抗体包含包含由或基本上由SEQIDN0:10的轻链可变区的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1XDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQID^:11的重链可变区的^1?-!11、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQIDN0:32的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1XDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:33的重链可变区的⑶R-H1、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQIDN0:46的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1XDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:47的重链可变区的⑶R-H1、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQIDN0:60的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1XDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:61的重链可变区的⑶R-H1、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQIDN0:74的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1XDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:75的重链可变区的⑶R-H1、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-HUCDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQIDN0:88的轻链可变区的CDR-LUCDR-L2和CDR-L3构成的CDR-L1XDR-L2和⑶R-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDN0:89的重链可变区的⑶R-H1、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQID腸：102的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-Ll、CDR-L2和CDR-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDNO:103的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQID腸：116的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-Ll、CDR-L2和CDR-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDNO:117的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQID腸：130的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-Ll、CDR-L2和CDR-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDNO:131的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQID腸：144的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-Ll、CDR-L2和CDR-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDNO:145的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链，或包含由或基本上由SEQID腸：158的轻链可变区的01?-1^1、001?-1^和01?-1^3构成的CDR-Ll、CDR-L2和CDR-L3的轻链，和包含由或基本上由SEQIDNO:159的重链可变区的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3构成的CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3的重链。8.权利要求1至6任一项的抗体，所述抗体是Tyr〇3受体的抑制剂，优选地通过减少或阻断Tyro3配体与Tyro3的细胞外结构域的结合和或减少或阻断Tyro3介导的信号转导和或减少或阻断Tyro3磷酸化和或减少或阻断Tyro3二聚化。9.权利要求1至7任一项的抗体，所述抗体是IgGl、IgG2、IgG3或IgG4抗体，优选为IgGl抗体。10.—种分离的核酸分子，其选自：a编码权利要求1至9任一项的抗体的核酸序列，和⑹与a中的任一序列互补的核酸。11.一种载体，其包含权利要求1〇的核酸。12.—种宿主细胞，其包含权利要求10的核酸或权利要求11的载体。13.—种用于生产权利要求1至9任一项的抗体的方法，所述方法包括将权利要求12的细胞在适合于所述抗体表达的条件下培养，并任选地回收所述抗体。14.一种药物组合物，其包含权利要求1至9任一项的抗体、权利要求10的核酸分子、权利要求11的载体或权利要求12的细胞，以及可药用载体或赋形剂。15.权利要求1至9任一项的抗体或权利要求14的药物组合物，其用于过度增殖性疾病或传染性疾病的诊断、预防或治疗。

百度查询： 埃尔萨里斯生物技术公司;法国国家科学研究中心;法国居里学院 抗Tyro3抗体及其用途

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