申请/专利权人：浙江省肿瘤医院

申请日：2020-01-08

公开（公告）日：2021-11-19

公开（公告）号：CN111175505B

主分类号：G01N33/574(20060101)

分类号：G01N33/574(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.11.19#授权;2020.12.18#实质审查的生效;2020.05.19#公开

摘要：本发明公开了一种p53自身抗体检测试剂盒，包括辣根过氧化物酶标记多肽、蛋白AGL琼脂糖磁珠、血清稀释液、TBST缓冲液、50％二甲基亚砜水溶液、3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺底物溶液、反应终止液；多肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。采用辣根过氧化物酶标记特异性强的多肽抗原，可与血清中自身抗体充分、有效结合，并采用蛋白AGL琼脂糖磁珠俘获、定量自身抗体，检测灵敏度高，非特异性本底弱，便于自动化检测，特别适用于肿瘤早期自身抗体筛查。本发明还公开了一种上述试剂盒在肺癌p53自身抗体检测中的应用，检测特异性强，灵敏度高、假阴性率低，成本低廉，操作简便，更有利于自动化、大样本筛查技术的实现。

主权项：1.一种p53自身抗体检测试剂盒，其特征在于，包括：辣根过氧化物酶标记多肽、蛋白AGL琼脂糖磁珠、血清稀释液、TBST缓冲液、50％二甲基亚砜水溶液、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺底物溶液、反应终止液；所述多肽的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；其中，所述血清稀释液与待测血清用量的体积比为9-11：1；还包括非特异性本底对照液，所述非特异性本底对照液包括多肽溶液；所述非特异性本底对照液用于检测所述试剂盒的非特异性本底，包括以下步骤：1将待测血清与血清稀释液混合，得到稀释血清；然后向所述稀释血清中加入辣根过氧化物酶标记多肽和多肽溶液，室温下温育2-3h；2将步骤1温育后的混合物加入到沉降体积为30-35μL的蛋白AGL琼脂糖磁珠中，室温下温育2-3h，TBST缓冲液清洗，然后向蛋白AGL琼脂糖磁珠中加入3,3’,5,5’-四甲基联苯胺底物液，反应15-20min后检测上清的450nmOD值。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江省肿瘤医院 一种p53自身抗体检测试剂盒及其应用

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