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【发明公布】一种大花海棠种质离体保存的方法_安徽农业大学_202210732712.7 

申请/专利权人:安徽农业大学

申请日:2022-06-27

公开(公告)日:2022-09-09

公开(公告)号:CN115024223A

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00;A01N3/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.03.14#授权;2022.09.30#实质审查的生效;2022.09.09#公开

摘要:本发明公开了一种大花海棠种质离体保存的方法,涉及一种通过离体培养的再生技术,该方法包括采用诱导培养基对大花海棠叶片进行离体诱导分化培养,培养至一定状态后采用离体保存培养基进行培养,且离体保存培养分为两个阶段,一阶段为快速生长培养,培养时长约15~20天,二阶段为延滞生长培养,培养时长最长为160~180天,两个阶段采用同一培养基,培养基的配方为:MS基本培养基+1㎎L6‑苄氨基腺嘌呤6‑BA+0.2㎎L萘乙酸NAA+25gL蔗糖+0.7%琼脂,pH值5.8~6.0;采用本发明的方法对大花海棠进行培养后,能够有效延长种质离体培养时间,降低了保存成本。

主权项:1.一种大花海棠种质离体保存的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:步骤1、获取大花海棠幼嫩叶片,对所得叶片消毒处理后切成1平米厘米的小方块,获得外植体;步骤2、将所得外植体按叶面向上叶背向下的方式接种在离体叶片分化培养基上进行两个阶段的培养,结束后获得分化芽;其中,第一阶段为暗培养且培养时长为5~7天,第二阶段培养时长为45~50天,其培养条件为:光暗周期16h8h,光强1500~2000LX;第一阶段和第二阶段培养室室温均为26±2℃,培养室相对空气湿度70%;离体叶片分化培养基配方为:MS基本培养基+1㎎L6-苄氨基腺嘌呤6-BA+0.2㎎L萘乙酸NAA+0.1㎎L2,4-二氯苯氧基乙酸2,4-D+25gL蔗糖+0.7%琼脂,PH值5.8-6.0;步骤3、将步骤2所得分化芽按丛生芽团块方向性切割后分成多个团块,每个团块3-5个小芽,令每个团块按形态学方向接种在离体保存培养基上,并依次进行快速培养和延滞培养;其中:快速培养时长为15~20天,其培养条件为:培养室温度26±2℃,光暗周期16h8h,光强1500~2000LX,培养室相对空气湿度70%;延滞培养时长为160~180天,其培养条件为:光暗周期2h22h,培养室温度15±2℃,光强1500~2000LX,培养室相对空气湿度70%;其中,离体保存培养基配方为:MS基本培养基+1㎎L6-苄氨基腺嘌呤6-BA+0.1㎎L萘乙酸NAA+25gL蔗糖+0.7%琼脂,PH值5.8-6.0。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 安徽农业大学 一种大花海棠种质离体保存的方法

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