申请/专利权人：广东省农业科学院植物保护研究所

申请日：2022-03-10

公开（公告）日：2022-12-27

公开（公告）号：CN114717328B

主分类号：C12Q1/6888

分类号：C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.12.27#授权;2022.07.26#实质审查的生效;2022.07.08#公开

摘要：本发明公开了一种基于SCAR‑PCR技术在稻水象甲肠道检测其食性的方法，涉及分子生物学检测技术领域。本发明的方法包括以下步骤：S1：提取待测稻水象甲样品的基因组DNA；S2：利用SCAR引物对LH‑ycf4‑FR、OS‑AGL‑FR和PD‑ndhF‑FR，分别对基因组DNA进行SCAR‑PCR反应；S3：将所述步骤S2中的SCAR‑PCR产物作为模板进行第二轮SCAR‑PCR反应，引物与所述步骤S2相同；S4：将所述步骤S3中的SCAR‑PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳并分析电泳结果。该方法步骤简单，耗时短，准确性高，能定性评估稻水象甲的食性，极大地降低了对工作人员专业知识的要求。

主权项：1.一种检测稻水象甲食性的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：提取待测稻水象甲样品的基因组DNA；S2：利用核苷酸序列为SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的SCAR引物对LH-ycf4-FR，核苷酸序列为SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的SCAR引物对OS-AGL-FR，以及核苷酸序列为SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示的SCAR引物对PD-ndhF-FR，分别对所述基因组DNA进行SCAR-PCR反应，分别得第一PCR产物、第二PCR产物和第三PCR产物；S3：利用所述SCAR引物对LH-ycf4-FR对所述第一PCR产物进行SCAR-PCR反应，利用所述SCAR引物对OS-AGL-FR对所述第二PCR产物进行SCAR-PCR反应，利用所述SCAR引物对PD-ndhF-FR对所述第三PCR产物进行SCAR-PCR反应，分别得第四PCR产物、第五PCR产物和第六PCR产物；S4：取5μL步骤S3中的所述第四PCR产物、所述第五PCR产物和所述第六PCR产物在琼脂糖凝胶中进行电泳，并分析电泳结果，判断所述待测稻水象甲样品的食性；步骤S1中，所述待测稻水象甲样品为稻水象甲的中肠；步骤S4中，所述电泳结果的分析方法为：如果所述第四PCR产物的电泳结果显示有大小约为216bp的条带，则判断所述待测稻水象甲取食李氏禾；如果第五PCR产物的电泳结果显示有大小约为203bp的条带，则判断所述待测稻水象甲取食水稻；如果第六PCR产物的电泳结果显示有大小约为247bp的条带，则判断所述待测稻水象甲取食双穗雀稗。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广东省农业科学院植物保护研究所 一种基于SCAR-PCR技术在稻水象甲肠道检测其食性的方法

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