申请/专利权人：河南师范大学

申请日：2022-10-12

公开（公告）日：2023-03-21

公开（公告）号：CN115820605A

主分类号：C12N9/24

分类号：C12N9/24;C12N9/88;C12N15/70;C12N15/56;C12N15/60;C12P17/16

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.06.09#实质审查的生效;2023.03.21#公开

摘要：本发明公开了一种体外合成群体感应信号分子AI‑2的方法，属于群体感应信号分子的合成技术领域。根据奇球菌Y35基因组中AI‑2合成关键基因pfs和luxS设计引物，以菌株Y35基因组DNA为模板对基因pfs和luxS进行扩增，扩增产物经过酶切纯化后与酶切后的质粒pET28a连接，构建重组质粒pET28a‑pfs和pET28a‑luxS，并在表达菌株E.coliBL21DE3进行异源表达，进一步对诱导条件进行响应面优化，提高蛋白的产量，降低AI‑2体外合成的成本，并对AI‑2的产量进行测定。本方法能够提高AI‑2的产量，为群体感应信号分子AI‑2的合成以及后续相关研究奠定了基础。

主权项：1.一种体外合成群体感应信号分子AI-2的方法，其特征在于：以奇球菌Y35基因组DNA为模板分别扩增S-腺苷同型半胱氨酸核苷酶合成基因pfs和S-核糖同型半胱氨酸酶合成基因luxS，并进行异源表达；经过诱导条件优化和蛋白纯化后，分别获得纯化的Pfs蛋白和LuxS蛋白，同时与S-腺苷同型半胱氨酸在磷酸钠缓冲液中进行反应，从而实现体外合成AI-2，其中Pfs蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示，LuxS蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南师范大学 一种体外合成群体感应信号分子AI-2的方法

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