申请/专利权人：中国医学科学院北京协和医院

申请日：2022-12-16

公开（公告）日：2023-04-25

公开（公告）号：CN116004685A

主分类号：C12N15/70

分类号：C12N15/70;C07K14/37;C12N15/31;C07K1/22;G01N33/68

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.05.12#实质审查的生效;2023.04.25#公开

摘要：本发明提供了一种链格孢霉主要致敏组分重组Alta1的制备方法及应用，其设计全长拼接引物，在引物的两端各设计了保护性碱基合成基因Alta1，连入载体pCZN1的NdeI和XbaI位点之间；其次，将获得的重组质粒pCZN1‑Alta1转入Top10克隆菌株，挑取阳性克隆子测序；再将pCZN1‑Alta1载体导入大肠杆菌中，以IPTG诱导以pCZN1‑Alta1为载体的融合蛋白表达。本发明提供的方法，操作方便、成本低、周期短、表达产量高，且大肠杆菌系统无法对蛋白质进行糖基化修饰，有效的避免了在过敏原组分的表达中，因糖基化引起的检测结果的假阳性问题。

主权项：1.一种链格孢霉主要致敏组分重组Alta1的制备方法，其设计全长拼接引物，在引物的两端各设计了保护性碱基，并合成基因Alta1，其序列如SEQIDNO.1所示，将该基因序列连入载体pCZN1的NdeI和XbaI位点之间，获得重组质粒pCZN1-Alta1；其次，将获得的重组质粒pCZN1-Alta1转入Top10克隆菌株，挑取阳性克隆子测序；再将pCZN1-Alta1载体导入大肠杆菌中，以IPTG诱导以pCZN1-Alta1为载体的融合蛋白表达。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国医学科学院北京协和医院 一种链格孢霉主要致敏组分重组Alt a 1的制备方法及应用

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