申请/专利权人：内蒙古农业大学;蒙草生态环境(集团)股份有限公司

申请日：2021-12-21

公开（公告）日：2023-06-06

公开（公告）号：CN114208673B

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00;A01G24/28;A01G24/15;A01G24/12;A01G22/60

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.06.06#授权;2022.04.08#实质审查的生效;2022.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种华北蓝盆花的组织培养方法，包括以下步骤：步骤1、消毒，先用75％酒精，再用2％次氯酸钠消毒；步骤2、诱导愈伤组织：将消毒后的叶片剪成正方形接种到诱导愈伤组织培养基中诱导出愈伤组织，步骤3、诱导愈伤组织分化，将愈伤组织切成正方体小块，接种到诱导愈伤组织分化培养基中，分化出不定芽，将6‑8cm的不定芽接种于根培养基中，促进不定芽生根形成再生苗。

主权项：1.一种华北蓝盆花的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、消毒：选取生长健壮的无病虫害植株上部完整的叶片，洗净后，移至超净工作台，先用75％酒精消毒28-32s，再用2％次氯酸钠消毒8-9min，无菌水洗净消毒药品残留，无菌滤纸吸干水分；步骤2、诱导愈伤组织：将步骤1中消完毒的叶片放置培养皿中，剪掉叶片边缘，将剩下叶片剪成正方形的，在正方形外植体上剪1-3个小口，或划破叶面，将叶片正面朝上接种到诱导愈伤组织培养基中诱导出愈伤组织，培养时间为38-43天，所述愈伤组织培养基为30.00g蔗糖＋6.50g琼脂+MS+1.50-2.50mgLTDZ；步骤3、诱导愈伤组织分化：将步骤2中诱导出的愈伤组织切成正方体小块，接种到诱导愈伤组织分化培养基中，分化出不定芽，培养时间为30-40天，接种时，愈伤组织保持原有生长方向，所述诱导愈伤组织分化培养基为30.00g蔗糖＋6.50g琼脂+MS+0.50-2.00mgL6-BA；步骤4、增殖培养：将株高大于3.00cm的不定芽丛接种到增殖培养基上，继续诱导不定芽，培养时间为30-40天，所述增殖培养基为MS+0.60-0.90mgL6-BA；步骤5、壮苗培养：将增殖培养中长势一致，株高在3.00-5.00cm的不定芽接种到壮苗培养基中，培养时间为30天，所述壮苗培养基为30.00g蔗糖＋6.50g琼脂+MS+0.40-0.70mgL6-BA；步骤6、不定根的诱导：将株高为6.00-8.00cm的不定芽接种于生根培养基中，促进不定芽生根形成再生苗，培养时间为30天，所述生根培养基为不添加任何激素的30.00g蔗糖＋6.50g琼脂+34MS培养基；步骤7、炼苗移栽：挑选步骤6中生长45天、具有6-8片叶、根系发达且株高大于8cm的生长健壮的再生苗进行炼苗移栽；所述步骤7中：炼苗后洗去根部的培养基，移栽到装有基质的花盆内；所述基质由草炭土、珍珠岩、沙混合而成，所述草炭土、珍珠岩、沙的体积比为4:3:2。

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