申请/专利权人：河南省农业科学院烟草研究所

申请日：2023-05-18

公开（公告）日：2023-08-08

公开（公告）号：CN116555401A

主分类号：C12Q1/6851

分类号：C12Q1/6851;C12Q1/70;C12R1/94

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.08.25#实质审查的生效;2023.08.08#公开

摘要：本发明涉及一种同时检测TMV、CMV和PVY的三重荧光定量PCR方法，分别以TMV、CMV和PVY的重组质粒标准品为模板做单重荧光定量PCR反应，然后逐渐增加反应重数，并利用矩阵法对引物和探针浓度进行优化，建立荧光定量PCR最佳反应体系；三重荧光定量PCR标准曲线的建立Ct值同质粒标准品浓度之间线性关系良好，利用建立的三重荧光定量PCR检测方法对不同样品进行检测，结果显示，该方法特异性较强。重复性试验结果表明，建立的三重荧光定量PCR方法重复性与稳定性良好。

主权项：1.一种同时检测TMV、CMV和PVY的三重荧光定量PCR方法，其特征在于，其方法如下：1）按照需求准备所需材料及试剂以及仪器设备，所需材料与试剂包括TMV、CMV、PVY、TEV、TVBMV、番茄斑萎病毒、Trizol、反转录试剂盒PrimeScriptRTReagentKit、PremixTaq酶、DNA凝胶回收试剂盒MiniBESTAgaroseGELDNAExtractionKit、pMDTM18-TVector以及质粒提取试剂盒；所需的仪器与设备包括ABI7500实时荧光定量PCR仪、D30紫外分光光度计、凝胶成像仪、T100PCR以及TGL-16M型高速冷冻离心机。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南省农业科学院烟草研究所 同时检测TMV、CMV和PVY的三重荧光定量PCR方法

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