申请/专利权人：珠海联邦制药股份有限公司

申请日：2020-01-03

公开（公告）日：2023-09-15

公开（公告）号：CN113073118B

主分类号：C12N15/867

分类号：C12N15/867;C12N15/67;C12N5/10

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.15#授权;2021.07.23#实质审查的生效;2021.07.06#公开

摘要：本发明公开了Tet‑off表达调控系统在级联放大启动子活性中的用途。本发明是基于发明人发现Tet‑off表达调控系统具有级联放大启动子活性的作用，对于弱启动子的放大作用特别明显所提出的发明创造。应用该发明创造得到了一种利用慢病毒感染法构建高效表达稳定细胞株的方法。该方法实现了细胞株构建周期短、高效率、高表达以及高稳定性，为实现重组蛋白大规模、高水平表达提供了可靠的依据。

主权项：1.一种慢病毒重组表达载体在制备高效表达稳定细胞株中的应用，其特征在于：所述的慢病毒重组表达载体包括含Tet-off表达调控系统的慢病毒载体骨架和启动子A；启动子A设置在tTA2表达元件上游，用于直接驱动tTA2进行表达；所述的启动子A为弱启动子，具体为S100a6启动子、CIRP启动子或PDI启动子；所述的CIRP启动子为核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的CIRP-P867启动子或核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的CIRP-P2588启动子；所述的PDI启动子为核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的PDI-P598启动子；所述的S100a6启动子为核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的S100a6-dS18启动子；所述的慢病毒载体骨架为pLUT-off；所述的pLUT-off的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示；所述的细胞为CHO细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 珠海联邦制药股份有限公司 Tet-off表达调控系统在级联放大启动子活性中的用途

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