申请/专利权人:苏州天隆生物科技有限公司
申请日:2019-12-17
公开(公告)日:2023-09-15
公开(公告)号:CN110951859B
主分类号:C12Q1/6883
分类号:C12Q1/6883
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.09.15#授权;2020.05.01#实质审查的生效;2020.04.03#公开
摘要:本发明公开一种检测人类APOE和SLCO1B1基因多态性的免提取试剂盒,所述试剂盒包括主反应液、ApoE引物探针混合液1、ApoE引物探针混合液2、SLCO1B1引物探针混合液1、SLCO1B1引物探针混合液2、阳性质控和阴性质控;所述主反应液包括DNA聚合酶、四种脱氧核糖核苷酸、Mg2+、Tris缓冲液和超纯BSA,所述DNA聚合酶为TTX酶和或HS‑D‑Taq酶。试剂盒以其独特的扩增体系,特异性和灵敏度兼顾的引物和探针序列和体系,能够直接完成对全血样本和试子样本完成测试,检测在四个反应体系闭管中完成,防止了污染发生,另外试剂盒中阴性质控和阳性质控能够有效监控假阳性和试剂和操作的有效性,有效控制污染和监控整个实验过程。
主权项:1.一种检测人类APOE和SLCO1B1基因多态性的免提取试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括主反应液、ApoE引物探针混合液1、ApoE引物探针混合液2、SLCO1B1引物探针混合液1、SLCO1B1引物探针混合液2、阳性质控和阴性质控;所述主反应液包括DNA聚合酶、四种脱氧核糖核苷酸、Mg2+、Tris缓冲液和超纯BSA,所述DNA聚合酶为TTX酶和或HS-D-Taq酶,浓度为2U-5U,所述四种脱氧核糖核苷酸为dATP、dCTP、dTTP和dGTP,浓度为0.2μMml-1μMml,所述Mg2+为MgCl2,浓度为0.04Mml-0.4Mml;Tris缓冲液为Tris-HCL,浓度为0.05Mml-0.5Mml,pH为8.9,BSA浓度为0.5mgml-5mgml;所述ApoE引物探针混合液1包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.4、SEQIDNO.2、和SEQIDNO.5所示的引物;SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示的探针;以及SEQIDNO.9、SEQIDNO.10和SEQIDNO.11所示的检测质控内标引物和探针;所述ApoE引物探针混合液2包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.6、SEQIDNO.3、和SEQIDNO.5所示的引物;SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示的探针;以及SEQIDNO.9、SEQIDNO.10和SEQIDNO.11所示的检测质控内标引物和探针;所述SLCO1B1引物探针混合液1包括SEQIDNO.12、SEQIDNO.16、SEQIDNO.13、和SEQIDNO.17所示的引物;SEQIDNO.18和SEQIDNO.19所示的探针;以及SEQIDNO.9、SEQIDNO.10和SEQIDNO.11所示的检测质控内标引物和探针;所述SLCO1B1引物探针混合液2包括SEQIDNO.14、SEQIDNO.16、SEQIDNO.15、和SEQIDNO.17所示的引物;SEQIDNO.18和SEQIDNO.19所示的探针;以及SEQIDNO.9、SEQIDNO.10和SEQIDNO.11所示的检测质控内标引物和探针。
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