申请/专利权人：中国林业科学研究院热带林业研究所

申请日：2020-04-13

公开（公告）日：2023-10-24

公开（公告）号：CN111518864B

主分类号：C12Q1/02

分类号：C12Q1/02

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.10.24#授权;2020.09.04#实质审查的生效;2020.08.11#公开

摘要：本发明公开了一种快速统计植物花粉‑胚珠比的方法。该方法将花药材料置于离心管中，加入适当体积的I2‑KI溶液，挤压和旋转捣碎后使用涡旋混合仪对管中的混悬液进行震荡，用I2‑KI溶液定容至一定体积，再次充分涡旋混合；用移液器汲取花粉混悬液置于细胞计数板的测量室中，使用全自动细胞计数仪检测花粉混悬液浓度，得到所检测植物的单花花粉量；将子房材料放入培养皿，置于研究级体视显微镜下进行解剖统计胚珠数量，解剖时培养皿中加少量PBS；根据单花花粉量和胚珠数，准确计算花粉‑胚珠比。本发明的统计方法单位时间处理样品数4‑6个、准确性达95％以上，显著优于传统技术手段，适用于具有不同尺寸花粉的植物类群。

主权项：1.一种快速统计植物花粉-胚珠比的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）获取植物材料，固定、清洗和解剖分离；（2）将解剖分离后的花药材料置于离心管中，加入适量的I2-KI溶液，溶液中I2的浓度为1g100mL，KI的浓度为8g100mL；（3）将离心管中的花药材料捣碎，然后涡旋震荡，使花粉与花药组织充分分离；使用镊子将管中的花药组织去除；用I2-KI溶液定容至一定体积，再次充分涡旋混合；（4）吸取适量花粉混悬液，置于细胞计数板的测量室中，使用全自动细胞计数仪检测花粉混悬液浓度；之后通过倍数转换计算，得到所检测植物的单花花粉量；（5）将解剖分离后的子房材料放入培养皿，置于体视显微镜下进行解剖，解剖时培养皿中加入少量浓度为0.1molL的PBS，统计胚珠数量；（6）根据单花花粉量和胚珠数量，计算花粉-胚珠比；步骤（1）中所述植物材料为发育阶段的花蕾；步骤（1）中所述植物材料的固定是使用50%乙醇：冰乙酸：甲醛按体积比18:1:1混合组成的FAA溶液固定，固定时间48h。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国林业科学研究院热带林业研究所 一种快速统计植物花粉-胚珠比的方法

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