申请/专利权人：四川大学华西医院

申请日：2021-05-31

公开（公告）日：2023-12-01

公开（公告）号：CN113310963B

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64;G01N33/53

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.01#授权;2021.09.14#实质审查的生效;2021.08.27#公开

摘要：本发明公开了一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法，该方法的核心发明点是在多聚甲醛固定前先常温干燥6～12小时。本发明改进方法在NETs的验证实验中，能帮助排除因多聚甲醛固定导致的假阳性，且能明显减少实验过程中细胞被洗掉的风险，有利于中性粒细胞的NETs的相关实验的开展。

主权项：1.一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1、提取中性粒细胞，并调整中性粒细胞浓度；步骤S2、将中性粒细胞加入细胞培养板内，给予或不给予中性粒细胞NETs刺激剂，37℃细胞培养箱孵育；步骤S3、收集细胞进行甩片机离心；步骤S4、甩完片后，取出甩完片的细胞黏附片子；步骤S5、常温干燥6~12h后，多聚甲醛常温固定，Triton透化，BSA常温封闭，T-PBS洗涤；孵育一抗，T-PBS洗涤，常温孵育二抗，DAPI染核封片荧光镜下观察。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 四川大学华西医院 一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法

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