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【发明授权】CL7蛋白质、高活性重组TET酶CL7-NgTET1、其原核表达载体及应用_翌圣生物科技(上海)股份有限公司_202111476804.5 

申请/专利权人:翌圣生物科技(上海)股份有限公司

申请日:2021-12-02

公开(公告)日:2023-12-29

公开(公告)号:CN114107252B

主分类号:C12N9/22

分类号:C12N9/22;C12N9/02;C12N15/70;C12Q1/25

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.12.29#授权;2022.03.18#实质审查的生效;2022.03.01#公开

摘要:本发明提供一种屏蔽核酸酶活性的CL7蛋白质,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。还公开了一种高活性重组TET酶CL7‑NgTET1,其氨基酸序列如SEQIDNO:4所示,及其原核表达载体,其结构为:pET28A‑N6H‑MBP‑CL7‑NgTET1,还公开了其在酶转化法检测DNA甲基化中的应用。本发明在NgTET1基础上进行了设计和改造,通过融合CL7domain获得了CL7‑NgTET1重组融合蛋白。该重组融合蛋白能够显著提高TET蛋白对5mC的氧化能力,提高了该酶的体外生物活力。通过在载体N端引入MBP融合蛋白,可在原核系统中表达,从而极大提高可溶蛋白的产量,从而同时解决了TET酶产量低和酶活低的问题,也极大缩短了生产周期及降低成本。

主权项:1.CL7蛋白质在提高TET酶NgTET1的活性中的应用,其中所述CL7蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司 CL7蛋白质、高活性重组TET酶CL7-NgTET1、其原核表达载体及应用

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