申请/专利权人：石河子大学

申请日：2021-09-01

公开（公告）日：2024-01-02

公开（公告）号：CN113588648B

主分类号：G01N21/84

分类号：G01N21/84;G01N21/29;G01N33/00;G01N21/78;G01N21/31;G01N27/626;G01N30/90;G01N33/15

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.02#授权;2021.11.19#实质审查的生效;2021.11.02#公开

摘要：本发明属于药材检测领域，具体是一种小秦艽花蒙药材的质量检测方法，包括：1取样；2性状鉴别；3显微鉴别：样本粉末显微观察、样本花柄玻片标本显微观察；4理化检测：采用乙酸‑铜离子反应进行环烯醚萜类检识；5一般项检查：包括水分检查、灰分检查、浸出物检查和重金属检查；6化学成分检测：分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法检测进行龙胆苦苷、异荭草苷的定性和定量分析；全部检测结果达到相应的质量指标则符合质量要求。本发明填补了小秦艽花蒙药材质量检测方法的空白，具有全方面、系统化进行质量控制的优点，为小秦艽花的开发利用提供了可靠的科学依据。

主权项：1.一种小秦艽花蒙药材的质量检测方法，包含取样、性状鉴别、显微鉴别、理化检测、一般项检查和化学成分检测，其特征在于，所述的显微鉴别包含下列步骤：A.粉末显微鉴别：将取样样本制成50-60目的粉末，将粉末置于载玻片上，滴加甘油醋酸试液或水合氯醛试液，盖上盖玻片，加热透化，在显微镜下观察样本性状；B.花柄横切显微鉴别：将取样所得样本的花柄放入水中浸泡4~5天，使材料软化，切成2~3mm的花柄小段，浸泡于FAA固定液12h~24h，将花柄小段从固定液中取出，用自来水冲洗12-24h，然后进行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烤片处理，脱水：从45-55%浓度的乙醇开始进行浸泡1-2h进行级次脱水，即，首次为从45-55%浓度的乙醇中进行浸泡1-2h，之后每次将乙醇的浓度提升8-10度，直至达到无水乙醇，每次时间为1-2h，如不能及时进行各级脱水的，从固定液中取出的花柄小段放在70%乙醇中保存；透明：先经1重量份二甲苯兑1.8-2.2重量份乙醇的混合液浸渍0.6-0.6h，再依次转入1重量份二甲苯兑1重量份乙醇的混合液1.8-2.2重量份二甲苯兑1重量份乙醇的混合液中浸渍0.4-0.6h，最后转入纯二甲苯中浸渍0.4-0.6h；浸蜡：把花柄小段放入熔化的石蜡液中浸渍2-3次，每次0.51-1.5h，放置8-15h，浸蜡时温度控制在高于石蜡熔点2-5℃；包埋、切片、贴片、烤片处理，得干燥的样本切片；取已经干燥的切片，放于盛有二甲苯的染缸内脱蜡6-10min，脱完蜡后的切片可依次用纯乙醇1重量份与二甲苯0.8-1.2重量份的混合液，纯乙醇，浓度94-96%乙醇溶液、78-82%乙醇溶液、68-72%乙醇溶液分别洗4-6min，之后进行番红染液染色3-5h，水洗2-4s，之后依次用30-40%乙醇、45-55%乙醇、65-75%乙醇、75-85%乙醇、90%以上乙醇洗1.5-3min，固绿染色4-6s，染色后的切片用纯乙醇洗2-3次，每次10-20s，再用纯乙醇1重量份与二甲苯0.8-1.2重量份比例的混合液洗4-6min，纯二甲苯洗8-12min，洗去多余染料；在洁净盖玻片上滴加1-2mL中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，以免出现气泡，封片后即制成永久性玻片标本，在显微镜下观察，以确定小秦艽花蒙药材的真伪和品质；所述一般项检查为：A.水分检查：检测方法参考2020年版《中国药典》，水分检查方法按照2020年版《中国药典》第四部通则0832水分测定法第二法测定，不得超过9.08%；B.灰分检查：总灰分和酸不溶灰分检查方法按照2020年版《中国药典》第四部通则2302测定，总灰分不得超过7.93%，酸不溶灰分含量不得超过0.79%；C.浸出物检查：浸出物检查方法按照2020年版《中国药典》第四部通则2201照水溶性浸出物下的热浸法测定，不得低于22.44%；D.重金属检查：重金属检查方法为按照2020年版《中国药典》第四部通则2321第一法原子吸收分光光度法和第二法电感耦合等离子体质谱法测定重金属铅、镉、砷、汞、铜含量，铅不得过5mgkg；镉不得过0.4mgkg；砷不得过2mgkg；汞不得过0.2mgkg；铜不得过20mgkg。

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