申请/专利权人：思鹏生物科技(苏州)有限公司

申请日：2023-10-07

公开（公告）日：2024-01-12

公开（公告）号：CN117025542B

主分类号：C12N5/10

分类号：C12N5/10;C07K14/02

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.12#授权;2023.11.28#实质审查的生效;2023.11.10#公开

摘要：本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种激活剂促进HEK293细胞蛋白产量提高的方法，包括以下步骤：S1：配制HEK293细胞专用培养基：基础培养基+0.5‑10μgmL第一激活剂+0.1‑0.25mgmL第二激活剂+0.1‑0.5mgmL蛋白保护剂；第二激活剂由香草酸、三磷酸肌醇按0.2‑0.35:1的质量比混合而成；S2：将重组HEK293细胞接种至HEK293细胞专用培养基中，于37℃、5%CO2、100‑160rpm条件下，悬浮培养24h后，再于32℃低温诱导培养6d。本发明通过在HEK293细胞培养过程中添加激活剂，有效提高了重组蛋白的表达水平。

主权项：1.一种激活剂促进HEK293细胞蛋白产量提高的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：配制HEK293细胞专用培养基：基础培养基+0.5-10μgmL第一激活剂+0.1-0.25mgmL第二激活剂+0.1-0.5mgmL蛋白保护剂；其中，第一激活剂为Akt激活剂SC79；第二激活剂由香草酸、三磷酸肌醇按0.2-0.35:1的质量比混合而成；所述基础培养基配方为：DMEMF12培养基+10mM4-羟乙基哌嗪乙磺酸+100ngmL胰岛素样生长因子1+10ngmL白血病抑制因子+100μML-抗坏血酸-2-磷酸酯+100nM皮质醇+1mMN-乙酰半胱胺酸；所述蛋白保护剂为甘露醇、山梨醇、海藻糖中的一种；S2：将重组HEK293细胞接种至HEK293细胞专用培养基中，并置于37℃、5%CO2、100-160rpm的摇床培养箱中，悬浮培养24h后，再将培养温度降至32℃，低温诱导培养6d。

全文数据：

权利要求：

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