申请/专利权人：北京市农林科学院

申请日：2020-09-30

公开（公告）日：2024-01-16

公开（公告）号：CN114317590B

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.16#授权;2022.04.29#实质审查的生效;2022.04.12#公开

摘要：本发明公开了一种将植物基因组中的碱基C突变为碱基T的方法。本发明方法包括如下步骤：将SpRYn、胞嘧啶脱氨酶、sgRNA和UGI导入植物体内，实现将植物基因组靶点序列中的C突变为T。通过实验证明：本发明方法可对位于植物基因组上的PAM序列为NGN的靶点序列中的碱基C进行编辑，实现碱基C到碱基T的替换，在拓展可编辑的C的范围的同时，还提高了碱基替换效率。

主权项：1.一种将植物基因组靶点序列中的C突变为T的方法，包括如下步骤：将SpRYn的编码基因、PmCDA1的编码基因、转录tRNA-esgRNA的DNA分子、UGI的编码基因和筛选剂抗性蛋白的编码基因导入植物体内，使所述SpRYn、所述PmCDA1、所述tRNA-esgRNA、所述UGI和所述筛选剂抗性蛋白的编码基因均得到表达，实现将植物基因组靶点序列中的C突变为T；所述SpRYn的编码基因、所述转录tRNA-esgRNA的DNA分子、所述PmCDA1的编码基因、所述UGI的编码基因和所述筛选剂抗性蛋白的编码基因通过重组表达载体导入植物体内；所述重组载体包括含有所述转录tRNA-esgRNA的DNA分子的表达盒和依次含有所述SpRYn的编码基因、所述PmCDA1的编码基因、所述UGI的编码基因、所述UGI的编码基因、自切割寡肽的编码基因和所述筛选剂抗性蛋白的编码基因的表达盒；所述SpRYn为氨基酸序列是序列2所示的蛋白质；所述PmCDA1为氨基酸序列是序列3所示的蛋白质；所述UGI为氨基酸序列是序列4所示的蛋白质；所述tRNA-esgRNA如式I所示：tRNA-所述靶点序列转录的RNA-esgRNA骨架（式I）；所述tRNA为将序列1第597-673位中的T替换为U得到的RNA分子；所述esgRNA骨架为将序列1第694-779位中的T替换为U得到的RNA分子；所述tRNA-esgRNA靶向靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NGN；N为A、T、C或G；所述植物为水稻。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京市农林科学院 一种将植物基因组中的碱基C突变为碱基T的方法

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