申请/专利权人：北京市农林科学院

申请日：2020-09-30

公开（公告）日：2024-01-16

公开（公告）号：CN114317596B

主分类号：C12N15/84

分类号：C12N15/84;A01H5/00;A01H6/46

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.16#授权;2022.04.29#实质审查的生效;2022.04.12#公开

摘要：本发明公开了一种将植物基因组靶点序列中的A突变为G的方法。该方法包括如下步骤：将SpRYn、腺嘌呤脱氨酶和esgRNA导入植物体内，实现将植物基因组靶点序列中的A突变为G；所述esgRNA靶向靶点序列；所述esgRNA如式I所示：所述靶点序列转录的RNA‑esgRNA骨架式I。通过实验证明：本发明方法可对位于植物基因组上的PAM序列为NGC或NGA或NGG的靶点序列中的碱基A进行编辑，实现碱基A到碱基G的替换，在拓展可编辑的A的范围的同时，还提高了碱基替换效率。

主权项：1.一种将植物基因组靶点序列中的A突变为G的方法，为如下1）或2）：所述1）包括如下步骤：将SpRYn、腺嘌呤脱氨酶和sgRNA导入植物体内，实现将植物基因组靶点序列中的A突变为G；所述2）包括如下步骤：将SpRYn的编码基因、腺嘌呤脱氨酶的编码基因和转录sgRNA的DNA分子导入植物体内，使所述SpRYn、所述腺嘌呤脱氨酶和所述sgRNA均得到表达，实现将植物基因组靶点序列中的A突变为G；所述SpRYn为氨基酸序列是序列4所示的蛋白质；所述腺嘌呤脱氨酶为ecTadA和ecTadA*；所述ecTadA为氨基酸序列是序列2所示的蛋白质；所述ecTadA*为氨基酸序列是序列3所示的蛋白质；所述sgRNA为esgRNA；所述esgRNA如式I所示：所述靶点序列转录的RNA-esgRNA骨架（式I）；所述esgRNA骨架为将序列1第617-702位中的T替换为U得到的RNA分子；所述sgRNA靶向靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NGC或NGA；N为A、T、C或G；所述植物为水稻。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京市农林科学院 一种将植物基因组靶点序列中的A突变为G的方法

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