申请/专利权人：健颐生物科技发展(山东)有限公司

申请日：2023-12-28

公开（公告）日：2024-01-30

公开（公告）号：CN117467598A

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071;A01K15/02

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.20#实质审查的生效;2024.01.30#公开

摘要：本发明属于动物细胞技术领域，具体涉及一种肝细胞源PCSK9外泌体的制备方法。雌性SD大鼠通过喂食高脂饲料，得到营养肥胖型大鼠；在低氧环境中，营养肥胖型大鼠进行跑台训练，得到低氧训练肥胖大鼠；其中，低氧环境中的氧浓度为13‑14%，跑台训练是先进行适应性跑台训练再进行中等强度跑台训练；分离低氧训练肥胖大鼠的外周血血清，外周血血清分离得到肝细胞源PCSK9外泌体。本发明获得的外泌体可以调控脂肪组织免疫微环境，消除脂肪组织炎症，为进一步脂肪组织代谢类疾病的药物开发或预防措施提供帮助。

主权项：1.一种肝细胞源PCSK9外泌体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）营养肥胖型大鼠模型的构建雌性SD大鼠通过喂食高脂饲料，得到营养肥胖型大鼠；（2）低氧训练肥胖大鼠模型的构建在低氧环境中，营养肥胖型大鼠进行跑台训练，得到低氧训练肥胖大鼠；其中，低氧环境中的氧浓度为13-14%，跑台训练是先进行适应性跑台训练再进行中等强度跑台训练；适应性跑台训练的条件是跑台速度从11mmin递增到20mmin，训练时间从20mind递增到60mind；中等强度跑台训练的条件是跑台速度为20mmin，训练时间为每天1小时，每周5天；（3）PCSK9外泌体的获得分离低氧训练肥胖大鼠的外周血血清，外周血血清分离得到肝细胞源PCSK9外泌体；步骤（3）中外周血血清分离的方法是外周血血清通过离心分离得到总外泌体，然后采用PCSK9抗体包被的磁珠分离得到肝细胞源PCSK9外泌体。

全文数据：

权利要求：

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