申请/专利权人：贵州省生物技术研究所(贵州省生物技术重点实验室、贵州省马铃薯研究所、贵州省食品加工研究所)

申请日：2022-07-08

公开（公告）日：2024-01-30

公开（公告）号：CN115197854B

主分类号：C12N1/14

分类号：C12N1/14;C12N3/00;C12Q1/04;C12R1/645

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.30#授权;2022.11.04#实质审查的生效;2022.10.18#公开

摘要：本发明公开了一种红曲发酵夏秋茶菌种筛选方法，包括：菌体的活化：选取适用于食品及保健食品的4株红曲菌，分别为保藏编号CGMCCNo.3.890的橙色红曲霉、保藏编号CGMCCNo.3.4629的紫红曲霉、保藏编号CGMCCNo.3.15746的红色红曲霉、保藏编号CGMCCNo.3.7196锈色红曲霉；孢子悬浮液的制备；菌种的筛选：包括孢子悬浮液的接种、菌体干重的测定以及色价的测定。本红曲发酵夏秋茶菌种筛选方法，筛选出了最适合发酵夏秋茶的菌种红色红曲霉，红色红曲霉能改善夏秋茶的滋味苦涩、香气低的问题，将益生菌‑红曲菌与夏秋茶结合，利用生物转化获得功能性茶，能提高夏秋茶利用率，从而减少资源浪费。

主权项：1.一种红曲发酵夏秋茶菌种筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：菌体的活化：选取适用于食品及保健食品的4株红曲菌，分别为保藏编号CGMCCNo.3.890的橙色红曲霉、保藏编号CGMCCNo.3.4629的紫红曲霉、保藏编号CGMCCNo.3.15746的红色红曲霉、保藏编号CGMCCNo.3.7196锈色红曲霉，采用平板划线法分别将4株红曲菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA斜面上，置于28℃培养箱中培养7天，挑取较好菌落反复采用平板划线法将其进行活化；步骤二：孢子悬浮液的制备：分别从4株活化好的红曲菌平板中刮取一环菌体于PDA培养皿中培养7天，用7mm打孔器分别从4株活化好的红曲菌平板中打三个菌饼于无菌PDA培养皿中，倒置培养5天，再使用30mL无菌水刮洗菌体，过滤于无菌三角瓶中，使用血球计数板计数，确保孢子浓度达106cfumL；步骤三：菌种的筛选：包括孢子悬浮液的接种、菌体干重的测定以及色价的测定；孢子悬浮液的接种：分别将4株红曲菌的孢子悬浮液按2％接种量接入基础培养液中，于180rmin、28℃摇瓶培养5天，每株红曲菌做三个平行；菌体干重的测定：使用烘干恒重的定量滤纸过滤发酵液，滤液用50mL离心管收集备用，滤渣用超纯水充分洗涤后置于60℃烘干至恒重，称重计算前后质量差即得菌体干重；色价的测定：参照GB1886.19-2015测定过滤后的发酵液色价；其中，基础培养液的制备方法为：分别称取葡萄糖1g、蛋白胨0.5g于100mL三角瓶中，加入50mL茶汁，于121℃灭菌15min，冷却备用；进一步地，茶汁的制备方法为：准确称取夏秋茶5g于茶壶中，2000mL蒸馏水煮沸3分钟，过滤，稀释2倍即得备用茶汁；通过红曲发酵夏秋茶菌种筛选方法筛选后，发现红色红曲霉为四株红曲菌株中对夏秋茶适生性最强的菌株，红色红曲霉的适生性种子液基质配方为：蔗糖1.141g50ml、蛋白胨0.712g50ml、硫酸镁0.048g50ml，红曲菌体重量为0.256g50ml、色价为1.323ug。

全文数据：

权利要求：

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