申请/专利权人：扬州大学

申请日：2023-11-08

公开（公告）日：2024-02-06

公开（公告）号：CN117510626A

主分类号：C07K16/12

分类号：C07K16/12;C12N15/70;G01N33/569

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要：本发明涉及基因工程技术领域，公开了产气荚膜梭菌蛋白ArcB、rpsB、TmpC多克隆抗体制备以及应用；利用原核表达方法制备得到三种重组蛋白，制备鼠源多克隆抗体并检测其效价和特异性，应用多克隆抗体检测产气荚膜梭菌蛋白ArcB、rpsB、TmpC免疫原性和亚细胞定位；制备的多克隆抗体具有较高的抗体效价且ArcB、rpsB、TmpC阳性血清特异性较好；多克隆抗体与产气荚膜梭菌具有良好的反应性，表明产气荚膜梭菌蛋白ArcB、rpsB、TmpC具有良好的免疫原性；本发明提供的ArcB、rpsB、TmpC多克隆抗体可用于检测产气荚膜梭菌与蛋白ArcB、rpsB、TmpC的功能机制研究。

主权项：1.一种产气荚膜梭菌蛋白多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：步骤1，PCR扩增产气荚膜梭菌基因序列并使用同源重组的方法插入表达载体，形成重组表达质粒；步骤2，随后将重组表达质粒转化至工程菌大肠杆菌中，挑取单克隆株，通过PCR和测序鉴定，鉴定正确的克隆株为阳性克隆株，即获得蛋白的表达菌株；步骤3，对步骤2中的蛋白的表达菌株进行表达、纯化与鉴定得到产气荚膜梭菌蛋白；步骤4，将纯化的产气荚膜梭菌蛋白稀释与等体积的QuickAbody-Mouse3W佐剂混合，在小鼠腿部肌肉内免疫两次，最后一次免疫后一周，从免疫和未免疫小鼠中采集血样离心，得到多克隆抗体。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 扬州大学 产气荚膜梭菌蛋白ArcB、rpsB、TmpC多克隆抗体的制备和应用

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