申请/专利权人：四川省农业科学院园艺研究所

申请日：2020-12-25

公开（公告）日：2024-02-23

公开（公告）号：CN112697556B

主分类号：G01N1/28

分类号：G01N1/28;G01N1/30;G01N1/42

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.23#授权;2021.05.11#实质审查的生效;2021.04.23#公开

摘要：本发明涉及生物技术，具体涉及柑橘类植物根尖染色体制片的方法。包括前处理、制片步骤，所述的前处理步骤包括种子浸泡、萌发培养，以获取根尖，所述的前处理步骤中，萌发培养之后，还包括以下步骤：S1冷藏处理：将获取的根尖进行冷藏处理；S2N2O高压处理：冷藏处理后将根尖置于压力罐中通入高压N2O气体进行保压，之后采用细胞固定液进行固定。本发明制得的染色体改进了柑橘染色体着丝粒部位缢缩状态，染色体缢痕清晰。

主权项：1.一种柑橘类植物根尖染色体制片的方法，包括前处理、制片步骤，所述的前处理步骤包括种子浸泡、萌发培养，以获取根尖，其特征在于：所述的前处理步骤中，萌发培养之后，还包括以下步骤：S1冷藏处理：将获取的根尖进行冷藏处理；S2N2O高压处理：冷藏处理后将根尖置于压力罐中通入高压N2O气体进行保压，之后采用细胞固定液进行固定；所述的S1冷藏处理步骤中，冷藏温度低于5℃，冷藏时间大于5小时，每间隔30分钟通入高压N2O气体后保压15分钟后恢复常压，所述高压N2O气体压力为0.4～0.7MPa；所述的S2N2O高压处理步骤中，通入高压N2O气体的压力为1～1.2MPa，进行保压的时间为1小时以上；所述的制片步骤包括以下步骤：S11酶解：用蒸馏水漂洗根尖后，将根尖置于酶解液中进行酶解，之后再次用蒸馏水漂洗；S22第一次干燥：将经S11酶解步骤后的根尖吸尽蒸馏水后进行第一次干燥；S33第二次干燥：将经S22第一次干燥步骤后的根尖采用乙醇漂洗后吸尽乙醇进行第二次干燥；S44制得细胞悬浮液：将经S33第二次干燥步骤后的根尖置于冰醋酸中捣碎制得细胞悬浮液；S55细胞悬浮液冷冻：将细胞悬浮液进行冷冻处理后滴于载玻片完成制片，冷冻处理温度为0～4℃。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 四川省农业科学院园艺研究所 一种柑橘类植物根尖染色体制片的方法

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