申请/专利权人：南开大学

申请日：2023-11-28

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN117607458A

主分类号：G01N33/68

分类号：G01N33/68;G01N21/552;G01N21/59

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.15#实质审查的生效;2024.02.27#公开

摘要：本发明公开了一种基于表面等离子共振技术分析药物在血清白蛋白上的结合位点的方法，该方法包括：准备两种类型的第一溶液，得到位点标记物I与Sudlow位点I结合的亲和力KdI和位点标记物II与Sudlow位点II结合的亲和力KdII；准备多份第二溶液和多份第三溶液，得到待测药物和血清白蛋白在位点标记物I存在下的竞争亲和力值KdX+I和待测药物和血清白蛋白在位点标记物II存在下的竞争亲和力值KdX+II；准备第四溶液，得到待测药物与血清白蛋白的亲和力KdX，比较KdX分别与KdX+I和KdX+II的关系，确定药物结合位点。采用本发明的方法，仅通过四次测试可同时获得待测药物与血清白蛋白的亲和力值以及待测药物在血清白蛋白的具体结合位点。

主权项：1.一种基于表面等离子共振技术分析药物在血清白蛋白上的结合位点的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，采用直接耦连的方式将血清白蛋白固定于生物芯片上；步骤2，准备两种类型的第一溶液，第一溶液为溶剂和药物小分子的混合物，一种类型的第一溶液的药物小分子能够与血清白蛋白的Sudlow位点I结合，另一种类型的第一溶液的药物小分子能够与血清白蛋白的Sudlow位点II结合，能够与血清白蛋白的Sudlow位点I结合的药物小分子为位点标记物I，能够与血清白蛋白的Sudlow位点II结合的药物小分子为位点标记物II；将两种类型的第一溶液按照药物小分子浓度递增的顺序依次上机流过所述生物芯片，通过表面等离子共振技术采集实时信号，得到SPR数据，进而得到位点标记物I与血清白蛋白的Sudlow位点I结合的亲和力KdI和位点标记物II与血清白蛋白的Sudlow位点II结合的亲和力KdII；步骤3，准备多份第二溶液：将待测药物溶解在第二混合物中，所述第二混合物为溶剂和位点标记物I的混合物，第二混合物中位点标记物I的浓度为2～5KdI；准备多份第三溶液：将待测药物溶解在第三混合物中，所述第三混合物为溶剂和位点标记物II的混合物，第三混合物中位点标记物II的浓度为2～5KdII；将多份第二溶液和多份第三溶液分别按照待测药物浓度递增的顺序依次上机流过所述生物芯片，通过表面等离子共振技术采集实时信号，得到SPR数据，进而得到待测药物和血清白蛋白在位点标记物I存在下的竞争亲和力值KdX+I和待测药物和血清白蛋白在位点标记物II存在下的竞争亲和力值KdX+II；步骤4，比较KdX分别与KdX+I和KdX+II的关系：如果KdX+I显著大于KdX且KdX+II与KdX无显著差异，待测药物结合于血清白蛋白的Sudlow位点I；如果KdX+II显著大于KdX且KdX+I与KdX无显著差异，则待测药物结合于血清白蛋白的Sudlow位点II；如果KdX+II、KdX+I均与KdX无显著差异，则待测药物与血清白蛋白的Sudlow位点I和Sudlow位点II均有相互作用；计算其中，Kdmax为竞争亲和力值和KdX中较大的值，Kdmin为竞争亲和力值和KdX中较小的值，当时，Kdmax和Kdmin为无显著差异，当时，Kdmax显著大于Kdmin；其中，获得KdX的方法为：准备多份第四溶液，第四溶液为溶剂和待测药物的混合物，第四溶液按照待测药物浓度递增的顺序依次上机流过所述生物芯片，通过表面等离子共振技术采集实时信号，得到SPR数据，得到待测药物与血清白蛋白的亲和力KdX。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南开大学 基于表面等离子共振技术分析药物在血清白蛋白上的结合位点的方法

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