申请/专利权人：深圳大学

申请日：2023-11-30

公开（公告）日：2024-03-05

公开（公告）号：CN117647552A

主分类号：G01N24/08

分类号：G01N24/08;G16B40/00;G01N33/92;G01N33/543;G01N33/58

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.22#实质审查的生效;2024.03.05#公开

摘要：本发明公开了一种猪血浆脂蛋白亚类测定方法与应用。以猪血浆为试验样本，通过NMR技术获取血浆1HNMR数据，结合经UC法分离检测得到的猪血浆脂蛋白亚类数据，基于偏最小二乘回归partialleastsquaresregression,PLSR原理建立116种多变量回归预测模型，建立一种猪血浆脂蛋白亚类的高通量快速测定方法。

主权项：1.一种猪血浆脂蛋白亚类测定方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1将至少400μL猪血浆样品在12000rpm、4℃条件下离心5min，取上清液转移至1.5mL离心管，按血浆：缓冲液＝1:1至1:2的比例加入pH为7.0～7.4，NaCl浓度为0～0.9％、NaH2PO4浓度为0.05～0.1M的缓冲液，并在12000rpm、4℃条件下再次离心5min，取600μL上清液注入5mm核磁管中，按照1HNMR采集步骤和实验参数，使用600M超导核磁共振波谱仪采集对应的1HNMR图谱数据；2通过UC法分离血浆脂蛋白亚类，利用ELISA方法测定得到血浆脂蛋白亚类的定性和定量数据，将血浆脂蛋白亚类分类；为方便对各脂蛋白亚类的生化信息进行统计分析，通过相同的标准对谱图进行相位和基线调整，并以α-葡萄糖中1位碳的H1质子双峰的化学位移5.22ppm和TSP单峰化学位移0.00ppm为基准，进行定标操作；3利用MATLABR2022a软件，运行sub-align代码对1HNMR谱图进行对齐处理；4以UC法得到的猪血浆脂蛋白亚类生化信息为预测变量Y，1HNMR谱图数据中0.6～1.4ppm部分为观测变量X，将数据导入sub-PLSR代码中，建立回归预测模型，并通过交叉验证方式评价模型的预测效果，获得优化后的与血浆脂蛋白亚类种类对应的回归预测模型；5根据步骤4获得的优化后的回归预测模型，对待测猪血浆样品中的脂蛋白亚类进行测定。

全文数据：

权利要求：

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