申请/专利权人：福建农林大学

申请日：2023-12-06

公开（公告）日：2024-03-08

公开（公告）号：CN117660544A

主分类号：C12N15/89

分类号：C12N15/89;A01K67/0275

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.26#实质审查的生效;2024.03.08#公开

摘要：本发明公开了一种基于受精卵卵壳软化的大黄鱼高效基因组编辑方法，包括以下步骤：首先获取大黄鱼自然受精的受精卵，利用5mgml的链霉蛋白酶在24℃水温下消化受精卵30min以使卵壳软化，将Cas9蛋白、sgRNA及酚红混合，采用显微注射方法，将混合物注射入胚盘期受精卵中，孵化48h后，可以获得存活率64％，外源靶基因突变率最高达86.3％。本发明第一次利用卵壳软化的方法在海水鱼中建立了基因组编辑方法，相比于以往的基因组编辑方法，该基因组编辑方法不仅操作简单，而且可大大提高基因组编辑受精卵的孵化率和基因组编辑效率，为开展大黄鱼基因的功能研究和大黄鱼遗传改良提供了新的技术手段。

主权项：1.一种基于受精卵卵壳软化的大黄鱼高效基因组编辑方法，其特征在于，包括：1获取自然受精的大黄鱼受精卵；2使用链霉蛋白酶消化受精卵卵壳；3利用显微注射技术将含Cas9蛋白、sgRNA及酚红的混合液注射到大黄鱼受精卵动物极。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 福建农林大学 一种基于受精卵卵壳软化的大黄鱼高效基因组编辑方法

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