申请/专利权人:江苏省农业科学院
申请日:2023-12-04
公开(公告)日:2024-03-12
公开(公告)号:CN117683137A
主分类号:C07K16/46
分类号:C07K16/46;C12N15/81;A61K39/42;A61P31/14;A61P31/16;C12R1/84
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.03.29#实质审查的生效;2024.03.12#公开
摘要:靶向新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重组双特异性纳米抗体及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明从免疫羊驼的VHH噬菌体文库中筛选出两条分别针对新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重链抗体可变区序列,通过柔性连接肽连接后定向克隆至载体pPIC9K构建重组质粒,转化至毕赤酵母X‑33感受态细胞中筛选用于表达重组双特异性纳米抗体的工程菌株,经甲醇诱导,收集上清并纯化后获得能同时靶向新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重组双特异性纳米抗体。该重组双特异性纳米抗体的相对分子质量大小为28.6kDa,浓度为0.8mgmL,纯度大于90%,产量高达3.5mgL,生物学活性高。
主权项:1.靶向新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重组双特异性纳米抗体,其特征在于,从免疫羊驼的VHH噬菌体文库中筛选出两条分别针对新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重链抗体可变区序列NDV-Nb043和H9-Nb055,通过柔性连接肽连接这两条重链抗体可变区序列NDV-Nb043和H9-Nb055获得连接产物NDV-Nb043+H9-Nb055,并将其定向克隆至载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-NDV-Nb043+H9-Nb055,再转化至毕赤酵母X-33感受态细胞中筛选用于表达重组双特异性纳米抗体的工程菌株,并对工程菌株进行甲醇诱导,收集上清并纯化后,获得能同时靶向新城疫病毒和H9亚型禽流感病毒的重组双特异性纳米抗体。
全文数据:
权利要求:
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